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文献和实验
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保存条件 ：-20℃保存
保质期 ：有效期1年
英文名 ：Hieff Long Taq DNA Polymeras
库存 ：大量
供应商 ：翌圣生物科技(上海)股份有限公司
CAS号 ：点击查看
规格 ：125U
产品信息
产品描述
Hieff® Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3’ →5’外切酶活性的蛋白组成的混合酶，其保真性是Taq DNA Polymerase的6倍，专门用于长片段的扩增。独特的缓冲体系使Hieff® Long Taq DNA Polymerase可扩增长达8 kb的人基因组片段和10 kb左右的质粒模板。PCR扩增产物的3’端带A，可直接用于TA克隆。试剂盒中的PCR Enhancer有助于高GC含量片段的扩增。
产品组分
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃, 30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA，37℃温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中，加入2 U本品，以无菌ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。-20º℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格（元） |
| Hieff® Long Taq DNA Polymerase 长片段DNA聚合酶 | 10107ES62 | 125 U | 155.00 |
| Hieff® Long Taq DNA Polymerase 长片段DNA聚合酶 | 10107ES78 | 5×125 U | 735.00 |
产品描述
Hieff® Long Taq DNA Polymerase是Taq DNA Polymerase与一种含有3’ →5’外切酶活性的蛋白组成的混合酶，其保真性是Taq DNA Polymerase的6倍，专门用于长片段的扩增。独特的缓冲体系使Hieff® Long Taq DNA Polymerase可扩增长达8 kb的人基因组片段和10 kb左右的质粒模板。PCR扩增产物的3’端带A，可直接用于TA克隆。试剂盒中的PCR Enhancer有助于高GC含量片段的扩增。
产品组分
| 编号 | 组分 | 产品编号/规格 | |
| 10107ES62（125 U） | 10107ES78（5×125 U） | ||
| 10107-A | Hieff® Long Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 25 μL | 25 μL×5 |
| 10107-B | 10× Hieff® Long Taq Buffer（Mg2+ free） | 500 μL | 500 μL×5 |
| 10107-C | 25 mM MgCl2 | 1 mL | 1 mL×5 |
| 10107-D | dNTP Mix (10 mM each) | 100 μL | 100 μL×5 |
| 10107-E | 5 × PCR Enhancer | 125 μL | 125 μL×5 |
| 10107-F | 10 × Loading buffer | 1.25 mL | 1.25 mL×5 |
活性定义
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃, 30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA -HindIII，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：20 μL反应体系，10 U本品和1 μg λDNA，37℃温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μL体系中，加入2 U本品，以无菌ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。-20º℃保存，有效期1年。
注意事项
为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
PCR反应体系（推荐冰上配制）
| 组分 | 体积 |
| ddH2O | to 50 μL |
| 10× Hieff® Long Taq Buffer（Mg2+ free） | 5 μL |
| 25 mM MgCl2 | 3-4 μL |
| dNTP Mix (10 mM each) | 1 μL |
| 5 × PCR Enhancer | 适量 |
| DNA模板 | 适量 |
| Primer正向 (10 μM) | 2 μL |
| Primer反向 (10 μM) | 2 μL |
| Hieff® Long Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0.5 μL |
2）聚合酶浓度：酶量可在0.25-1 μL之间调整。通常情况下加大酶量可以提高扩增产量，但有可能会使特异性下降。
3）Mg2+终浓度：对于大多数由本酶催化的PCR反应来说，Mg2+的浓度为2 mM；如有特殊需要，可在终浓度1.5-2.5 mM区间内调整Mg2+浓度。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）
| 模板种类 | 用量 |
| 动植物基因组DNA | 10-200 ng |
| 大肠杆菌基因组DNA | 1-100 ng |
| λDNA、质粒DNA | 0.1-10 ng |
PCR扩增程序
1）目的片段＜5 kb
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 30 sec | 30-35 |
| 退火 | 55℃ | 30 sec | |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | |
| 终延伸 | 72℃ | 7 min | 1 |
2）目的片段＞5 kb
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 1-3 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-35 |
| 退火/延伸 | 68℃ | 30-60 sec/kb | |
| 终延伸 | 68℃ | 7 min | 1 |
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
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钻石会员
入驻年限：17年
