双荧光素酶报告基因

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双荧光素酶报告基因

▼服务简介

荧光素酶（Luciferase）生物检测技术诞生于1990年，距今已有30多年的发展史。单荧光素酶检测系统到双荧光素酶检测系统的发展，为科研人员提供了更为严谨的实验手段。双荧光素酶报告基因检测系统在原有的基础上引入了海肾报告基因，可以排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰，起到校正的作用，从而使实验结果更为可靠。

▼应用场景

荧光素酶作为一种理想的报告基因，主要可用于miRNA与靶基因的靶向互作研究、转录因子与启动子调控机制研究、启动子活性研究等。

▼实验原理

荧光素酶报告基因检测是以荧光素为底物来检测萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase，简称F-Luc）活性的一种报告系统。早年间的单荧光素酶检测系统由于其只有萤火虫荧光素酶，实验结果往往会受到各种实验条件的影响，目前已基本没人使用。之后的双荧光素酶报告基因检测系统在原有基础上引入了由固定组成型启动子驱动的以腔肠素（coelenterazine）为底物的海肾报告基因（Renilla luciferase，简称R-Luc）作为内参基因，可排除不同组之间细胞生长状况、细胞数目以及转染效率带来的干扰，起到校正的作用，从而使实验结果更为可靠。计算结果时，将萤火虫荧光素酶的检测值除以海肾荧光素酶检测值即可。