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文献和实验
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提供商 ： 威斯腾生物
服务名称 ：慢病毒/腺病毒包装纯化（RNAi/过表达）服务
慢病毒包装
威斯腾生物（Western Biotechnology）专业实验平台是目前较为先进，实验技术齐全的平台和国内外多家知名研究院所合作，为国内6000多家客户提供专业技术服务。威斯腾生物平台的慢病毒技术是国内做得最早，质量最稳定的产品，专业技术团队，标准化生产流程，严格的质量把控，本平台为您提供慢病毒载体构建，慢病毒包装以及基于慢病毒技术的稳定细胞系构建，后续功能验证的体外和体内实验等相关服务。
慢病毒（Lentivirus）具有感染谱广泛，可以有效感染分裂期和静止期细胞，长期稳定表达外源基因等优点，因此成为导入外源基因的有力工具。现在慢病毒系统已经被广泛应用到各种细胞系的基因过表达，RNA干扰，microRNA研究以及活体动物实验中。
慢病毒载体系统为4质粒系统，包括pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G和目的穿梭质粒。其中穿梭质粒（目的穿梭质粒）含有eGFP（能表达绿色荧光蛋白），pRsv-REV、pMDlg-pRRE、pMD2G含有病毒包装所必须的元件。
慢病毒载体的优越性
基于HIV的慢病毒载体（Lentiviral Vector）能有效地感染分裂细胞和非分裂细胞，比传统的逆转录病毒载体应用范围广。与脂质体转染相比，慢病毒感染具有更高的效率； 能高效地将目的基因转导入体内和体外培养的细胞中去；能够稳定地长期地表达目的基因，优于腺腺病毒载体；由于更换了膜蛋白（VSVG），宿主范围相当广泛。通过合理设计极大的加强了其安全性，没有产生复制型慢病毒的可能性，安全性考来自其整合特性。
【服务项目】
一、慢病毒载体构建服务
1.1 Western Biotechnology可为您构建包括eGFP、RFP、puromycin、neomycin等各种标签的慢病毒基因过表达载体和RNA干扰载体，可以为客户的实验设计提
供丰富的选择方案。
1.2 本平台还可以根据客户需要对载体的启动子和表达框进行改造，实现组织特
异性或调控表达的特殊需要。
二、RNAi慢病毒系列服务
2.1 siRNA化学合成。
2.2重组慢病毒shRNA慢病毒质粒构建。
2.3定制shRNA慢病毒构建与包装服务(已知有效靶序列)。
客户需提供已通过文献查询或实验证明的有效靶点序列信息的 shRNA的序列.我们按照客户要求完成shRNA慢病毒产品的制备，可以提供慢病毒shRNA质粒和shRNA慢病毒产品等。
定制RNAi慢病毒产品可直接用于细胞系，原代细胞，干细胞，动物组织等的感染，表达shRNA。
* Easy shRNA慢病毒构建与包装服务
腺病毒包装
腺病毒(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70～90 nm的颗粒，由252个壳粒呈廿面体排列构成。每个壳粒的直径为7～9 nm。衣壳里是线状双链DNA分子，约含35 000 bp，两端各有长约100 bp的反向重复序列。由于每条DNA链的5，端同相对分子质量为55X103Da的蛋白质分子共价结合，可以出现双链DNA的环状结构。人体腺病毒已知有33种，分别命名为adl～ad33，研究得最详细是ad2。腺病毒基因组转录产生mRNA，已知的转录单位至少有5个：正Ⅰ区位于病毒基因组左侧，可再分成正ⅠA和正ⅠB，与细胞转化有关；正Ⅱ区编码DNA结合蛋白，参与病毒的复制；正Ⅲ区编码出现在宿主细胞表面的一种糖蛋白；正Ⅳ区位于ad2基因组右端，受正Ⅱ区编码的DNA结合蛋白质调控；第5个转录单位在病毒感染中期合成ad2蛋白质Ⅳ。
腺病毒特性
威斯腾生物腺病毒表达系统是以Ad5血清型E1/E3缺陷型腺病毒DNA为骨架，在克隆、包装、扩增等各部分条件做了改进和优化，达到了克隆阳性率更高、质量更可靠、包装稳定、出毒迅速、滴度高等效果。在此基础上，提供各种带有不同报告基因、不同标签的重组腺病毒载体服务。同时我们还可以根据客户需要完成各种较高难度的载体构建，如双基因载体构建，具有细胞毒性作用基因的腺病毒载体构建等。所得到的毒液可以用于信号转导、基因转位、Co-IP、动物实验、干细胞研究等科研实验。
我们的服务
（1）表达目的基因的重组腺病毒载体构建服务（最大插入片段5kb）
（2）超大量及超高滴度的重组腺病毒扩增和纯化服务
（3）重组腺病毒载体的鉴定
（4）shRNA基因沉默效应验证
（5）表达shRNA的重组腺病毒载体的构建服务
（6）构建各种带不同标签和不同报告基因的腺病毒载体
（7）可调控表达的重组腺病毒载体
（8）目的基因的克隆，或者定购
（9）质量控制
服务承诺
（1）我们承诺从得到cDNA到完成纯化的服务时间将在70个工作日内完成
（2）我们承诺所提供的病毒毒液的滴度在1011PFU/ml以上（纯化后），总量不少于1012 PFU/ml
（3） 所提供的毒液量：2～3ml
实验服务流程
威斯腾生物服务项目
| 分子生物学类 | 蛋白质与免疫学 | 动物实验 |
| 实时荧光定量PCR | 单克隆抗体制备 | 帕金森疾病模型 |
| 免疫共沉淀（Co-IP） | 多克隆抗体制备 | 抑郁症动物模型 |
| ELISA（酶联免疫吸附法）技术 | Western-blot 实验服务 | 脊髓损伤模型 |
| 生化指标检测 | 蛋白双向电泳实验服务 | 脑外损伤模型 |
| 双荧光素酶报告基因检测 | 原核蛋白表达纯化 | 骨神经损伤模型 |
| 染色质免疫共沉淀（ChIP） | 真核蛋白表达纯化 | 心肌缺血模型 |
| GST pull Down | ITRAQ定量蛋白质组学 | 心力衰竭模型 |
| SLAC蛋白组学 | 肺动脉高血压动物模型 | |
| 高血压模型 | ||
| 病毒类 | 实验课题整体外包 | 粥样动脉硬化模型 |
| 过表达/干扰慢病毒包装纯化 | 整体课题外包 | 大脑中动脉阻塞模型 |
| 过表达/干扰腺病毒包装纯化 | 细胞整体实验外包 | 慢性之气管炎模型 |
| 逆转录病毒包装纯化 | 动物整体实验外包 | 过敏性哮喘模型 |
| 腺相关病毒包装纯化 | 肺炎大鼠模型 | |
| 肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
| 蛋白芯片 | 原代细胞培养 | 肝纤维化模型 |
| 细胞因子芯片 | 骨髓间充质干细胞培养 | 胆结石模型 |
| 生长因子芯片 | 脂肪干细胞培养 | 急性胰腺炎模型 |
| 信号通路磷酸化水平检测芯片 | 心肌成纤维细胞培养 | 急性肾衰竭模型 |
| BioPlex悬浮芯片 | 软骨细胞培养 | 体内血栓模型 |
| 生长因子芯片 | 血管内皮细胞培养 | 关节炎模型 |
| 炎症因子芯片 | 神经元细胞培养 | I型和II型糖尿病模型 |
| 血管生成因子芯片 | 内皮组细胞原代培养 | 裸鼠成瘤 |
| 凋亡因子芯片 | 基因编辑动物 | |
| 趋化因子芯片 | 电生理相关服务 | 动物整体实验服务 |
| HuProt TM 20K人类蛋白组芯片 | 膜片钳实验 | |
| 细胞生物学 | 高通量测序 | 代谢组学 |
| 细胞原代培养 | mRNA测序 | 气相色谱GC/MS |
| MTT检测 | LncRNA测序 | 液相色谱LC/MS |
| 细胞凋亡检测 | 全基因组测序 | 核磁共震NMR |
| 细胞周期检测 | RNA-Seq测序 | |
| 细胞克隆形成实验 | 外显子测序 | 影像学相关实验 |
| Transwell细胞迁移/侵袭 | 16s扩增子测序 | Micro-CT |
| 流式分选 | Small RNA测序 | 小动物活体成像 |
| CCK8/XTT检测 | 宏基因组测序 | 核磁共振 |
| 台盼蓝检测细胞活性 | 单细胞测序 | PET-CT |
| 药物筛选细胞学实验 | circleRNA测序 | |
| 细胞粘附性检测 | 甲基化测序 | 基因编辑动物 |
| 细胞划痕实验 | 条件性敲除小鼠/大鼠 | |
| 细胞生物学整体实验 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
| 细胞成管实验 | ||
| 病理类 | CRISPR/Cas9细胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
| 扫描电镜 | 基因定点突变细胞系 | LncRNA芯片 |
| 透射电镜 | 单基因敲除细胞系 | miRNA芯片 |
| HE染色 | 多基因敲除细胞系 | mRNA芯片 |
| 免疫组化 | 目的基因敲入细胞系 | 甲基化芯片（限人和小鼠来源样本） |
| Tunel（原位末端凋亡法）检测 | 报告基因敲入细胞系 | SNP芯片（限人和小鼠来源样本） |
| 激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除细胞系 | |
| 免疫荧光 | ||
| Masson染色 | CRISPR/Cas9动物敲除/敲入 | 科研方案设计与SCI相关服务 |
| 原位杂交 | 基因敲除大鼠/小鼠 | 科研文献论著翻译 |
| 荧光原位杂交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | SCI论文翻译润色服务 |
| 特殊染色（PSA、茜素红、阿尔新蓝等） | 临床实验/科研实验设计方案指导 | |
| 行为学检测 | 药物筛选服务项目 | 药效学评价 |
| 水迷宫实验 | 高通量自动药物筛选平台 | 神经系统药物药效学评价 |
| 旷场实验 | 细胞高内涵药物筛选平台 | 抗肿瘤药物药效学评价 |
| 重复性刻板行为检测 | 蛋白质组学靶标研发平台 | 心血管系统药物药效学评价 |
| 动物跑台检测 | 分子药理研究平台 | 泌尿系统药物药效学评价 |
| 强迫游泳 | 生物膜片钳药物筛选平台 | 内分泌系统药物药效学评价 |
| 常规药物体外筛选 | 抗炎免疫药物药效学评价 |
【本平台合作项目】
分子生物学、细胞生物学、基因敲出/入、模式动物、SPF动物保种、病理学检测、免疫学检测、影像学检测、原代培养、细胞药筛、CRISPR/Cas9基因编辑、基因芯片、高通量测序、蛋白组学、代谢组学、高通量高内涵筛选、药效学评价、药理毒理学实验、慢病毒包装与稳转株建立、SiRNA与纳米载药、ChIP、CO-IP、生物信息学分析、知识产权服务！
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金牌会员
入驻年限：14年
