p3XFLAG-CMV-14

保存条件 ：-20℃

保质期 ：6个月

英文名 ：p3XFLAG-CMV-14

库存 ：大量

供应商 ：钰博生物

规格 ：1ug/5ug

p3XFLAG-CMV-14

p3xFLAG CMV14载体基本信息

出品公司:	Ybscience
载体名称:	p3xFLAG-CMV-14, p3xFLAG CMV14
质粒类型:	哺乳动物细胞表达载体
启动子:	CMV
拷贝数:	低拷贝
克隆方法:	多克隆位点，限制性内切酶
载体大小:	6310 bp
5' 测序引物:	CMV-F: 5'-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3'
3' 测序引物:	hGH-PA-R: CCAGCTTGGTTCCCAATAGA
载体标签:	3XFLAG (C-端) ，含EK蛋白酶识别位点
载体抗性:	氨苄青霉素
筛选标记:	Neomycin
克隆菌株:	--
宿主细胞（系）:	常用细胞系，如293、Hela等
备注:	CMV启动子驱动目的蛋白高水平表达； FLAG标签含8个氨基酸残基（DYKDDDDK），3XFLAG标签含22个氨基酸残基； 一般位于融合蛋白的外表面，具有高度免疫灵敏性，便于检测和纯化目的蛋白； 用EK蛋白酶可将3XFLAG标签切除。
稳定性:	瞬表达
组成型:	组成型
病毒/非病毒:	非病毒

 

p3xFLAG CMV14载体质粒图谱和多克隆位点信息

p3xFLAG CMV14载体简介

p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体，从pCMV5载体衍生而来，用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp）。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。

载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。

P3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系，如COS细胞，复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。

p3xFLAG CMV14载体序列

LOCUS       p3xFLAG-CMV-14	6310 bp 	DNA     circular	SYNDEFINITION  p3xFLAG-CMV-14ACCESSION   KEYWORDS    SOURCE        ORGANISM  other sequences; artificial sequences; vectors.COMMENT     This file is created by Vector NTI            http://www.biofeng.com/COMMENT     VNTAUTHORNAME|biofeng.com|FEATURES             Location/Qualifiers     source          1..6310                     /organism="p3xFLAG-CMV-14"                     /mol_type="other DNA"     misc_feature    complement(12..155)                     /label="lacZ_a"     misc_feature    126..148                     /label="M13_pUC_fwd_primer"     promoter        141..157                     /label="M13_forward20_primer"     promoter        319..895                     /label="CMV_immearly_promoter"     misc_feature    398..685                     /label="CAG_enhancer"     promoter        841..912                     /label="CMV_promoter"     misc_feature    852..872                     /label="CMV_fwd_primer"     misc_feature    896..915                     /label="pCEP_fwd_primer"     misc_feature    1044..1058                     /label="EK"     terminator      1079..1545                     /label="hGH_PA_terminator"     misc_feature    complement(1715..1735)                     /label="pBABE_3_primer"     misc_feature    complement(1721..1936)                     /label="SV40_enhancer"     promoter        1733..2001                     /label="SV40_promoter"     rep_origin      1900..1977                     /label="SV40_origin"     misc_feature    1962..1981                     /label="SV40pro_F_primer"     CDS             2084..2878                     /label="ORF frame 2"     gene            2087..2875                     /label="NeoR/KanR"                     /gene="NeoR/KanR"     CDS             complement(2393..2929)                     /label="ORF frame 1"     terminator      3533..3664                     /label="SV40_PA_terminator"     misc_feature    3621..3640                     /label="EBV_rev_primer"     promoter        complement(3670..3688)                     /label="T7_promoter"     misc_feature    complement(3715..3737)                     /label="M13_pUC_rev_primer"     promoter        complement(3751..3780)                     /label="lac_promoter"     gene            complement(4863..5723)                     /label="Ampicillin"                     /gene="Ampicillin"     CDS             complement(4863..5723)                     /label="ORF frame 3"     promoter        complement(5765..5793)                     /label="AmpR_promoter"     rep_origin      5872..6178                     /label="f1_origin"ORIGIN    1 CCATTCGCCA TTCAGGCTGC GCAACTGTTG GGAAGGGCGA TCGGTGCGGG CCTCTTCGCT   61 ATTACGCCAG CTGGCGAAAG GGGGATGTGC TGCAAGGCGA TTAAGTTGGG TAACGCCAGG  121 GTTTTCCCAG TCACGACGTT GTAAAACGAC GGCCAGTGCC AAGCTGATCT ATACATTGAA  181 TCAATATTGG CAATTAGCCA TATTAGTCAT TGGTTATATA GCATAAATCA ATATTGGCTA  241 TTGGCCATTG CATACGTTGT ATCTATATCA TAATATGTAC ATTTATATTG GCTCATGTCC  301 AATATGACCG CCATGTTGAC ATTGATTATT GACTAGTTAT TAATAGTAAT CAATTACGGG  361 GTCATTAGTT CATAGCCCAT ATATGGAGTT CCGCGTTACA TAACTTACGG TAAATGGCCC  421 GCCTGGCTGA CCGCCCAACG ACCCCCGCCC ATTGACGTCA ATAATGACGT ATGTTCCCAT  481 AGTAACGCCA ATAGGGACTT TCCATTGACG TCAATGGGTG GAGTATTTAC GGTAAACTGC  541 CCACTTGGCA GTACATCAAG TGTATCATAT GCCAAGTCCG CCCCCTATTG ACGTCAATGA  601 CGGTAAATGG CCCGCCTGGC ATTATGCCCA GTACATGACC TTACGGGACT TTCCTACTTG  661 GCAGTACATC TACGTATTAG TCATCGCTAT TACCATGGTG ATGCGGTTTT GGCAGTACAC  721 CAATGGGCGT GGATAGCGGT TTGACTCACG GGGATTTCCA AGTCTCCACC CCATTGACGT  781 CAATGGGAGT TTGTTTTGGC ACCAAAATCA ACGGGACTTT CCAAAATGTC GTAATAACCC  841 CGCCCCGTTG ACGCAAATGG GCGGTAGGCG TGTACGGTGG GAGGTCTATA TAAGCAGAGC  901 TCGTTTAGTG AACCGTCAGA ATTAAGCTTG CGGCCGCGAA TTCATCGATA GATCTGATAT  961 CGGTACCAGT CGACTCTAGA GGATCCCGGG CTGACTACAA AGACCATGAC GGTGATTATA 1021 AAGATCATGA CATCGACTAC AAGGATGACG ATGACAAGTA GTGATCCCGG GTGGCATCCC 1081 TGTGACCCCT CCCCAGTGCC TCTCCTGGCC CTGGAAGTTG CCACTCCAGT GCCCACCAGC 1141 CTTGTCCTAA TAAAATTAAG TTGCATCATT TTGTCTGACT AGGTGTCCTT CTATAATATT 1201 ATGGGGTGGA GGGGGGTGGT ATGGAGCAAG GGGCAAGTTG GGAAGACAAC CTGTAGGGCC 1261 TGCGGGGTCT ATTGGGAACC AAGCTGGAGT GCAGTGGCAC AATCTTGGCT CACTGCAATC 1321 TCCGCCTCCT GGGTTCAAGC GATTCTCCTG CCTCAGCCTC CCGAGTTGTT GGGATTCCAG 1381 GCATGCATGA CCAGGCTCAG CTAATTTTTG TTTTTTTGGT AGAGACGGGG TTTCACCATA 1441 TTGGCCAGGC TGGTCTCCAA CTCCTAATCT CAGGTGATCT ACCCACCTTG GCCTCCCAAA 1501 TTGCTGGGAT TACAGGCGTG AACCACTGCT CCCTTCCCTG TCCTTCTGAT TTTAAAATAA 1561 CTATACCAGC AGGAGGACGT CCAGACACAG CATAGGCTAC CTGGCCATGC CCAACCGGTG 1621 GGACATTTGA GTTGCTTGCT TGGCACTGTC CTCTCATGCG TTGGGTCCAC TCAGTAGATG 1681 CCTGTTGAAT TGGGTACGCG GCCAGCTTGG CTGTGGAATG TGTGTCAGTT AGGGTGTGGA 1741 AAGTCCCCAG GCTCCCCAGC AGGCAGAAGT ATGCAAAGCA TGCATCTCAA TTAGTCAGCA 1801 ACCAGGTGTG GAAAGTCCCC AGGCTCCCCA GCAGGCAGAA GTATGCAAAG CATGCATCTC 1861 AATTAGTCAG CAACCATAGT CCCGCCCCTA ACTCCGCCCA TCCCGCCCCT AACTCCGCCC 1921 AGTTCCGCCC ATTCTCCGCC CCATGGCTGA CTAATTTTTT TTATTTATGC AGAGGCCGAG 1981 GCCGCCTCGG CCTCTGAGCT ATTCCAGAAG TAGTGAGGAG GCTTTTTTGG AGGAATTGAT 2041 CAGCTTGGGA TCTGATCAAG AGACAGGATG AGGATCGTTT CGCATGATTG AACAAGATGG 2101 ATTGCACGCA GGTTCTCCGG CCGCTTGGGT GGAGAGGCTA TTCGGCTATG ACTGGGCACA 2161 ACAGACAATC GGCTGCTCTG ATGCCGCCGT GTTCCGGCTG TCAGCGCAGG GGCGCCCGGT 2221 TCTTTTTGTC AAGACCGACC TGTCCGGTGC CCTGAATGAA CTGCAGGACG AGGCAGCGCG 2281 GCTATCGTGG CTGGCCACGA CGGGCGTTCC TTGCGCAGCT GTGCTCGACG TTGTCACTGA 2341 AGCGGGAAGG GACTGGCTGC TATTGGGCGA AGTGCCGGGG CAGGATCTCC TGTCATCTCA 2401 CCTTGCTCCT GCCGAGAAAG TATCCATCAT GGCTGATGCA ATGCGGCGGC TGCATACGCT 2461 TGATCCGGCT ACCTGCCCAT TCGACCACCA AGCGAAACAT CGCATCGAGC GAGCACGTAC 2521 TCGGATGGAA GCCGGTCTTG TCGATCAGGA TGATCTGGAC GAAGAGCATC AGGGGCTCGC 2581 GCCAGCCGAA CTGTTCGCCA GGCTCAAGGC GCGCATGCCC GACGGCGAGG ATCTCGTCGT 2641 GACCCATGGC GATGCCTGCT TGCCGAATAT CATGGTGGAA AATGGCCGCT TTTCTGGATT 2701 CATCGACTGT GGCCGGCTGG GTGTGGCGGA CCGCTATCAG GACATAGCGT TGGCTACCCG 2761 TGATATTGCT GAAGAGCTTG GCGGCGAATG GGCTGACCGC TTCCTCGTGC TTTACGGTAT 2821 CGCCGCTCCC GATTCGCAGC GCATCGCCTT CTATCGCCTT CTTGACGAGT TCTTCTGAGC 2881 GGGACTCTGG GGTTCGAAAT GACCGACCAA GCGACGCCCA ACCTGCCATC ACGAGATTTC 2941 GATTCCACCG CCGCCTTCTA TGAAAGGTTG GGCTTCGGAA TCGTTTTCCG GGACGCCGGC 3001 TGGATGATCC TCCAGCGCGG GGATCTCATG CTGGAGTTCT TCGCCCACCC CGGGCTCGAT 3061 CCCCTCGCGA GTTGGTTCAG CTGCTGCCTG AGGCTGGACG ACCTCGCGGA GTTCTACCGG 3121 CAGTGCAAAT CCGTCGGCAT CCAGGAAACC AGCAGCGGCT ATCCGCGCAT CCATGCCCCC 3181 GAACTGCAGG AGTGGGGAGG CACGATGGCC GCTTTGGTCG ACCCGGACGG GACGCTCCTG 3241 CGCCTGATAC AGAACGAATT GCTTGCAGGC ATCTCATGAG TGTGTCTTCC CGTTTTCCGC 3301 CTGAGGTCAC TGCGTGGATG GAGCGCTGGC GCCTGCTGCG CGACGGCGAG CTGCTCACCA 3361 CCCACTCGCC AAGCTGGAAC CGTAAAAAGG CCGCGTTGCT GGCGTTTTTC CATAGGCTCC 3421 GCCGATCATA ATCAGCCATA CCACATTTGT AGAGGTTTTA CTTGCTTTAA AAAACCTCCC 3481 ACACCTCCCC CTGAACCTGA AACATAAAAT GAATGCAATT GTTGTTGTTA ACTTGTTTAT 3541 TGCAGCTTAT AATGGTTACA AATAAAGCAA TAGCATCACA AATTTCACAA ATAAAGCATT 3601 TTTTTCACTG CATTCTAGTT GTGGTTTGTC CAAACTCATC AATGTATCTT ATCATGTCTG 3661 GATCAATTCC CTATAGTGAG TCGTATTAAA TTCGTAATCA TGTCATAGCT GTTTCCTGTG 3721 TGAAATTGTT ATCCGCTCAC AATTCCACAC AACATACGAG CCGGAAGCAT AAAGTGTAAA 3781 GCCTGGGGTG CCTAATGAGT GAGCTAACTC ACATTAATTG CGTTGCGCTC ACTGCCCGCT 3841 TTCCAGTCGG GAAACCTGTC GTGCCAGCTG CATTAATGAA TCGGCCAACG CGCGGGGAGA 3901 GGCGGTTTGC GTATTGGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT GCGCTCGGTC 3961 GTTCGGCTGC GGCGAGCGGT ATCAGCTCAC TCAAAGGCGG TAATACGGTT ATCCACAGAA 4021 TCAGGGGATA ACGCAGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC CAGGAACCGT 4081 AAAAAGGCCG CGTTGCTGGC GTTTTTCCAT AGGCTCCGCC CCCCTGACGA GCATCACAAA 4141 AATCGACGCT CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA CCAGGCGTTT 4201 CCCCCTGGAA GCTCCCTCGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC CGGATACCTG 4261 TCCGCCTTTC TCCCTTCGGG AAGCGTGGCG CTTTCTCATA GCTCACGCTG TAGGTATCTC 4321 AGTTCGGTGT AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC CGTTCAGCCC 4381 GACCGCTGCG CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG ACACGACTTA 4441 TCGCCACTGG CAGCAGCCAC TGGTAACAGG ATTAGCAGAG CGAGGTATGT AGGCGGTGCT 4501 ACAGAGTTCT TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGAACAGT ATTTGGTATC 4561 TGCGCTCTGC TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGTTG GTAGCTCTTG ATCCGGCAAA 4621 CAAACCACCG CTGGTAGCGG TGGTTTTTTT GTTTGCAAGC AGCAGATTAC GCGCAGAAAA 4681 AAAGGATCTC AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA GTGGAACGAA 4741 AACTCACGTT AAGGGATTTT GGTCATGAGA TTATCAAAAA GGATCTTCAC CTAGATCCTT 4801 TTAAATTAAA AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC TTGGTCTGAC 4861 AGTTACCAAT GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTCAGCGA TCTGTCTATT TCGTTCATCC 4921 ATAGTTGCCT GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT ACCATCTGGC 4981 CCCAGTGCTG CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT ATCAGCAATA 5041 AACCAGCCAG CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC CGCCTCCATC 5101 CAGTCTATTA ATTGTTGCCG GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA TAGTTTGCGC 5161 AACGTTGTTG CCATTGCTAC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTTGG TATGGCTTCA 5221 TTCAGCTCCG GTTCCCAACG ATCAAGGCGA GTTACATGAT CCCCCATGTT GTGCAAAAAA 5281 GCGGTTAGCT CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAGTA AGTTGGCCGC AGTGTTATCA 5341 CTCATGGTTA TGGCAGCACT GCATAATTCT CTTACTGTCA TGCCATCCGT AAGATGCTTT 5401 TCTGTGACTG GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG GCGACCGAGT 5461 TGCTCTTGCC CGGCGTCAAT ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC TTTAAAAGTG 5521 CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC GCTGTTGAGA 5581 TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT TACTTTCACC 5641 AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG AATAAGGGCG 5701 ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG CATTTATCAG 5761 GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA ACAAATAGGG 5821 GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGCGC CCTGTAGCGG CGCATTAAGC 5881 GCGGCGGGTG TGGTGGTTAC GCGCAGCGTG ACCGCTACAC TTGCCAGCGC CCTAGCGCCC 5941 GCTCCTTTCG CTTTCTTCCC TTCCTTTCTC GCCACGTTCG CCGGCTTTCC CCGTCAAGCT 6001 CTAAATCGGG GGCTCCCTTT AGGGTTCCGA TTTAGTGCTT TACGGCACCT CGACCCCAAA 6061 AAACTTGATT AGGGTGATGG TTCACGTAGT GGGCCATCGC CCTGATAGAC GGTTTTTCGC 6121 CCTTTGACGT TGGAGTCCAC GTTCTTTAAT AGTGGACTCT TGTTCCAAAC TGGAACAACA 6181 CTCAACCCTA TCTCGGTCTA TTCTTTTGAT TTATAAGGGA TTTTGCCGAT TTCGGCCTAT 6241 TGGTTAAAAA ATGAGCTGAT TTAACAAAAA TTTAACGCGA ATTTTAACAA AATATTAACG 6301 CTTACAATT