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文献和实验
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保存条件 :密封保存,有效期2年。
保质期 :密封保存,有效期2年。
英文名 :Cyclohexanone
库存 :大量
供应商 :上海联迈生物工程有限公司
规格 :250 mL
Cyclohexanone(环己酮)
产品名称: 环己酮
英文名称: Cyclohexanone
产品及特点:沸点为 140℃,冰点一40 ℃,比重与水相似,无毒,可与苯、二甲苯、氯仿等有机溶剂温合 ,也为石蜡溶剂 。可代替纯乙醇脱水后直接入石蜡,组织不会变硬,不须再经三甲苯透明。
成分及包装: 塑料瓶内包装,纸盒外包装,无使用手册。
运输及保存: 密封保存,有效期2年
Cyclohexanone(环己酮)实验步骤1. 石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4的PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。
2. 取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)
3. 每张切片加1滴3%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
4. 除去PBS液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。
5. PBS冲洗3×5’。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂,室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
6. 除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物,室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
7. 除去PBS液,每张切片加1滴新鲜配制的DAB液(二氨基联苯胺),显微镜下观察5分钟。
8. 苏木素复染,0.1%HCl分化,自来水冲洗,蓝化,切片经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固,晾干后观察。
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一、Cyclohexanone(环己酮)特点
1. 在切片加上一抗后,第二抗体标记多聚螯合物酶(HRP)的复合物与一抗结合,在多聚螯合物上有大量的HRP分子,使抗原信号有显著的放大,其敏感性较SABC、SP法高。
2. 由于多聚物在体内不存在,又不使用生物素,从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色,背景比SABC、SP法清晰。
上海联迈生物工程有限公司
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