UDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay + UDP-GalNAc

UDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay + UDP-GalNAc

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英文名 :UDP-Glo™ Glycosyltransferase Assay + UDP-GalNAc

供应商 :普洛麦格

说明:
 UDP-GloTM Glycosyltransferase Assay 是一种检测糖基转移酶活性的生物发光试验,该试验采用尿苷二磷酸 - 糖 (UDP-sugar) 作为供体底物并释放 UDP 产物。糖基转移酶催化的糖基化反应是许多生物学过程 ( 包括细胞间的相互作用、细胞信号转导和细菌细胞壁生物合成 ) 的关键环节。糖基转移酶将糖基从一个核苷酸 - 糖基供体(例如: UDP-Galactose, UDP-Glucose, UDP-GlcNAc, UDP-GalNAc andUDP-Glucuronic Acid) 转移至一个受体分子上。在糖基转移酶反应里,UDP 被作为产物释放出来。因此,对 UDP 产物的检测试验适用于对大多数糖基转移酶活性的监测。UDP-GloTM Glycosyltransferase Assay 是一种均相试剂体系,采用单次试剂添加的方法即可迅速检测糖基转移酶反应里UDP的形成。糖基转移酶反应完成后,加入等体积的 UDP Detection Reagent 将UDP 产物转变为 ATP 并同步进行萤光素酶反应产生光信号。光信号可使用发光检测仪检测 (Figure 1)。利用 UDP 标准曲线可将发光信号与 UDP 浓度进行关联。本试验适用于对纯化的糖基转移酶进行测试并使用 UDP-sugar作为供体底物,不适用于全细胞或细胞提取物的测试。不过,可以使用免疫沉淀或亲和标签 pull down 的方法将糖基转移酶纯化出来再进行 UDP-GloTM Glycosyltransferase Assay。
特点:
• 通用型检测系统: 适用于任何利用 UDP-sugar 的糖基转移酶以及糖基转移酶:底物组合,底物包括多肽、蛋白、脂类和糖。
• 高线性范围: UDP 浓度较低时仍可产生高的信号 / 背景比,因此可以使用更少的酶进行糖基转移酶反应。
• 高灵敏度: 0.1-0.5pmol 的 UDP 即可产生相较于背景 2 倍以上的差异。
• nm-µM 范围内的线性反应: 使用低浓度的 UDP-sugar,以减少对糖基转移酶的反馈性抑制。
• 数据可靠、重复性好: 即使在 UDP 产生速率较低时也可照例获得 Z' 因子 >0.7。
• 基于萤光素酶发光的 UDP 检测: 化合物对试验的整体干扰更少。  培养板批量处理:发光信号高度稳定, 3 小时后信号强度仍达80% 以上。
 

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