小RNA克隆试剂盒

保存条件 ：低温运输，-20℃保存

保质期 ：一年

英文名 ：Small RNA Cloning Kit

库存 ：大量

供应商 ：联迈生物

规格 ：10 次

小RNA克隆试剂盒产品及特点

克隆是分析低分子RNA的有效方法之一。由于低分子RNA不具有PolyA tail，需在低分子RNA的5’端和3’端分别加上RNA接头或者RNA/DNA杂合形式的接头，经RT-PCR后便可以进行克隆。小RNA克隆试剂盒是根据以上原理开发的，其流程图如下：

对低分子RNA进行cDNA扩增的试剂盒，经本试剂盒扩增的cDNA可以用于各种载体的克隆。扩增得到的cDNA可以直接用于TA克隆，或者利用接头中带有的酶切位点进行克隆。

小RNA克隆试剂盒备注

使用本试剂盒对小RNA进行克隆时的操作流程见图，详细步骤如下：

1. 将小RNA进行BAP处理，5’端去磷酸化。

2. BAP处理后的小RNA的3’端与生物素化的RNA/DNA接头连接。

3. 用标记Strepto avidin的磁珠，回收带有生物素的RNA/DNA接头的SmallRNA，然后进行5’端磷酸化反应。

4. 将5’端连接上RNA/DNA嵌合的接头后，使用RT Primer和M-MLV反转录酶进行反转录反应。

5. 从磁珠上回收合成的cDNA后，进行PCR反应。

6. PCR片段经限制酶酶切后，回收、克隆。