BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书价格_品牌:百奥莱博-丁香通官网

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名称：BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书
品牌：百奥莱博
编号：BTN60405
规格：10mL
产地：国产|进口

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N,N,N,N-四甲基对*二胺2盐*(代"酸")盐 Methylene Blue trihydratee 637-01-4
Earle"s平衡盐粉剂(含**糖酚红) 1×EBSS 1L|10×1L
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L-酪*酸 L-Glutamic acid 60-18-4
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·一管式双链cDNA合成试剂盒
编号：BTN130308
英文名称：One-Tube double-stranded cDNA Synthesis Kit
规格：10次
本产品是用于一管式双链cDNA合成的试剂盒。cDNA第一链合成的原理是以OligodT为通用引物的、MMLV催化的逆转录反应。其原理如下：

cDNA第二链合成的原理是用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，再用DNA Polymerase I通过切口平移(nick translation)反应进行RNA链取代合成cDNA第二链，其原理图如下：

产品特点：
1. 即开即用，含有合成两条cDNA链的所有试剂。
2.适用于含poly rA的RNA，对不含poly rA的RNA(如细菌RNA)，不能使用本试剂盒制备ds cDNA。
3.一管式进行，第一链cDNA合成后不需要任何处理，直接进入第二链的合成。
4. 所得双链cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库构建、抑制性差减杂交等。
5. 本试剂盒足够10次80μL体系的双链cDNA合成反应。
6. 如果需要合成全长cDNA，最好选用SMART全长cDNA双链合成试剂盒。

试剂盒组成：

成分	规格
Oligo dT引物	10μl
cDNA第一链合成缓冲液	40μl
MMLV 逆转录酶(200U/μL)	10μl
5×cDNA 第二链合成缓冲液	160μl
20×cDNA 第二链合成酶混合液	40μl
T4 DNA聚合酶	20μl
0.2 M EDTA溶液	40μl
超纯水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：mRNA的制备
本试剂盒不提供mRNA提取试剂，用户需自备相关试剂。

二：双链cDNA的合成
1.在一个干净的塑料离心管中，按下表设置cDNA合成反应：

成分	用量
自备mRNA样品	4μl(0.5-2μg)
Oligo dT引物	1μL
70℃ 2分钟后室温放置2分钟，短暂离心
cDNA 第一链合成缓冲液	4μL
MMLV 逆转录酶	1μL
轻柔吹打混匀后42℃保温90分钟合成第一链cDNA
超纯水	48μL
cDNA 第二链合成缓冲液	16μL
cDNA 第二链合成酶混合液	4μL
轻柔吹打混匀后，短暂离心，16℃保温2小时
自备的T4 DNA聚合酶	2μL
轻柔吹打混匀后，16℃继续保温30分钟
0.2M EDTA溶液	4μL

注：如果不需要将双链cDNA平末端化，则可以跳过T4 DNA聚合酶处理步骤。
2.电泳5μL检测cDNA质量。如果cDNA在0.5-10Kb的范围内呈模糊一片，则cDNA合格。如果没看见cDNA或有其他异常，需查找原因后再继续。
3. 所得cDNA可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA 文库构建、抑制性差减杂交等实验。

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BTN60405型1M DTT溶液(RNase-Free)说明书

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PY02-006 双料乳糖胆盐胨水 250克
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1M DTT溶液(RNase-Free)的纯度及用途：纯度高质含量低，适用于研究和配制标准液；纯度较高，杂质含量较低，适用于定性和定量分析重量略低于二级试剂，用途近似二级试剂化学试剂按纯度由低到高可分为工业纯、实验纯（LR）、化学纯（CP）、分析纯（AR）、优级纯（GR）和超纯等多种规格。