北京现货大提柱式质粒DNA提取试剂盒批发价格

保存条件：RNase A溶液需-20℃保存，其余成

保质期：长期

英文名：Mass-plasmid DNA column extraction kit

库存：796

供应商：北京百奥莱博科技有限公司

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产供应北京现货大提柱式质粒DNA提取试剂盒批发，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京现货大提柱式质粒DNA提取试剂盒批发
编号：BTN80912
品牌：百奥莱博
英文名：Mass-plasmid DNA column extraction kit
产地：国产|进口
本试剂盒是用于质粒DNA大量制备与纯化的试剂盒。菌体先经碱裂解法处理，再通过离心吸附柱，专一结合DNA，最后洗去杂质，高效快速提取质粒DNA，全*(代"套")操作可以在30分钟之内完成。使用本试剂盒可从50-100mL 过夜培养的菌液纯化得到高达300-500μg的高纯度质粒DNA(OD260/OD280= 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、转化、测序及PCR等。

试剂盒特点：
1．快速、步骤少，整个操作在半个小时之内完成。
2．纯度高，采用本试剂盒提取的质粒OD 比值在1.8-2.0 之间。
3．产量高，每毫升过夜培养的细菌可以提取到2-5μg/mL。
4．用途广，适用于低拷贝和高拷贝质粒。
5．价格低，比多数国内同类产品的价格更便宜。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	30ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.15ml
溶液C	40ml
大提离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
DNA洗脱液2.0	10ml×2
说明书	1份

储存条件：RNase A溶液需-20℃保存，其余成分可室温或4℃保存，如有沉淀可加热溶解后再使用。

使用方法：
1. 用250mL离心管收集100-300mL菌液，5000rpm离心10分钟，去除上清。
2. 往细菌沉淀中加入6mL溶液A，充分振荡悬浮(第一次使用时需要将RNase A溶液全部加入到溶液A中并混合均匀，未用完的、含RNase A的溶液A需放4℃保存)。注意：充分重悬细胞沉淀使之无细胞结块状物对于获得高的质粒产量十分重要。
3. 加入6mL溶液B，温和翻转10 余次至透明。若混合液不透明，应减少细菌的用量或室温放置5-10分钟直到裂解液变透明。注意: 避免剧烈振荡，否则细菌基因组DNA 将断裂为小片段，与质粒难以分离，污染质粒DNA。
4. 加入冰浴的8mL溶液C，颠倒混匀，冰上放置10分钟。混合物中将有白色絮状物形成。注意不要过分振荡。
5. 6000rpm离心10分钟。如果离心管承受能力强，离心速度还可以适当提高以充分沉淀絮状物。
6. 将上清液(约20mL)转移到离心吸附柱中，放入50mL 套管中。
7. 6000rpm离心5分钟，质粒DNA 将与离心吸附柱中的膜结合。弃穿透液。
8. 将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
9. 重复上步一次，即将10mL 通用洗柱液加入到离心吸附柱中，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，弃穿透液。
10.室温6000rpm 空甩5分钟，弃穿透液。注意：此步对去除残留通用洗柱液很重要，否则通用洗柱液会影响DNA的使用。
11. 将离心吸附柱放入一个自备的、干净的50mL塑料离心管中，加1mL DNA洗脱液2.0(洗脱液如加热到50-65℃效果更佳)，室温静置2分钟后6000rpm离心5分钟，收集液即是质粒DNA溶液。
12. 本试剂盒中的离心吸附柱吸附能力较强，所以再用1mL DNA 洗脱液2.0洗脱3-4次才能把绝大部分质粒DNA 洗脱下来。得到的RNA可以收集在一起立即使用或存放于-80℃待用。注：如果DNA 洗脱液不够，可以用自备的DEPC 水代替。
注：一般情况下，第一次洗脱可以洗脱约25%的质粒DNA；第二次洗脱可以洗脱约35%的质粒DNA；第三次洗脱可以洗脱约20%的质粒DNA；第四次洗脱可以洗脱约10%的质粒DNA；第五次洗脱可以洗脱约8%的质粒DNA。
13. 合并所得质粒DNA，立即使用或-20℃储存。如果需要使用液相内毒素清除剂清除质粒DNA中的内毒素，可以直接将此步所得的DNA溶液用于去内毒素处理。如果DNA浓度太低，可以另购本公司的核酸浓缩剂进行浓缩。

注意事项：
1．细菌培养时间一般为12-16小时，但接种量大时应减少时间。过度培养会降低质粒的质量甚至导致质粒DNA突变。
2．溶液A：溶液B：溶液C的比例为3：3：4。若细菌量增大，需按此比例放大这些溶液的使用量。
3．随菌体增多应延长溶液B的作用时间，直至溶液成粘稠透明状。但时间过长会导致质粒DNA变性。
4．加溶液C后形成的白色沉淀中有变性的蛋白质、细菌基因组DNA和细胞碎片，离心后应避免带入到后续处理中。
5．通用洗柱液洗涤离心柱后必须甩干一次，否则残留通用洗柱液中的乙醇会干扰后续实验。
6．质粒的具体产量跟细菌量、质粒拷贝数、质粒大小和操作规范程度密切相关。100mL高拷贝的菌液一般能得到700-1500ug质粒DNA，100mL低拷贝的菌液一般能得到150-350ug质粒DNA。
7．纯化的质粒在电泳中表现为2-3 条带有时甚至为4-6 条带均属正常，未分开的环套质粒，易被误判为基因组DNA。

除北京现货大提柱式质粒DNA提取试剂盒批发外，我公司正在打折促销以下产品：

·胆酸*
编号：BTN131048
英文名称：Sodium Cholate
规格：5g
本产品用于制备脂质体和分离脂质。HPLC测定其纯度＞99%。低紫外吸收(1%溶液的A280＜0.08)。可以重生固定化的多粘菌素B 亲和柱。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

·RNase H
编号：BTN120413
英文名称：Ribonuclease H
规格：600U
RNase H是特异性分解RNA-DNA杂交体中的RNA链的核糖核酸内切酶，产生具有游离 3´-OH和5´-磷酸末端的产物，该酶对单链的核酸，双链DNA或双链RNA不起作用。

产品用途：
1．通过Okayama-Berg法进行cDNA Cloning。
2．DNA-RNA杂交体的检定。
3．在Oligo(dT)存在下除去mRNA的Poly(A)末端。
4．mRNA的定量。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：以Poly(rA)*Poly(dT)为底物，在30℃、pH7.7的条件下，20分钟内产生1nmol酸可溶性物质所需要的酶量定义为1个活性单位

纯度：
1．50U的本酶和1μg的λDNA-Hind III分解物在37℃下反应16小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2．50U的本酶和1μg的Closed circular(RFI)pBR322 DNA在37℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3．50U的本酶和1μg的16S，23S rRNA在37℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。

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·一站式蛋白质非变性PAGE电泳套装(低pH)
编号：BTN81212C
英文名称：One-Stop Protein Native PAGE Pack(C)
规格：30次
非变性聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Native PAGE)是目前电泳法分离活性蛋白的主要方法之一，跟SDS-PAGE根据分子量大小分离蛋白质不同，它是根据蛋白质分子大小、形状、电荷密度三个主要参数分离蛋白质。由于蛋白质的pI各不相同，所以对不同蛋白质需要选用具有不同pH的电泳体系。单独配制不同pH的Native PAGE电泳胶十分繁琐，为此本公司开发了本产品。

产品特点：
1．即开即用，不需单独准备各种成分，十分方便。还免去了实验人员接触粉末状的剧毒物品丙*(代"烯")酰胺
2．非变性，电泳过程中蛋白质保持天然的构象和亚基之间的相互作用，得到的蛋白质一般都具有生物活性(而SDS-PAGE得到的蛋白没有活性)。
3．可用于分析蛋白质和DNA或RNA的相互作用、蛋白修饰、蛋白构型改变、回收有活性蛋白质等试验。
4．电泳后可直接用于考染、银染、Western杂交等实验。
5．提供具有3种不同pH的缓冲液套装，便于客户选择最适合的缓冲液体系。

产品组成：

成分	规格
丙*(代"烯")酰胺干粉	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺干粉	3g
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵干粉	1g
高中低缓冲液套装选一	ABC之一(见下)
说明书	1份
高pH缓冲液套装(只有BTN81212A有此成分)
高pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
高pH分离胶配胶液(pH8.9)，4×	200ml
高pH电泳液(pH8.3)	10L(干粉)
高pH上样液，5×	1ml
中pH缓冲液套装(只有BTN81212B有此成分)
中pH浓缩胶配胶液(pH5.5)，4×	100ml
中pH分离胶配胶液(pH7.5)，4×	200ml
中pH电泳液(pH7.0)干粉A	55.2g
中pH电泳液(pH7.0)干粉B	10g
中pH上样液，5×	1ml
低pH缓冲液套装(只有BTN81212C有此成分)
低pH浓缩胶配胶液(pH6.7)，4×	100ml
低pH分离胶配胶液(pH4.3)，4×	200ml
低pH电泳液(pH4.5)	10L(干粉)
低pH上样液，5×	1ml

注：高、中和低pH缓冲液套装里面均含100mL浓缩胶配胶液、200mL分离胶配胶液、10 L电泳液(干粉)和1mL上样液，只是pH不同。

储存条件：常温运输和保存(上样液需-20℃保存)，保存期为一年。

使用方法：
如何选择缓冲液?
高pH浓缩胶，高pH分离胶，高pH电泳液和高pH上样液一定要配套使用。中pH和低pH系列也是如此，绝不能高pH的成分跟其他pH的交叉使用。选择适当pH的缓冲液(包括上样液，电泳液，配胶液等)对蛋白质非变性PAGE非常重要，缓冲液的最佳pH又跟目的蛋白质的pI值密切相关。如果pH远离pI，则蛋白质分子带电多(电荷密度大)，电泳速度快，分辨率高。但过酸过碱又容易使蛋白质结构变性，失去活性，所以最佳pH条件就是在电泳分辨率和维持活性之间寻找平衡，需要针对每种蛋白质进行摸索或通过滴定曲线来确定，没有通用的电泳缓冲体系。由于有近半数的蛋白质pI在4-6.5，所以在不知道目标蛋白的pI时，可以先选用高pH缓冲系统。

一、配制分离胶
1．确定浓度。对分子量在100Kd以上的蛋白质，可选用3-5%的胶；对分子量在20-150KD之间的蛋白质，可选用5-10%的胶；对分子量在10-80KD之间的蛋白质，可选用10-15%的胶。对未知样品，建议使用7.5%的胶。
2．配制10%的APS(过硫*(代"酸")铵)：按每0.1克过硫*(代"酸")铵干粉加1mL去离子水的比例配制10%的APS溶液，该溶液可以在4℃存放一周。
3．配制30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液:在本产品提供的装有60克丙*(代"烯")酰胺干粉的塑料瓶中加入146mL自备的去离子水和3g甲叉双丙*(代"烯")酰胺,充分摇晃直到溶解(约需10-20分钟)即得200mL 30%丙*(代"烯")酰胺(19:1)溶液。此溶液最好在一个月内用完，必须4℃避光保存。
4．配10mL分离胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入4.2mL去离子水、3.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×分离胶配胶液。
5．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除的话将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
6．加入50μL新配制的10%APS和10μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则按比例增加)，迅速摇匀后倒胶。注意：如果购买的是低pH缓冲系统，由于在低pH缓冲液中PAGE聚合速度降低，所以需要增加上述两成分的用量。
7．在胶面距离顶部1-1.5 cm的时候停止灌胶。然后覆盖一层1-5 mm厚的水，使胶顶部液面平整。由于比重不同，水和丙*(代"烯")酰胺溶液不会混合。
8．室温聚合30-60分钟后，用1×分离胶配胶液洗涤凝固的胶的顶部，待用。

二、配制浓缩胶(浓缩胶可以提高分辨率，适合于成分复杂的样品，一般使用浓度为4%。使用浓缩胶时蛋白质泳动速度主要跟其尺寸和形状相关。因浓缩胶pH跟分离胶pH不同，蛋白质可能会发生聚合和沉淀。对成分单一的样品，可以不用浓缩胶，此时蛋白的泳动速度主要跟其电荷密度，尺寸和形状相关。)
1．配10mL浓缩胶(如果配制其他体积,请按比例调节各成分用量):在一个25mL的三角瓶中，先加入6.2mL去离子水、1.3mL 30%丙*(代"烯")酰胺-甲叉双丙*(代"烯")酰胺(19：1)溶液和2.5mL 4×浓缩配胶液。
2．摇晃混匀后抽真空10-15分钟以去除溶液中的氧气(氧气能抑制丙*(代"烯")酰胺聚合反应，不去除将影响丙*(代"烯")酰胺聚合反应)。
3．按上表用量加入50μL 10%APS和15μL TEMED(这是配制10mL胶的用量，配制更大体积的胶则用量需按比例增加)，迅速摇匀后在已经凝固的分离胶上倒胶。
4．在液面达到顶部时停止灌胶，插入梳子。
5．室温聚合30-60分钟，拔出梳子，用1×电泳液冲洗加样孔。

三、电泳
1．将凝胶板固定在电泳装置上，往上槽和下槽加入足够1×电泳液。注：本产品提供10升的三种不同pH的电泳液干粉中的一种，低PH和高PH值电泳液用前需将所有干粉溶解在1 L水中得10×电泳液，可以室温放置，用时再稀释成1×电泳液。一般不需要再调节pH，但保险起见，可以用pH试纸测试一下1×电泳液。高中低pH电泳缓冲液的pH分别是8.3，7.0和4.5。
注意：中pH值的电泳液干粉只能配1x电泳液，否则不溶解。称取中pH电泳液(pH7.0)干粉A，5.52g,中pH电泳液(pH7.0)干粉B 1g混匀，加去离子水至彻底溶解，调PH7.0，定容至1L。客户根据可实际需要量按比例增减。
2．连接电极。如果浓缩胶和分离胶的pH高于目标蛋白pI，目标蛋白将带负电荷并向阳极移动，可以按标准的SDS-PAGE方法接通电极(上阴极下阳极)；如果浓缩胶和分离胶pH低于目标蛋白pI，目标蛋白将带正电荷并向阴级移动，此时应该下阴极上阳极。
3．300V预电泳直到电流不再降低(约需要30分钟)以去除残留过硫*(代"酸")铵。
4．换电泳液。
5．在液体蛋白质样品中加入5×上样液(16μl液体样品加4μL上样液)后上样。0.75 mm厚的胶可以上10μl，1.5 mm厚的胶可以上20μl。在未用加样孔中也要加1×上样液以防有样品的空道的样品扩散。注意：如果用考染检测，每个孔的蛋白最好在50-100μg总蛋白，如果银染则只需要1ug即可。样品如果是蛋白质沉淀，可用1×上样液直接溶解蛋白质沉淀后再上样。蛋白质溶液或沉淀中不能含有能够改变上样液pH的残留成分(如蛋白质沉淀剂TCA)，用前最好用pH试纸测试一下，不在上样液的pH范围时就用酸或碱调到正常范围。大量样品可用透析法调pH。
6．上样自备的天然PAGE蛋白质标准或等电电泳的标准品(如果有的话)。
7．用15 mA(对0.75 mm厚的胶)或30mM(对1.5mm厚的胶)的电流电泳直到染料移动到分离胶底部。微型胶一般需要1-2小时。注意：电泳过程最好在冷室或有冷却系统，以免电泳产热使蛋白质变性。
8．终止电泳，取出凝胶进行后续的实验处理(如染色或酶活性检测)。

北京现货大提柱式质粒DNA提取试剂盒批发关键词：BTN80912,大提柱式质粒DNA提取试剂盒,Mass-plasmid DNA column extraction kit

73-24-5 腺嘌呤 Adenine
9049-37-0 多聚半乳糖醛酸* Polygalacturonic acid sodiu*(代"m") salt
ARB10712 人多药耐药基因(MDR1)ELISA检测服务
BTN100213 DNA嵌套缺失试剂盒 DNA Nested Deletion Kit
D-脯*酸甲酯盐*(代"酸")盐 MUD 65365-28-8
BFD070 鸡禽流感抗原检测卡
水杨酰**(代"胺") Rhodizonic acid sodiu*(代"m") salt 87-17-2
棕榈酸对硝基*(代"*")酯 Bile salt(pig) 1492-30-4
ARB12022 大鼠β2-微球蛋白(β2-MG)Elisa分析 Rat β2-microglobulin,bmg/β2-mg ELISA KIT
ARB13601 兔子补体蛋白4(C4)Elisa方法检测 Rabbit complement 4,c4 ELISA KIT
ARB11141 人肿瘤坏死因子可溶性受体I(TNFsR-I)elisa检测 Human tumor necrosis factor soluble receptor i,tnfsr-iELISA KIT
PY04-006 10%三*化铁溶液 10ml×1支将10%三*化铁溶液2-3滴加入*丙*酸培养基中观察结果，用于细菌的*丙*酸试验结果判断
ARB11824 人褪黑素(MT)检测服务 Human melatonin,mt ELISA KIT
F030638 FITC标记山羊人IgM抗体 Polyclonal Goat Anti-Human IgG FC*FITC
ARB12118 大鼠可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)Elisa分析 Rat soluble vascuolar cell adhesion molecule 1,svcam-1 ELISA KIT
6025-53-2 玉米素核苷
乙酰水杨酸 G-1-P-Na2 50-78-2
PY02-193 S.F基础 250克
NF-208 羊抗人IgM血清