RTS DH5α克隆感受态细胞

保存条件 ：-20℃

保质期 ：长期

英文名 ：RTS DH5α克隆感受态细胞

库存 ：9999

供应商 ：上海圻明生物

规格 ：科研试剂

RTS（Room Temperature Stable）系列感受态细胞为化学感受态专利技术制备，其室温可保存3天、-20°C可保存2年（推荐保存温度）、-80°C可长期保存性能无下降。运输过程中无需干冰，可常规冰袋运输（推荐运输温度）。RTS克隆感受态细胞均为热激感受态细胞，专用于TA/平端/酶切连接的载体构建（不可用于无缝克隆载体构建），经42°C热激1min可获得106～108cfu/μg效价, 该系列感受态细胞使用简单、运输、储存方便。
组分
组分名称    数量
RTS DH5α克隆感受态(10T)    2瓶
Nano E.coli Transfection Reagent    1 ml
应用
质粒转化、DNA克隆、DNA测序
储存
RTS系列感受态为干粉形式，均可室温保存3天，长期保存-20°C（2年）。经Nano E.coli Transfection Reagent溶解后的感受态必须分装后，并于-60°C以下保存。溶解后的感受态细胞避免反复冻融，在-60°C以下可保存6个月。
操作方法
1.从-20°C冰箱中取出Nano E.coli Transfection Reagent彻底融化，放置于冰上。取300 μl Nano E.coli Transfection Reagent加入到一支冻干感受态细胞中，并分装到10支1.5 ml EP管中（每支30 μl），于-60°C以下保存（或立即使用）。
2. 将5 μl连接产物加入到分装的感受态细胞中，轻弹EP管（或枪头轻轻吹打），置于冰上15min。
3. 置于42°C热激1min后，迅速置于冰上急冷2min。
4. 热激完毕后，向上述感受态细胞中加入450 μl不含抗生素的SOC（或LB）培养基，37°C振荡（225 rpm）培养60min。使质粒上抗性标记基因表达，菌体复苏。
5. 取200 μl复苏菌液涂布到含相应抗生素的LB琼脂平板表面。
6. 将平板置于37°C培养，12~18小时后可出现菌落。