pPICZ A

保存条件 ：-20℃

保质期 ：6个月

英文名 ：pPICZ A

库存 ：大量

供应商 ：钰博生物

规格 ：1ug/5ug

pPICZ A

pPICZA载体基本信息

出品公司:	Ybscience
载体名称:	pPICZA, pPICZ A
质粒类型:	毕赤酵母蛋白表达载体
表达水平:	高拷贝
启动子:	AOX1
克隆方法:	多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:	3329 bp
5' 测序引物及序列:	5´ AOX1:5´-GACTGGTTCCAATTGACAAGC-3´
3' 测序引物及序列:	3´ AOX1:5´-GCAAATGGCATTCTGACATCC-3´
载体标签:	C-Myc, C-His
载体抗性:	Zeocin 博来霉素
筛选标记:	HIS4
备注:	插入基因是必需包含起始密码子ATG。
稳定性:	稳定 Stable
组成型:	组成型 Constitutive
病毒/非病毒:	非病毒

pPICZA载体质粒图谱和多克隆位点信息

pPICZA载体简介

pPICZ A，B和C是3.3 kb的毕赤酵母蛋白载体。表达的重组蛋白是融合蛋白，含有一个C-端多肽，多太重含c-myc和C-His标签。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水平的表达目的蛋白，并且可以用在任何毕赤酵母中，包括X33，GS115菌株，SMD1168H，KM71H。

pPICZ系列载体包含以下元素：

•5'片段含有AOX1启动子的严格调控，利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因（Ellis等，1985; Koutz等人，1989;tschopp等人，1987A）。

•Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选（Baron等人,1992; Drocourt等人，1990）。

•C-端含Myc和His标签，可以用于检测和纯化重组蛋白。

•pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。

pPICZA载体序列

LOCUS       pPICZ A          3329 bp ds-DNA    circular SYN DEFINITION  Pichia pastoris vector for methanol-inducible intracellular             expression of a protein.ACCESSION   .VERSION     .KEYWORDS    pPICZ ASOURCE      synthetic DNA construct  ORGANISM  synthetic DNA constructCOMMENT     This file is created by Vector NTI            http://www.biofeng.com/COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|COMMENT     Linearize with SacI, PmeI, or BstXI for integration at the AOX1             locus.FEATURES             Location/Qualifiers     source          1..3329                     /organism="synthetic DNA construct"                     /lab_host="Pichia pastoris"                     /mol_type="other DNA"     promoter        2..940                     /gene="Pichia pastoris AOX1"                     /note="AOX1 promoter"                     /note="inducible promoter, regulated by methanol"                     /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"     misc_feature    932..1011                     /note="MCS"                     /note="multiple cloning site"                     /note="color: #99ccff"     CDS             1012..1041                     /codon_start=1                     /product="Myc (human c-Myc oncogene) epitope tag"                     /note="Myc"                     /note="color: #cc99b2"                     /translation="EQKLISEEDL"     CDS             1057..1074                     /codon_start=1                     /product="6xHis affinity tag"                     /note="6xHis"                     /note="color: #cc99b2"                     /translation="HHHHHH"     terminator      1153..1399                     /gene="Pichia pastoris AOX1"                     /note="AOX1 terminator"                     /note="transcription terminator for AOX1"                     /note="color: #ffffff"     promoter        1439..1825                     /gene="S. cerevisiae TEF1"                     /note="TEF1 promoter"                     /note="promoter for EF-1-alpha"                     /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"     promoter        1833..1880                     /note="EM7 promoter"                     /note="synthetic bacterial promoter?"                     /note="color: #ffffff; direction: RIGHT"     CDS             1899..2273                     /codon_start=1                     /gene="Sh?ble from?Streptoalloteichus hindustanus"                     /product="antibiotic-binding protein"                     /note="BleoR"                     /note="confers resistance to bleomycin, phleomycin, and                      Zeocin(TM)"                     /note="color: #ccffcc"                     /translation="MAKLTSAVPVLTARDVAGAVEFWTDRLGFSRDFVEDDFAGVVRDD                     VTLFISAVQDQVVPDNTLAWVWVRGLDELYAEWSEVVSTNFRDASGPAMTEIGEQPWGR                     EFALRDPAGNCVHFVAEEQD"     terminator      2339..2586                     /gene="S. cerevisiae CYC1"                     /note="CYC1 terminator"                     /note="transcription terminator for CYC1"                     /note="color: #ffffff"     rep_origin      complement(2661..3249)                     /direction=LEFT                     /note="ori"                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of                      replication"                     /note="color: #ffff00"ORIGIN        1 agatctaaca tccaaagacg aaaggttgaa tgaaaccttt ttgccatccg acatccacag       61 gtccattctc acacataagt gccaaacgca acaggagggg atacactagc agcagaccgt      121 tgcaaacgca ggacctccac tcctcttctc ctcaacaccc acttttgcca tcgaaaaacc      181 agcccagtta ttgggcttga ttggagctcg ctcattccaa ttccttctat taggctacta      241 acaccatgac tttattagcc tgtctatcct ggcccccctg gcgaggttca tgtttgttta      301 tttccgaatg caacaagctc cgcattacac ccgaacatca ctccagatga gggctttctg      361 agtgtggggt caaatagttt catgttcccc aaatggccca aaactgacag tttaaacgct      421 gtcttggaac ctaatatgac aaaagcgtga tctcatccaa gatgaactaa gtttggttcg      481 ttgaaatgct aacggccagt tggtcaaaaa 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