慢病毒与 RNAi（RNA干扰）技术服务（威斯腾生物-中关村生物医学研发检测共享平台！）

提供商 ： 威斯腾生物

服务名称 ：慢病毒与 RNAi（RNA干扰）技术服务

简介：近年来的研究表明，将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞，可以使mRNA发生特异性的降解，导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(PTGS)被称为RNA干扰（RNAi）。通过构建RNAi表达载体制备shRNA(发卡结构小干扰RNA)，已成为进行RNA干扰实验的常用手段之一。 而目前为了感染原代细胞和难感染的细胞系或者在动物水平进行RNAi，研究科学家更多的选择了慢病毒载体。由于慢病毒可以同时感染分裂和非分裂细胞、整合性以及免疫原性低等优点，目前在RNAi的研究中，基于慢病毒构建的shRNA被最广泛的使用。而在RNAi研究需要长期观察或者需要进行动物实验时，基于慢病毒构建的shRNA的优势更为明显。

基于载体的shRNA载体构建：
　　本中心提供利用自主开发的先进siRNA设计软件为客户提供RNAi设计和shRNA载体构建服务。中心还为客户提供包括shRNA质粒表达载体构建、shRNA病毒表达载体（包括可诱导系统）、RNAi阴性对照、RNAi阳性对照等。

基于载体的microRNA载体构建：
　　 公司提供microRNA的构建服务，可以将客户研究的microRNA序列构建至质粒载体或者慢病毒载体。

RNA干扰慢病毒构建包装纯化

目前我们能够为您提供包括RNAi靶序列设计、慢病毒载体构建、测序、慢病毒生产等一站式服务。

服务流程：
1、客户提供背景资料，我们共同探讨服务的可行性和技术路线。
2. 签订技术服务合同，商定服务收费、任务期限等，客户需要预付实验总费用的50％-70%作为实验预付款。
3. 实验结束，按合同内容交付结果。

实验流程：

1. shRNA表达载体的选用：客户可以根据实验的需要选用不同的慢病毒载体。 2. 设计RNAi靶序列： 3. shRNA慢病毒载体构建：合成模板、双酶切shRNA空载体、连接与转化、测序鉴定、质粒制备及定量。 4. 提供实验结果： 我们将提供包装纯化好的各靶点的慢病毒颗粒、测序结果、滴度检测结果和病毒构建包装纯化实验报告等。

收费标准和服务周期：
项目	时间	服务编号
定制型RNAi靶点慢病毒颗粒制备
1．定制型慢病毒颗粒：2×108 TU （滴度1×108-1×109TU/ml）	6个工作周	LVD-289
2．定制型慢病毒颗粒：5×108 TU （滴度1×108-1×109TU/ml）	6个工作周	LVD-589
3．定制型慢病毒颗粒：1×109 TU （滴度1×108-1×109TU/ml）	6个工作周	LVD-1089
RNAi服务
1．设计干扰靶点，通过实验验证靶点有效性，有效靶点慢病毒颗粒大批量制备2×108 TU （滴度1×108-1×109TU/ml）	14个工作周	LVR-289
2．设计干扰靶点，通过实验验证靶点有效性，有效靶点慢病毒颗粒大批量制备5×108 TU （滴度1×108-1×109TU/ml）	14个工作周	LVR-589
如有特殊需要请咨询公司技术部门。客户还可以委托我公司进行动物实验、细胞和动物水平各项功能学的检测。 如：QPCR，RT-PCR，流式，电镜，EMSA，Tunel,组化，MTT，WB，Elisa,IP等。