BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应

BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应

价格: ¥100 - 2220

品牌:百奥莱博

货号:BTN130593-RFD

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产品详情

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保存条件 :低温运输

保质期 :长期

英文名 :HRP Conjugated Loading Control Antibody(GAPDH)

库存 :634

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


名称:BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应
英文名:HRP Conjugated Loading Control Antibody(GAPDH)
编号:BTN130593
产地:国产|进口
规格:20μL
品牌:百奥莱博
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体,β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594),该系列抗体无需二抗孵育,可缩短实验周期,节约实验成本,大幅降低背景信息强度。

抗体类型:小鼠IgG1
应 用:Western blotting
建议浓度:1:1000~10000
交叉反应性:人,大鼠,小鼠

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应
欲咨询购买BTN130593型HRP标记内参抗体(GAPDH)现货供应,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:

·柱式酱油DNA提取试剂盒
编号:BTN130956
英文名称:Soy sauce DNA column extraction kit
规格:10次

·通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒
编号:BTN101114
英文名称:Universal Reverse Transcription Loop-Mediated Isothermal Amplification Kit
规格:50次
本试剂盒可以用于RT-LAMP等温扩增,RT-LAMP即逆转录和Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩增)的结合,专门用于快速扩增RNA。LAMP是2000年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用4或6条模板专一的特异引物和具有链置换能力的DNA聚合酶,在等温条件下(63℃左右)30-60分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优于RT-PCR技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、电泳及紫外观察等过程,不依赖任何专门的仪器设备。目前已成功应用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。

产品特点:
1.高特异性,由于同时使用4-6条特异引物,所以特异性比RT-PCR更高。
2.高扩增效率,扩增效率可达到10E9-10E10,比PCR灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的RNA分子
3. 65℃左右完成RT和LAMP扩增,不需要贵重的热循环仪。
4. 即开即用,包含了除引物和模板RNA外的所有成份,十分方便。
5. 肉眼检测扩增结果,不需要昂贵的电泳、荧光PCR等仪器。
6. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。

试剂盒组成:

 
成分 规格
RT-LAMP Mix(2×) 0.5ml
AMV-Bst混合液 75μl
对照引物混合物 40μl
对照模板 5μl
MgCl2(25mM) 0.2ml
RNase-free水 1ml
说明书 1份

注:RT-LAMP Mix(2×)稀释到1×时,已经有8mM Mg2+,本试剂盒提供的MgCl2(25mM)用于用户优化条件用。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在冰上溶解除酶外的各种组份,混匀,稍离心。在反应管中加入以下组份:
成份 样品管 阴性对照
RT-LAMP Mix(2×) 10μl 10μl
自备FIP引物终浓度 0.8μM 0.8μM
自备BIP引物终浓度 0.8μM 0.8μM
自备F3引物终浓度 0.2μM 0.2μM
自备B3引物终浓度 0.2μM 0.2μM
自备Loop F引物终浓度(可选项) 0.4μM 0.4μM
自备Loop B引物终浓度(可选项) 0.4μM 0.4μM
自备模板 RNA 1-100ng 不加
AMV-Bst 混合液 1.5μl 1.5μl
补水到 20μl 20μl

 注:如在反应管中加入本公司PCR级绿如蓝染料1μL(水则少加1μL),则可直接在荧光定量PCR仪中进行荧光定量检测。
2. 混匀,置于60-65℃保温30-120分钟。注意:如果不使用Loop引物,则最好保温120分钟;如果使用Loop引物,则最好保温30分钟。
3. 80℃10分钟灭活Bst DNA聚合酶。此酶有外切酶活性,所以必须灭活。
4.产物置于-20℃备用或立即用于下游检测。扩增产物可选下列方法之一检测:
a)琼脂糖凝胶电泳。取扩增产物5μL,1-2%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特征性电泳图谱;
b)向扩增产物中直接加入本公司PCR级绿如蓝染料(另售)1μL,混匀,稍离心。将反应管置于紫外透射仪或凝胶成像系统中,紫外灯下可见绿色荧光产生;
c)荧光定量检测。
5. 结果分析:
a)如果没有扩增,则需要用本试剂提供的阳性对照进行扩增。本试剂盒提供阳性对照,反应按下表设置:
成份 阳性对照管
RT-LAMP Mix(2×) 10μl
对照引物混合物 4.0μl
对照模板 1μl
AMV-Bst 混合液 1.5μl
3.5μl

 混匀后,置于60℃保温120分钟,其余操作同上。注意:本对照引物中没有Loop引物,所以最好保温120分钟。
b)如果阳性对照能够扩增出,则说明试剂盒没有问题,可能是模板或引物的问题。如果阳性对照没有扩增出条带,则是试剂盒的问题,请跟厂家联系。

注意事项:
1.引物设计对成功扩增十分关键。除用于SNP分型外,尽量以保守区设计引物。
2.引物至少包括F3/B3和FIP/BIP,加入环状引物F loop/B loop可以使反应速度大大提高。
3. 应优化引物序列、GC含量和尽量避免二级结构。
4.反应中各个引物的浓度及比例对扩增效果有一定的影响。
5. 建议先将所有引物混合在一起,配制成10.浓度以方便使用。
6. LAMP扩增具有特异性好、灵敏度高、时间快、不需要特殊仪器设备等优点。但太高的灵敏度使得其比普通PCR扩增更加容易污染导致假阳性。因此,必须高度重视扩增产物的污染。常规措施包括严格的实验分区、添加UNG和dUTP(可能导致反应效率下降)、使用荧光定量等不开盖检测方法。实验室一旦遭到污染,所有相关试剂必须全部更换,必要时还得更换实验室。
7. 要确证扩增的为目标基因,可以使用特定的限制性酶切和/或Southern杂交。
8. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品等用途。


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·柱式无内毒素质粒DNA提取试剂盒
编号:BTN60807
英文名称:Endotoxin-free plasmid DNA column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是整合我们公司柱式质粒DNA提取和菌体内毒素清除剂两产品而成。菌体内毒素清除剂是我们公司独家推出的产品,在质粒提取前就把细胞壁上的内毒素清除掉,彻底避免了目前通用的先提取DNA+内毒素混合物,再从中纯化质粒DNA的弊端。用本产品提取的质粒DNA,内毒素的污染浓度低,适合于转染等对内毒素的污染敏感的实验。

试剂盒特点:
1. 操作简单,只在经典的柱式质粒DNA提取前,增加菌体内毒素清除一步。
2. 去内毒素效果好,处理一次可以去除99%以上的内毒素。
3.质粒丢失少,产率只比柱式质粒DNA提取低5-10%,效果好于先提质粒DNA,再用液相内毒素清除剂处理的方法。
4. DNA可以直接用于转染等实验。

试剂盒组成:
成分 规格
菌体内毒素清除剂 200ml
溶液A 13ml
溶液B 13ml
RNase A(10mg/mL) 150μl
离心吸附柱 50套
通用洗柱液 50ml
DNA洗脱液2.0 10ml
说明书 1份


储存条件:常温运输及保存,有效期一年。RNase A(10mg/mL)需要低温运输和保存。

使用方法:

一: 用菌体内毒素清除剂清除E.coli细胞壁上的内毒素。
1. 收集1.5-3mL E.coli饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,得到细菌沉淀。
2. 加入1mL本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟,弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4次,得到的菌体可以直接进入后续的质粒DNA提取步骤。
二:从无内毒素的E.coli中提取质粒DNA
1. 用1.5mL离心管收集1-4mL 过夜培养饱和菌液,12000rpm离心1分钟,弃上清,再短暂离心,吸弃残留液体。
2. 加入250μl溶液A,用枪头充分吹打使菌体重悬。
3. 加入250μl溶液B(如果有沉淀,用前须37℃加热溶解后冷却到室温方可使用),温和反复颠倒混匀4-6次,看到溶液变粘即可。千万不要剧烈振荡。
4. 加入350μl溶液C,反复颠倒混匀4-6次,可见白色沉淀物产生,然后冰上静止2-5分钟。注意:不要超过5分钟。
5.室温12000rpm离心10分钟,将上清液转移到离心吸附柱中,室温放置2分钟。
6. 12000rpm离心1分钟,质粒DNA吸附到膜上,弃收集管中的废液。
7. 加入500μl的通用洗柱液,12000rpm离心1分钟,弃收集管中的废液。注意:我们公司的通用洗柱液是由乙醇和含NaCl的溶液组成,NaCl在其中的溶解度较低,放置一段时间后可能会产生NaCl沉淀。如果有沉淀,用前最好加热使之溶解并混匀后使用。
8. 重复上步操作1次。
9. 12000rpm离心1分钟,甩干残留液体。此步不能省略,否则残留乙醇会影响后续的电泳上样(DNA沉不到加样孔里去)和酶反应。
10. 将离心柱置于新的1.5mL离心管(自备)中,加入50μl DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。
11. 12000rpm离心1分钟,离心管底溶液即质粒DNA。
12. 由于天我们公司的吸附柱结合DNA能力较强,需要再加入50μl DNA洗脱液2.0到离心吸附柱中,室温放置2分钟,重复上步操作,往往还能洗脱下很多质粒DNA(相当于第一次洗脱的20-30%)。注意不要使用上步得到的含有DNA的洗脱液来进行第二次洗脱。
13. 将两次洗脱收集到的质粒DNA汇集即可立即使用或放冰箱保存。


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·DNA洗脱液
编号:BTN70705
规格:10mL

·潮霉素B
编号:BTN100839
英文名称:Hygromycin B Powder
规格:250mg
潮霉素B为无定形粉末。易溶于水、甲醇和乙醇,几乎不溶于低极性溶剂。熔点160~180℃。有催泪性和刺激性。

作用原理:蛋白质合成抑制剂,可干扰80S核糖体易位而造成翻译错译。

抗性机制:抗性基因hph特异性表达一种磷酸转移酶,可催化多醇环(hyosamine)的4-羟基磷酸化,产生7"-O-磷酸基-潮霉素B,后者在体内及体外均无生物活性。

储存条件:常温运输、4℃避光保存、有效期一年。

·即用型热启动PCR试剂盒
编号:BTN130986
英文名称:Instant Hotstart PCR MasterMix
规格:1.5mL
本产品是即用型的2×高保真PCR预配反应液,含有除引物、模板以外的所有PCR 试剂,包括Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液、PCR 增强剂、上样染料等,特别适合于高保真PCR反应。

产品特点:
1. Pfu DNA聚合酶是使用最广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。
2. 使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便,简化了PCR的准备工作。
3. PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。由于加样过程少,有利于减少污染,降低实验误差。
4. 本产品A型含电泳染料,PCR反应液可直接上样电泳,进一步简化了操作。
5. 由于各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。
6.适用于基因的高保真扩增和基因定点突变等实验,得到的PCR产物可用于平末端克隆。

储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为12个月。

使用方法:
将本产品与用户自备的模板,引物混合液按下列推荐使用量(30μL反应体系)加入PCR 管中即可进行PCR,反应结束后直接取5-15μL电泳检查扩增结果。如果反应体系不是30μL,各成分需要按比例增加或减少。
试剂 加入量
Hotstart PCR Mix 25μL
DNA模板(自备) 哺乳动物基因组DNA 0.5-1μg
酵母基因组DNA 5-500ng
细菌基因组DNA 0.5-50ng
质粒DNA 5-500pg
PCR回收片段 1-100pg
PCR引物(自备) 10pmol each
补水到 30μL

放入PCR 仪中,根据用户确定的参数进行PCR,扩增结束后取5-10μL上样电泳。
注:用户可按照每1.5mL Hotstart PCR Mix中加入60μl 专用染料的比例将60μl 专用染料加入到1.5mL PCR MagicMix 3.0中,本染料对PCR扩增效率没有任何影响。扩增结束后,可直接取PCR反应液上样电泳,不需要额外再加DNA上样液。

注意事项:
1.如果反应体系不是30μl,各成分需要等按比例增加或减少。
2.如果DNA 模板中有PCR 不明抑制物(植物、土壤和血液等DNA样品常含此类抑制物),可以在PCR 体系中加入1/10的PCR 抑制物清除剂(BTN60804,30μl 体系中加3μl),可能会对PCR 有帮助。



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