北京平末端DNA加T试剂盒价格厂家

保存条件 ：低温运输

保质期 ：长期

英文名 ：dT Tailing Kit

库存 ：591

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京平末端DNA加T试剂盒价格厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京平末端DNA加T试剂盒价格厂家
英文名：dT Tailing Kit
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
规格：50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性，在只有dTTP存在的情况下，在平末端的DNA片段加上一个dT尾巴，主要用于制备T载体。其流程图如下：


产品特点：
1. 简单，2X Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA成本polymerase等酶合成的DNA片段。
3. 加T后的载体可以作为T载体使用。

产品组成：

 

成分	规格
Taq DNA olymerase(5U/μL)	50μl
2×dT Tailing Buffer	1.25ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反应前纯化处理：
平末端DNA片段或平末端质粒DNA可以采取胶回收和酚/*仿抽提法等常规方法纯化，最后溶解在水或TE中，终浓度以0.1μg/μL为宜。必须注意的是，用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段，必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/*仿抽提或Proteinase K处理)，否则它们将在加T反应时，切除掉加上的T尾巴，干扰反应。
二：加T反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中，分别加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2μg
2×dT Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
补水到	50μL
72℃保温2小时

三：反应后处理
加T反应后，Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合，所以必须酚/*仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再用酚/*仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即可用于后续连接反应。

北京平末端DNA加T试剂盒价格厂家极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
F030242 HRP标记小鼠抗鸭IgY(IgG)抗体 HRP*Monoclonal Mouse Anti-Duck IgY
ARB14157 小鼠半胱天冬蛋白酶3(CAspAse3/CPP32)elisa检测 
ARB11993 大鼠N-乙酰-β-D-*基葡萄糖苷酶(NAG)Elisa方法检测 Rat n-acetyl-β-d-glucosaminidase,nag ELISA KIT
幽门螺旋杆菌染色液(亚甲蓝法)   100ml
NF-224 抗人a1AT血清
ARB11009 人补体片断3b(C3b)elisa检测 Human complement fragment 3b,c3b ELISA KIT
ARB11226 人细胞间粘附分子3(ICAM-3/CD50)Elisa方法检测 Human intercellular adhesion molecule 3,icam-3 ELISA KIT
CYB165022 生物素化兔抗羊IgG
固蓝RR盐 Benzyltrimethylammonium bromide 14726-29-5
革兰阴性菌裂解缓冲液   100ml
D-*丙*酸甲酯盐*(代"酸")盐 Alloxan monohydrate 13033-84-6
CYB163009 羊抗人IgM-RBITC(μ链特异)
硫代水杨酸 Beryllon II 147-93-3
ARB14046 猴γ干扰素(IFN-γ)Elisa定量检测 Monkey interferon γ ,ifn-γ ELISA KIT
硫*(代"酸")卡那霉素溶液(10mg/ml) Kanamycin 10mg/ml 10ml
BL0873 羊抗鸡IgG免疫血清
BTN120644 聚乙二醇 PEG
BL1396 SABC小鼠/兔IgG-AP kit
BTN131144 山羊抗小鼠IgG(H+L),碱性磷酸酶标记 Goat Anti-Mouse IgG(H+L),AP Conjugate
CBZ-D-天冬*酸 Poly I 78663-07-7
聚季铵盐-10 Neomycin sulfate 68610-92-4或54351-50-7
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·剥离硅烷
编号：BTN80935
英文名称：Repeling Silane
规格：200mL
本产品为一定浓度的二*二甲基硅烷(Dichlorodimethylsilane)，其分子式为C2H6Cl2Si，分子量为129.06 ，CAS号为75-78-*(代"5")。主要用于制备PAGE胶时，处理其中一块玻璃板，使附着的凝胶易于剥离。本产品最好跟亲和硅烷结合使用。但本产品不能用于硅化玻璃器皿。

储存条件：常温运输及保存，有效期两年。

·弱RIPA裂解液
编号：BTN131008
英文名称：RIPA Lysis Buffer(Weak)
规格：250mL
RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

备注：
1.为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。


北京平末端DNA加T试剂盒价格厂家关键词：平末端DNA加T试剂盒,dT Tailing Kit,BTN60106

BTN101003 RAPD PCR试剂盒(含银染) RAPD PCR Kit
BTN130632 T7核酸外切酶 T7 Exonulease
抑肽酶溶液(Aprotinin,2mg/ml)   1ml
ARB13131 小鼠胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)Elisa定量检测 
核糖核酸酶抑制剂 Tropaeolin O sodiu*(代"m") salt
J0102 猪抗口蹄疫病毒(FMDV)血清 10000ml/25000ml
PY02-168  豆粉琼脂  250克  
"   500T
F030236 HRP标记山羊抗猪IgG抗体 HRP*Polyclonal Goat Anti-Pig IgG
NF-223 抗人a1AG血清
台氏液粉剂 Tyrode"s Solution  1L
E0603 脱纤维裂解山羊血(无菌) 100ml/500ml
ARB12142 大鼠白三烯B4(LTB4)elisa检测 Rat leukotriene b4,LT-b4 ELISA KIT
HC0102 25mm针头式滤器
298-96-4 TTC  2,3,5*化三*基四氮唑
ARB11715 人集落刺激因子(CSF)含量测试 Human colony-stimulating factor,csf ELISA KIT

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