北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠

北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠

价格: ¥140 - 2450

品牌:百奥莱博

货号:BTN90704-HLF

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保存条件 :常温运输

保质期 :一年

英文名 :Soil microbe RNA extraction kit

库存 :296

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠是高品质的RNA纯化产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多土壤微生物RNA提取试剂盒等RNA纯化产品请联系我司咨询订购。


名称:北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠
产地:国产|进口
规格:50次
品牌:百奥莱博
英文名:Soil microbe RNA extraction kit
编号:BTN90704
由于土壤中有机质含量丰富,尤其是其中的腐殖酸对 RT-PCR等后续反应有极大的抑制作用,所以从土壤微生物提取高纯度的RNA一直是十分棘手的问题。本试剂盒就是为解决相关问题而研发设计的。

试剂盒特点:
1. 操作简单快速,处理一个样品只需要约十几分钟。
2. 去污染效果好,RNA 纯度更高,平均 OD260/280一般都在 2.0左右。
3. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA 合成等实验。
4. 性价比高于进口的土壤 RNA提取产品。
5. 试剂无毒无害,环保。

试剂盒组成:

 
成分 A型
溶液A 50ml
溶液B 15ml
溶液C 25ml
溶液D 25ml
RNA溶解液 10ml
说明书 1份


储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1. 称取 0.1-0.5 g的土壤,加入1mL溶液A,震荡器上剧烈震荡 5-10分钟。
 注意:一定要让管底的土壤震荡起来。注意:溶解溶液A沉淀。溶液A在 4℃ 放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在 65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇 匀后再取用。
2. 稍微静置后将上清液转移至一个干净的1.5mL塑料离心管中。
3.在离心管中加入0.3mL的溶液B和0.2mL自备*仿,在振荡器上振荡 30秒混匀。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
4.室温 12000rpm离心 3~5分钟。
5. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,下层有机相和中间层含有DNA、蛋白质和其他杂质,避免触及或吸取。最好留下 100μl上清液不取。
6.在上清液中加入0.5mL的溶液C和0.2mL的自备*仿,用手上下颠倒或振 荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈均匀的乳浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
7.室温 12000rpm离心 3分钟,两相间将有白色膜状物(蛋白质)形成。
8. 将上清液(约1mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中,避免触及或吸取有机相及其上面的白色膜状物。
9.在上清液中加入0.5倍体积的溶液D,用手上下颠倒或振荡器振荡 30秒混匀,此时溶液呈白色浑浊状。振荡器振荡时必须使管底溶液震荡起来。
10. 13000-15000g室温离心 5-30分钟,小心移弃上清液,避免触及管底大量的白色 RNA沉淀。
11.在离心管中加入1mL 75%乙醇,振荡器上振荡混均 30秒。室温离心13000-15000g 1分钟,RNA 此时在管底形成细小沉淀。小心吸弃上清液,注意不要吸弃 RNA沉淀。
12. 重复第 11 步的75%乙醇清洗步骤一次。
13. 短暂快速离心数秒使管壁上残留液体沉到管底(约50μl),用移液枪小心吸弃,注意不要吸弃沉淀。此步十分重要,因为残留的乙醇会影响后续反应。
14.室温短暂放置 2分钟,立即加入适量(一般为10-30μl)RNA 溶解液使 RNA沉淀溶解。注意:千万不要用真空离心法使 RNA沉淀过于干燥,否则 RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以直接使用,也可以存放于-80℃长期保存。
15. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA电泳 ,因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques,28:414,2000)。
16. RNA产量产率测定:将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在 OD260的光吸收。通过光吸收可以得出 RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL),进而计算出 RNA的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
17. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA的OD260/OD280一般在 1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR等反应。
北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠
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·柱式真菌DNA提取试剂盒
编号:BTN70901
英文名称:Fungus DNA Column extraction kit
规格:50次
本试剂盒是真菌DNA提取试剂盒的柱式升级产品,能够破裂各种真菌坚硬的外壳,同时使用硅胶膜DNA 纯化技术,得到的DNA适用于各种后续实验。

试剂盒特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.9左右、DNA片段大小在30-50 Kb左右,可直接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 操作简单,整个过程约15分钟,比大多数同类产品短。
3. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
4.液体培养物处理量在0.1-3mL之间,真菌菌丝、孢子、子实体的处理量在0.1-0.5g之间。
5. 价廉物美,与国外同类产品相比质量相当,但价格便宜。

试剂盒组成:
成分 规格
溶液A 50ml
溶液B 50ml
溶液C 50ml
离心吸附柱 50套
通用洗柱液 50ml
DNA洗脱液 10ml
说明书 1份


储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

使用方法:
1. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、孢子、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀,转移到塑料研钵中,液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
 注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA 会吸附在表面,影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥,则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍;如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA,则需要先去除红细胞等成份,具体方法请参考相关文献和相关产品的使用说明书,如红细胞裂解液)。
2.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀,需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
3. 65℃保温5-30分钟,其间最好吹打混匀2-3次。
4. 12000~15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物,但对后续操作没有影响,不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000~15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000~15000g室温离心3分钟,两相交界面将有白色膜状物,小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意:由于下一步要加1.5倍体积的溶液C,所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀,然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL 混合液后,室温放置5-10分钟。
13. 12000~15000g室温1分钟,弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品,可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中,重复第12-14 步的操作。
15. 将0.7mL 通用洗柱液加入离心柱,室温离心1分钟,弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液,12000~15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中,加入30-100μL通用洗脱液。
19.室温放置5分钟后离心1分钟,管底即为真菌DNA溶液,可立即使用,也可长期保存在-20℃。
20.可以重复上步一次,以洗脱更多的DNA。


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北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠

·硫*(代"酸")卡那霉素干粉
编号:BTN60302
英文名称:Kanamycin Sulfate Powder
规格:1g
卡那霉素硫*(代"酸")盐是*基糖甙类广谱抗生素。分子式为C18H36N4O11·H2SO4。分子量为582.60,白色或类白色粉末或不规则棱柱体结晶。易溶于水,几乎不溶于一般醇类和非极溶剂。

储存条件:常温运输,4℃避光保存,有效期一年。

·即用型荧光定量PCR试剂盒
编号:BTN90408
英文名称:Instant Fluorescent qPCR Kit
规格:1mL
本产品是基于荧光染料检测的即用型PCR试剂盒,可以对靶片段进行实时定量PCR分析。产品含有经过优化的缓冲液组分、Taq DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2及新型荧光染料DNAgreen等所有实时定量PCR所需要的成分,用户只需加入模板和引物即可进行实时定量PCR反应和HRM分析,具有广泛的用途。

产品特点:
1. 方便,用户只需准备模板和引物既可以进行实时定量PCR实验和HRM(High Resolution DNA Melt Curve Analysis)分析。而基于SYBR Green I和LC Green染料的qPCR mix则不能同时用于上述两种实验。
2. 使用第三代饱和型荧光染料,信号强,不会抑制PCR反应。
3.快捷,即用型的预配液使加样操作步骤大大简化,避免了交叉污染,降低实验误差。
4. 各成分的浓度和比例都经过精心优化,反应的灵敏度高,特异性强。能检测到浓度为50拷贝/mL的靶分子。

试剂盒组成:
成分 规格
Taq DNA聚合酶(5U/μL) 100μl
易错PCR Mix,10× 300μl
易错PCR专用dNTP,10× 300μl
MnCl2,5mM 300μl
说明书 1份


储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为6个月。

使用方法:

1.以20μl的qPCR反应体系为例:在一干净的PCR管中,加入下列成分:
反应体系成分 20μl体系 终浓度
qPCR MagicMix,2× 10μl
自备引物一 xμl 0.1-0.5μM
自备引物二 xμl 0.1-0.5μM
自备模板 xμl  
自备ROX 2μl (可以不加)
补超纯水到 20μl  

放入荧光PCR仪中进行扩增,并在退火或延长步骤中记录荧光信号。
注意:
a)通常引物浓度以0.2μm可得到较好结果,可以终浓度0.1-1.0μm作为设定范围的参考;通常DNA模板的量以10-100 ng基因组DNA或1-10 ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
b)ROX 校正染料:如果使用ABI公司的7500,7700和7900三种型号的荧光PCR仪器,则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900,ROX的最佳浓度为1×(即在每20μl反应体系中加2μl 10×ROX)。对ABI 7500,ROX的最佳浓度为0.05-0.1×(每20μl反应体系加0.1-0.2μl 10×ROX;也可将10×ROX稀释到1×,然后每个反应体系加入1-2μl 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音,因此,如果出现了杂峰,将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾,然后重新分析数据。
对于iCycler IQ,MJ Opticon,MJ Chromo4,MX3000,MX4000,RotorGene3000,RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器,ROX不是必须的,但加入的话也不会影响整个PCR分析。

2. 循环步骤:根据扩增子的性质和仪器性能,从以下三个过程中任选一个进行扩增。
两步快速循环法:适用于引物Tm值设计为60℃的反应
循环步骤 温度 时间 循环数
酶活化 95℃ 10min 1
变性 95℃ 15s 35-40
退火&延伸 60℃ 1min

注意:本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
三步快速循环法:适用于延伸步骤温度高于退火步骤的PCR(长引物PCR)
循环步骤 温度 时间 循环数
酶活化 95℃ 10min 1
变性 95℃ 10s 35-40
退火 56-64℃ 30s
延伸 72℃ 32s

注意:
·退火温度:建议采用两步法PCR,退火温度60℃进行反应。若提高反应特异性,可提高退火温度,以60-64℃作为设定范围的参考。若因使用Tm值较低的引物等原 因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,三步法的退火温度请以56℃-64℃的范围作为设定参考。
·延伸温度:延伸温度设为72℃通常可以提高扩增效率。但是,对于AT含量大于70%的扩增子来说,延伸温度设为60℃为宜。
通用循环法:这种循环方法适用于几乎所有的荧光PCR仪,也适用于用快速循环法不能扩增的模版。
循环步骤 温度 时间 循环数
酶活化 96℃ 10min 1
变性 96℃ 15s 35-40
退火&延伸 60℃ 1min


3. 数据采集
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时,最大吸收光谱在471nm,结合DNA时的最大吸收光谱在500nm,最大发射光谱在530nm。

注意事项:
1. 如果使用iCycler,可以不加入FAM。
2. 如果使用Roche LightCycler的玻璃毛细管进行PCR,需加入终浓度为0.5mg/mL的自备BSA。


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北京现货BTN90704型土壤微生物RNA提取试剂盒特价优惠
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