血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销

血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销

价格: ¥130 - 2320

品牌:百奥莱博

货号:WE0201-WNT

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产品详情

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保存条件 :2~8℃

保质期 :长期

英文名 :RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent

库存 :929

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


名称:血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销
产地:国产|进口
编号:WE0201
规格:50ml
品牌:百奥莱博
英文名:RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent
  本品特别适用于从血清、血浆中分离纯化包括microRNA和其他小RNA(<200nt)在内的总RNA。本品灵活处理不同起始量的样品,在有效裂解样本的同时,可有效保存RNA的完整性,提取的总RNA完整性好,无蛋白和DNA污染,提取的RNA可用于RT-PCR、Northern Blot和分子克隆等下游实验。

自备试剂:*仿、异丙醇、75%乙醇、无RNase的水(新开封或提取RNA专用)。

实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、预防RNase污染,应注意以下几方面:
① 使用无RNase的塑料制品和枪头,避免交叉污染。
② 玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟,用水彻底冲洗后高压灭菌。
③ 配制溶液应使用无RNase的水。
④ 操作人员戴一次性口罩和手套,实验过程中要勤换手套。
2、提取的样品避免反复冻融,否则影响RNA提取得率和质量。
3、本品中含有*酚,具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品,如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触到眼睛,应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
4、样品用游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂匀浆后,如不即刻加入*仿,置于-70℃可放置一个月以上。
5、保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2~8℃可以保存一周,-20℃条件下可以保存1年。RNA半衰期比较短,容易降解,建议提取后尽快进行后续实验,如反转录成cDNA,Northern Blot等。
6、若下游实验对DNA非常敏感,建议用不含RNase的DNase I(货号:WE0213)对RNA进行处理。

操作步骤
1、取200μl新鲜或者冻存的血清或血浆,加入3倍体积的游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂。振荡30秒,充分混匀。
注意:样本加入游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂后,可能会出现沉淀,经过振荡混匀后,沉淀基本消失。若仍有少量沉淀,不影响下游实验,可继续操作。
2、将处理后的样品在室温放置5分钟,使蛋白核酸复合物完全分离。
3、向以上溶液中加入*仿,每使用1ml血清/血浆样本专用总RNA提取试剂加入0.2ml*仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置2-3分钟。
注意:如不能涡旋混匀,可手动快速颠倒混匀2分钟。
4、4℃ 12000rpm离心20分钟,此时样品分成三层:红色有机相,中间层和上层无色水相,RNA 主要在水相中,把水相转移到一个新的无RNase的离心管(自备)中。
5、在得到的水相溶液中加入等体积异丙醇,颠倒混匀,室温放置30分钟。或-20℃沉淀过夜,效果更佳。
6、4℃ 12000rpm 离心20分钟,弃上清。
注意:离心前RNA沉淀经常是看不见的,离心后在管侧和管底形成胶状沉淀。
7、加入75%乙醇(用无RNase的水配制)洗涤沉淀。每使用1ml游离RNA(血清血浆尿液)提取试剂加入1ml 75%乙醇对沉淀进行洗涤。
8、4℃ 12000rpm离心3分钟,小心吸弃上清,注意不要吸弃RNA沉淀。
注意:剩余的少量液体可短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。
9、室温放置2-3分钟,晾干。加入30-100μl无RNase的水,充分溶解RNA,得到的RNA保存在-70℃,防止降解。
注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。

储存条件:2~8℃。
血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销
关于血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:

·多彩预染蛋白Marker
编号:WE0282
英文名称:Multicolor Protein Marker
规格:20次(100μl)|100次(5×100μl)
  本品由10.5-175 kD范围的11条蛋白组成(10.5 kD、14 kD、22 kD、29 kD、42 kD、51 kD、62 kD、70 kD、95 kD、130 kD、175 kD)。由低到高的分子量范围可监测电泳过程中的蛋白分离情况、判断目标蛋白的分子量,并且可以监测Western Blot实验中的转膜效率。10.5 kD、42 kD、95 kD的三条带结合有蓝色染料更便于实时观察电泳进程、判断蛋白分子量。本产品推荐上样量为5μl。

注意事项
1、本品已包含上样缓冲液,直接使用,不可在100℃加热或煮沸。
2、为避免反复冻融及污染,可将本产品分装后,-20℃保存。

操作步骤
1、加样前在室温或37-40℃数分钟解冻后轻轻摇匀,以确保溶液混合均匀。
2、根据加样孔的大小,每泳道加5μl进行聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳。

实验图例

15%的聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳后结果

储存条件:-20℃保存,避免反复冻融。


血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销关键词:血清血浆尿液游离RNA提取试剂,RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent ,WE0201
血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销

·高效多重PCR Mix
编号:WE0124
英文名称:Super Multiplex PCR Mix
规格:1ml|5ml
  本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。

产品组成

 
组份 1ml 5ml
2×Super Multiplex PCR Mix 1ml 5×1ml
ddH2O 1ml 5×1ml


注意事项
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。

使用方法
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系
试剂 50μl反应体系
2×Super Multiplex PCR Mix 25μl
Primer Pool 0.1-0.3μM
DNA or cfDNA 5ng-100ng
ddH2O up to 50μl

注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。

2、PCR反应条件
步骤 温度 时间 循环数
预变性 95℃ 2 min  
变性 98℃ 20 s 30-40个循环
退火延伸 65℃ 90 s
终延伸 72℃ 5 min  


注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。


血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销关键词:血清血浆尿液游离RNA提取试剂,RNAtiqu Circulating RNA Extraction Reagent ,WE0201
血清血浆尿液游离RNA提取试剂厂家直销

·抗c-Myc标签多克隆抗体
编号:WE0348
英文名称:Anti c-Myc Rabbit Polyclonal Antibody
规格:100μl
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端的c-Myc标签(EQKLISEEDL),而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的c-Myc-Tag融合蛋白。

抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:500-10000)

·高效无内毒素质粒大量提取试剂盒
编号:WE0167
英文名称:NoEndo Plasmid Maxi Kit
规格:2次|10次
  本试剂盒提供一种简单快捷高效提取无内毒素质粒的新方法,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用独特的硅基质膜吸附技术,高效专一结合质粒DNA;同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤器,有效去除内毒素、基因组DNA、RNA、蛋白等杂质。本试剂盒所得质粒纯度高、提取量大,特别适用于细胞转染,同时也可用于DNA测序,PCR,体外转录,内切酶消化等实验。

  为什么使用本试剂盒?:内毒素是质粒提取中常见的污染物,由于真核细胞对内毒素非常敏感,因此,如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。

试剂盒组成
组份 2次 10次
Buffer P1 30ml 125ml
Buffer P2 30ml 125ml
Buffer E3 30ml 125ml
Buffer PS 15ml 30ml
Buffer PW(浓缩液) 10ml 50ml
Endo-Free Buffer EB 10ml 30ml
RNase A(10 mg/ml) 600μl 2ml
推柄 2个 10个
内毒素过滤器FQ 2个 10个
吸附柱DQ及收集管 2套 10套
离心管(50ml) 2个 10个


自备试剂:无水乙醇、异丙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,将吸附柱置于2~8℃可保存更长时间,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、Buffer P1 在使用前先加入RNase A(将试剂盒中提供的RNase A 全部加入),混匀,置于2–8℃保存。使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀,如有结晶或沉淀现象,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清。
5、注意Buffer P2和Buffer E3含有刺激性物质,请戴手套操作,使用后应立即盖紧盖子。
6、使用Buffer PS处理过的吸附柱最好立即使用,避免放置时间过长影响使用效果。
7、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤
1、取150ml过夜培养的菌液,加入离心管(自备)中,12000×g离心2-3分钟收集细菌,尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入12ml Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮细菌沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入12ml Buffer P2,温和地上下颠倒混匀8-10次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮,提示可能菌量过大,裂解不彻底,应减少菌体量。
4、向离心管中加入12ml Buffer E3,立即上下颠倒混匀8-10次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。12000×g离心10分钟,将上清全部倒入除内毒素过滤器中,慢慢推动推柄(Plungers)过滤,滤液收集在干净的50ml离心管(自备)中。
注意:Buffer E3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5、向滤液中加入0.3倍滤液体积的异丙醇,上下颠倒混匀。
注意:加入异丙醇过多容易导致RNA污染。
6、柱平衡:向已装入收集管中的吸附柱中加入2ml Buffer PS,12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、6000-12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的最大容积为15ml,所以第7步中所得溶液分多次过柱。如果离心机转子倾角较大时,建议加入吸附柱的溶液体积不超过10ml,以防发生漏液现象。
9、向吸附柱中加入10ml Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),6000-12000×g离心2分钟,倒掉收集管中的废液。
10、重复步骤9。
11、将吸附柱重新放回收集管中,12000×g离心5分钟,倒掉废液,将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干吸附柱中残余的漂洗液。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
12、将吸附柱置于一个新的离心管中,向吸附膜的中间部位加入1-3ml Endo-Free BufferEB,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,12000×g离心5分钟,将质粒溶液收集到离心管中。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热,可以增加提取效率。

储存条件:室温(15~30℃)



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