北京鲑鱼精DNA溶液大量库存促销

保存条件 ：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

保质期 ：长期

英文名 ：Salmon Sperm DNA Solution

库存 ：902

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京鲑鱼精DNA溶液大量库存促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京鲑鱼精DNA溶液大量库存促销
规格：1mL
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：BTN100604
英文名：Salmon Sperm DNA Solution
本产品是浓度为10mg/mL的、经过热变性处理的单链鲑鱼精DNA溶液，可以用于Southern、Northern预杂交，还可以用于酵母化学转化和电转化。本产品即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输和-20℃保存、有效期一年。

更多有关北京鲑鱼精DNA溶液大量库存促销的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：
L-鸟*酸乙酯盐*(代"酸")盐 PVA 84772-29-2
BTN130840 硫*(代"酸")*溶液,10mM,PCR级 MgSO4 ,PCR Grade
ARB11662 人蛋白*(代"磷")酸酶(PP)含量分析 Human protein phosphatase,pp ELISA KIT
BTN100822 干粉型SB培养基 SB Medium Powder
柠檬酸铁 D-Phenylglycine 3522-50-7
F030507 FITC标记兔抗卵清蛋白抗体 Rabbit Anti-OVA*FITC
L-精*酸L-谷*酸盐 Fast red TR 4320-30-3
聚丙*(代"烯")酸* 1-Naphtyol 9003-04-7
Tris-蔗糖溶液(10%)   500ml
ARB11916 人鳞状癌(SCC)检测服务 
ARB13606 兔子肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa检测 Rabbit tumor necrosis factor α,tnfα ELISA KIT
SJ0402 Linoleic acid 亚油酸
ARB12937 小鼠网膜素(omentin)检测服务 Mouse omentin ELISA KIT
PY02-427  假单胞F琼脂  250克  
ARB12639 大鼠游离β绒毛膜促性腺激素(f-βCG)Elisa分析 Rat free chorionic gonadotropin,f-βcg ELISA KIT
腺苷脱*酶 Spectinomycin HCl 9026-93-1
CYB162012 兔抗大鼠IgG(抗血清) 0.5ml
动物灌注液   500ml
9008-02-0 牛血红蛋白 Hemoglobin
BL0959 胶体金标记兔抗猪IgG抗体
F030404 胶体金标记小鼠抗猴IgG抗体 Monoclonal Mouse Anti-Monkey IgG*GOLD
4-苄基*基-7-硝基*(代"*")并氧杂恶二唑 Carmine 18378-20-6
北京鲑鱼精DNA溶液大量库存促销关键词：鲑鱼精DNA溶液,Salmon Sperm DNA Solution,BTN100604


·尿嘧啶切刻酶
编号：BTN130666
英文名称：Uracile Nicking Enzyme
规格：50U
本产品在尿嘧啶位置产生一个单核苷酸缺口，它是尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)和DNA糖基化酶-裂解酶 Endo Ⅷ的混合物。UDG催化尿嘧啶碱基的切割，形成一个脱碱基(脱嘧啶)位点，但保持磷酸二酯骨架结构完整。Endo Ⅷ的裂解酶活力使脱碱基位点 3´和5´端的磷酸二酯键断裂，释放无碱基的脱氧核糖。其反应示意图如下：


产品特点：
1．PCR产物的克隆；
2．在DNA的尿嘧啶处产生缺口。

产品组成：

 

成份	规格
尿嘧啶切刻酶(1000U/mL)	50μL
10×Buffer	1mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在10μl反应体系中，37℃条件下，15分钟使10pmol的含有单一尿嘧啶碱基的34bp寡核苷酸双链产生切刻所需要的酶量。

·硫*(代"酸")葡聚糖
编号：BTN120643
英文名称：Dextran Sulfate
规格：1g
硫*(代"酸")葡聚糖是一种广泛用于较长双链探针杂交的促进剂。它是一种多聚胺，平均分子量为500000。在某些条件下5%～10%硫*(代"酸")葡聚糖效果较好，若用5%～10%PEG则可产生很高的本底。因此，使用促进剂时有必要优化条件。


储存条件：常温运输和保存、有效期一年。


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·SP6体外转录试剂盒
编号：BTN91107
英文名称：SP6 in vitro Transcription Kit
规格：50次
本试剂盒是基于SP6 RNA聚合酶的RNA体外转录试剂盒，它利用含有SP6启动子的模版DNA，以NTP为底物，从SP6启动子下游开始合成与模版DNA中一条链互补的RNA，简单快速获得大量的RNA分子。

产品特点：
1. 即开即用，用户只需提供含SP6启动子的DNA模板即可以进行体外转录实验，不需要单独准备每一个成份。
2. 单溶液预配液，减少加样次数，避免了操作误差，增加了可重复性。
3. 模版DNA可以是线性化的质粒DNA，也可以是PCR扩增产物。
4.可以合成的RNA的最佳长度在20nt到2000nt之间。
5.产品配方经过精心优化，每μg DNA模版可以合成2-6μg RNA。
 得到的RNA可以用于RNA 结构研究、核酶生物化学、体外翻译、RNA-蛋白质相互作用、反义技术、SELEX技术和RNA干扰(RNAi)等实验。

试剂盒组成：

成分	规格
转录预配液(2×)	0.5mL
阳性对照DNA(1.3 kb片段)	20μL(10 ng/μL)
SP6 RNA聚合酶混合液	50μl
RNase-free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
一、制备DNA模板
PCR片段和质粒DNA都可以用作体外转录的模板，但是必须注意以下几点。一是必须使用线性化的DNA。如果是质粒DNA，则必须先用适当的限制性内切酶切成线状。二是需要转录的DNA序列的上游必须有SP6启动子。如果模板是PCR产物，则可以在设计引物时将SP6启动子序列(5´ATT TAG GTG ACA CTA TAG AGN G 3´)加上，转录其实是从3端G AGN G中的第一个G开始。如果是将DNA片段克隆到载体上，则需要选择有SP6启动子的载体，并且克隆位点必须位于SP6启动子下游。三是需要转录的DNA序列的下游端最好不要是3´突出。如果是3´突出(如选择了Pst I来线性化质粒)，则最好用T4 DNA聚合酶修平。四是必须保证DNA模板中没有RNase。由于提取质粒DNA的过程中一般要使用大量的RNase A，因此质粒DNA一般都有严重的RNase A污染，所以在用作模板前，最好采取胶回收得方法回收质粒DNA。并且加入少量总RNA一起保温，然后电泳检测RNA是否被降解，以此判断纯化的DNA模板是否有残留RNase A。
二、体外转录反应
1.在一个RNase-free的塑料离心管中，在室温下(不是在4℃下)按次序加入下列成分：

成分	加入量	备注
DNA模板	xμL	总量在50 ng-1μg(如果模板是PCR片段，建议用50 ng左右；如果模板是质粒DNA，建议用1μg左右；如果用本产品提供的阳性对照，建议用4μL)
SP6转录预配液(2×)	10μl	本成分还含其他促进剂，所以是混合物
RNase-free水	补水到20μL

注：此为20μL反应体系的用量，对其他反应体系，各成分的用量可以按比例增减。如果需要标记RNA探针，则需要订购NTP分开的试剂盒。如果需要得到加帽RNA，则需要加入自备的加帽修饰核苷酸(本公司有各种加帽修饰核苷酸)。
2. 37℃保温1-2小时。注意：延长保温时间并不能提高产量。
3. 70℃加热10分钟灭活SP6 RNA聚合酶。
4. 取1-3μL电泳检测转录效果。一般1μg DNA可以合成 5-10μg的RNA。
5. 得到的RNA可以放-80℃保存。

若需进一步去除DNA模板，可参考下列操作步骤，但所用试剂需另行购买，本试剂盒不提供。
1.在体外转录体系中加入3-5U自备的RNase-free DNase(BTN90903；3-5U/μL)。
2. 37℃保温15-30分钟。
3. 补水到100μL。
4. 用等体积(100μL)的Tris饱和酚-*仿抽提一次去除残留的DNase和RNA聚合酶。
5.在上清中加200μL自备的微量核酸沉淀剂(BTN50903；用前需要摇晃混匀)，振荡后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
6. 加入1mL 75%乙醇，震荡10秒后15000rpm离心3～5分钟，弃上清。
7. 短暂离心数秒，用枪头吸弃上清。
8. 晾干半分钟，所得沉淀即去除DNA模板后的RNA。可溶于RNase-free水中后立即使用或放-80℃长期保存。

疑难解答：
1. 没有RNA产物。最常见原因是模板有RNase污染，可用纯化的RNA跟模板DNA一起保温，再检测RNA是否降解。还可以增加RNase Inhibitor用量，本试剂盒缓冲液和酶混合液中有RNase inhibitor，如果模板RNase污染严重，可能需要用户补加RNase inhibitor。
2. RNA产量低。最常见的原因是DNA模板。在转录序列的第一个和第二个碱基最好都是G，在前14个碱基内避免有U存在。
3. RNA长度比预期的短。可能是模板序列中有SP6 RNA聚合酶的终止序列。可以改用SP6体外转录试剂盒(启动子也必须改成SP6启动子)。
4. RNA长度比预计的长。SP6 RNA聚合酶跟Taq DNA聚合酶一样，有不依赖于模板的加尾功能，最多有一半的RNA可以带一个或两个碱基的尾巴。如果RNA长度比预计的长很多，使用的模板又是质粒DNA，则可能是质粒DNA线性化不彻底。
5. 5´单磷酸还是三磷酸。如果使用GTP，则得到的RNA是三磷酸，体外转录时如果保温时间太长(如12小时)，则有50%的三磷酸会变成单磷酸。如果在转录体系中加入GMP，则SP6 RNA聚合酶将优先使用GMP，所得RNA产物中5´端是单磷酸的比例将大大增加。
6. 如何得到带帽RNA？需加入带帽NTP类似物即可，本公司提供5种供选择。

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