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库存 :大量
英文名 :Rosetta-gami(DE3)
保质期 :有效期一年
供应商 :上海联迈生物工程有限公司
保存条件 :低温运输,-80℃保存
规格 :500ul甘油菌
Rosetta-gami(DE3)菌株类型: | E.coli |
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培养基: | LB培养基 |
生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | |
抗性: | 氯霉素,卡那,链霉素,四环素 |
质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
应用: | 蛋白表达 |
诱导方法: | IPTG |
订购信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
---|---|---|---|
LM1014 | Rosetta-gami(DE3) | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
Rosetta-gami系列菌株来源于Origami系列宿主菌,该系列菌株的有点除了含有Origami菌株原有的TrxB和Gor基因突变提高含二硫键正确折叠 蛋白的高效表达,同时含有Rosetta系列菌株中含有的真核细胞稀有密码子。该菌株同时集合了Origami(DE3)和Rosetta(DE3)的优点。
Rosetta-gami(DE3)菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA六个真核细胞中的稀有密码子tRNA,能够有效提升真核细胞蛋白的表达水平。pRARE质粒具有氯霉素抗性。
Rosetta-gami(DE3)感受态细胞同时具有氯霉素,卡那,链霉素和四环素四种抗生素抗性。
Rosetta-gami(DE3)被建议使用于含有Bla标记的氨苄抗性表达质粒。当使用pCDF系列载体时,还需要使用壮观霉素(Spectinomycin)进行筛选。菌株中 的rpsL突变使得该菌株具有链霉素抗性
DE3是溶源性的 λDE3, 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
亮氨酸生长缺陷型菌株。
Rosetta-gami(DE3)制作程序:使用说明:
联迈生物的各批次质粒菌株发货前均经过严格的多重验证,如存在质量问题,请在收到产品三个月内通知我司。收到甘油菌后,请及时在固体平板上划线培养,挑取单菌落接种到液体培养基中,震荡培养后使用并保存甘油菌。如需获取其他详细信息请登录我司官网联系QQ客服查询。
Rosetta-gami(DE3)的培养方法:
菌种制作菌液的方法(以一瓶为例)1、取10公斤无菌水里面的2公斤烧开,然后加入1公斤的红糖,把红糖充分融化开,便于把红糖里面的有害菌消除。
2、把3公斤的红糖水和剩下的8公斤无菌水装到一个15公斤的容器里,混合均匀,等无菌水冷却到30-40度的时候加菌种1瓶。
3、把菌种和红糖水充分的搅拌均匀,口上盖一层塑料薄膜,要密封发酵,不能漏气。不要装的太满,要预留10-15%的缓冲空间,在发酵过程中会产生气体,装满容易涨破塑料容器。
4、发酵7-12天天左右,温度低要多发酵几天,打开瓶口,有气体产生。闻到酸香味夹杂酒糟味和红糖水的刺激性气味,到就证明发酵成功。(低于15度不能发酵;15-20度发酵20-15天;20-30度,发酵15-10天;30-40度发酵10-6天,发酵时间越长效果越好);或者用PH试纸测试,PH值显示4-5之间即表明发酵成功。如果温度过低,强烈建议用取暖灯或者火炉等加热设备升温。
5、发酵成功后的菌液如果一次不能大量的使用完,就用小瓶子分装密封保存。使用一瓶打开一瓶。如果没有分装。
保存方法:1、菌液宜在常温下避光保存,底部稍有沉淀或浮有些微白沫均属正常,若气味不酸(PH应在4.5以下)或腐臭即已变质勿用。
2、每次用后盖紧瓶盖。保管得好,一年后无异味仍可使用,只是活性有所降低,需适当加大用量。
注意事项:1、制作菌液最好用深井水,若用自来水应放置24小时后用,水只需烧开1/5能够融化开红糖即可。
2、菌液不要与杀菌剂等药物同时混用,要用此类药物,相隔一天以上时间。
3、红糖用热水溶化后,水温降到30-40度,才能投入农盛乐菌种。过高或者过低均影响发酵效果。
4、制作菌液的过程中,不要频繁打开盖子,以免进入杂菌,影响发酵效果。
5、如若遇到特殊问题,请拨打销售电话详询,不要擅做主张,以免对你造成损失。
Rosetta-gami(DE3)注意事项:
1、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。本产品仅可用于实验室研究,不能用于动物,人体以及作为食品添加剂等用途。
2、使用甘油菌时可不完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂布固体琼脂平板即可,也可完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,菌株的活力会逐渐下降。
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