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保存条件 :常温运输和保存
保质期 :一年
英文名 :Diluent for NA OD Detection
库存 :717
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京核酸稀释液,测OD专用大量库存促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京核酸稀释液,测OD专用大量库存促销
产地:国产|进口
英文名:Diluent for NA OD Detection
规格:250mL
品牌:百奥莱博
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
北京核酸稀释液,测OD专用大量库存促销正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·dTTP溶液,2.5mM
编号:BTN130913
英文名称:dTTP Solution,2.5mM
规格:2mL
dTTP分子式为C10H14N2O14P3Na3,分子量是548.1,消光系数为:9.6×103M-1×cm-1(pH7.0)。λmax为267nm。
储存条件:低温运输和-20℃保存、有效期一年。
·改良Lowry法蛋白定量试剂盒
编号:BTN101102
英文名称:Enhanced Lowry Assay Kit
规格:1000次
Folin酚试剂(磷钼酸和磷钨酸混合物)跟蛋白质中含酚*基酸(色*酸和酪*酸)发生颜色反应,可用于测定蛋白质浓度,但灵敏度较低。Lowry在此基础上加入Biuret(双缩脲)反应步骤,即先在碱性条件下使蛋白质和Cu+形成复合物,再使其与Folin酚试剂发生显色反应,产物在750nm检测。
Lowry法使不含酚的蛋白质也能被检测出来,灵敏度是单独使用Folin酚的10倍左右,是双缩脲反应的200倍,因此成为早期检测蛋白浓度的主要方法。传统Lowry法受到很多常用的试剂(如DTT、糖、甘油、Triton等)干扰,步骤繁琐。本公司对Lowry法进行改良。
Lowry检测原理图如下:
产品特点:
1.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
2.能抵抗部分干扰物(如一定浓度SDS或其他去污剂)的干扰。
3.检测线性范围广,在2-100μg,检测上限比经典Lowry法高30%-40%。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
溶液A成分一 | 208ml |
溶液A成分二 | 16ml |
溶液A成分三 | 16ml |
溶液B | 80ml |
溶液C | 80ml |
福林酚 | 10mL(用100mL 棕色瓶) |
BSA标准品(2mg/mL in水) | 1ml |
说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存(但BSA 标准品需要-20℃保存),有效期一年。
使用方法:
一、准备工作
1.制备溶液A:将16mL溶液A成分二和16mL溶液A成分三加入到装溶液A成分一的塑料瓶中,混合均匀得到240mL溶液A。注意:溶液A各成分分开提供更加稳定。
2.制备 Lowry工作液:将溶液A、溶液B和溶液C按3:1:1的体积比混合得到Lowry工作液。此工作液可以室温放置2-3周,所以最好用多少配多少。如果发现溶液B或溶液C有沉淀,需37℃溶解并摇匀后再使用。
3.制备福林酚工作液:在装有10mL 福林酚的棕色塑料瓶中加入90mL 去离子水,摇晃混匀待用。此工作液在避光条件下可以放置6个月。
二、试管法
4.先用去离子水将BSA 标准(2mg/mL)稀释到50μg/mL,然后在标记的试管中加入下列成分(单位:μL)。注意:每个样品最好做三个稀释度,每个稀释度最好设置三次重复,阴性对照和标准品也最好做三次重复。
标准品(每个做三次重复,此处只列出一个) | |||
编号 | BSA 标准(50μg/mL) | 水 | 总体积 |
阴性对照 | 0 | 0 | 200 |
1 | 0 | 200 | 200 |
2 | 25 | 175 | 200 |
3 | 50 | 150 | 200 |
4 | 100 | 100 | 200 |
5 | 150 | 50 | 200 |
6 | 200 | 0 | 200 |
样品(以1个样品、3个稀释度为例,每个稀释度三个重复,此处只列出一个) | ||
编号 | 样品 | 总体积 |
1 | 200(稀释度1) | 200 |
阴性对照1 | 200(用稀释度1稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
2 | 200(稀释度2) | 200 |
阴性对照2 | 200(用稀释度2稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
3 | 200(稀释度3) | 200 |
阴性对照3 | 200(用稀释度3稀释的溶解蛋白样品的缓冲液) | 200 |
5.每管中加入200μl Lowry工作液,振荡混匀后室温反应10分钟。
6.每管中加入100μl 福林酚工作液,振荡混匀后室温反应30分钟。
7.用容量为0.5mL、光径为1 cm的玻璃比色杯或聚*乙*(代"烯")比色杯测定750nm的光吸收。测定时,先空白(即阴性对照)后样品,测定样品和BSA标准品时,先低浓度后高浓度。测定未知样品前需要将杯子清洗干净,必要时可以用甲醇清洗吸附到比色杯壁上的染料。
8.根据标准品三个重复的平均值绘制标准曲线,然后根据未知样品的光吸收从标准曲线中查得其对应的浓度。
三、96微孔板法
9.同上,只是反应用96 微孔板设置,用酶标测试仪750nm 测定光吸收。
四、样品中干扰物质的去除(本产品不含相关产品,如果样品中有干扰Lowry法蛋白定量的物质(见附表),可另购本公司的微量蛋白质沉淀试剂盒(BTN81217)去除,也可以用自备试剂按下法去除:用水将样品调到体积为200μl,加入20μl 0.15%去氧胆酸*,混匀,室温放置10分钟。加入20μL 72%的TCA,室温放置5分钟。3000 g离心15分钟,小心去除上清。用200μl水溶解蛋白沉淀后以用于Lowry法测定。
附:常见Lowry法蛋白定量干扰物(低于所列浓度不干扰,高于所列浓度则会干扰,需要按上法去除。不能含任何浓度的DTE,DTT和硫*(代"酸")胺)。
干扰物 | 浓度 | 干扰物 | 浓度 |
Acetone | 10% | 2-Mercaptoethanol | 1mM |
Aprotinin | 10mg/mL | NaCl | 1 M |
CHAPS | 0.05% | NaOH | 100mM |
DMF | 10% | NaPi | 100mM |
DMSO | 10% | NP40 | 0.02% |
EDTA | 1mM | PMSF | 1mM |
EGTA | 1mM | SDS | 1% |
Ethanol | 10% | Sodium Citrate | 100mM |
Glucose | 100mM | Sucrose | 7% |
Glycin | 100mM | Tris | 10mM |
HEPES | 1mM | Trition X-100 | 0.03% |
Imidazole | 25mM | Tween 20 | 0.05% |
Methanol | 10% | Urea | 3M |
疑难解答:
1. 该方法检测的蛋白质浓度范围1μg~50μg/ml。
2. 由于Lowry法测定的是蛋白质中酪*酸残基,对于那些酪*酸残基数高于或低于BSA,其测定的蛋白质含量将偏低或偏高。如果遇到该情况,需要采用BCA或Bradford法测定。
3. 阅读测定方法后化学试剂对测定方法的影响。
北京核酸稀释液,测OD专用大量库存促销关键词:Diluent for NA OD Detection,核酸稀释液,测OD专用,BTN131179
BTN130699 RNase 抑制剂(小鼠源) Murine RNase Inhibitor
F030709 BIOTIN标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*BIOTIN
F030709 BIOTIN标记羊抗乙肝e抗原抗体 Polyclonal Goat Anti-HBeAg*BIOTIN
3-*基异丁酸 Benzenesulfinic acid sodiu*(代"m") salt 144-90-1
Ammonium persulfate(APS) 1g
ARB12115 大鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)检测服务 Rat soluble platelet endothelial cell adhesion molecule 1,specam-1 ELISA KIT
BTN130577 小鼠抗GST标签单抗 Anti GST-Tag Mouse Mab
F040307 小鼠IgG1抗原 Mouse IgG1
11096-37-0 Transferrin L-转铁蛋白
PY01-016 脱氧胆酸* 25克
593-84-0 Guanidine 异硫*酸胍
ARB12411 大鼠组蛋白H2b(Histon-H2b)尿液中含量检测 Rat Histon-h2b ELISA KIT
羧肽酶Y(酵母) Sulfathiazole 9046-67-7
北京核酸稀释液,测OD专用大量库存促销关键词:Diluent for NA OD Detection,核酸稀释液,测OD专用,BTN131179
6-磷酸葡萄糖*盐 Tetramethylammonium iodide 921-62-0
*甲*(代"酚")绿* Maltose monohydrate 62625-32-5
BL0867 羊抗人免疫血清
SJ0719 1×pbs
5(6)-羧基荧光素二乙酸酯 ADA-2Na 124387-19-5
T4 DNA连接酶 Sodium succinate dibasic hexahydrate 9015-85-4
碱性品红 MES 632-99-5
ARB10435 人甲状旁腺激素样蛋白(PLP)含量检测 Human paRathyroid hormone-like protein,plp ELISA KIT
ARB13723 兔载脂蛋白B100(Apo-B100)Elisa定量检测 Rabbit apoprotein b100,apo-b100 ELISA KIT
SJ0166 D-Raffinose 棉子糖
BL1241 *霉素溶液(50mg/ml)
ARB14194 山羊白细胞介素1β(IL-1β)血清中含量检测
Church缓冲液 100ml
*甲环酸 6-Azauridine 1197-18-8
ARB11263 人骨成型蛋白7(BMP-7)Elisa分析 Human bone morphogenetic protein 7,bmp-7 ELISA KIT
ARB11401 人神经保护因子(CVNPF)酶标法分析 Human cobra venom neuronal protective factor,cvnpf ELISA KIT
F030813 BIOTIN标记兔抗小鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Mouse IgG*BIOTIN
ARB11972 大鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)Elisa定量检测 Rat cxc-chemokine receptor 3,cxcr3 ELISA KIT
ARB13812 豚鼠胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)ELISA检测服务
羧基琼脂糖凝胶4B Violuric acid monohydrate
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