乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究

保存条件 ：低温运输

保质期 ：长期

英文名 ：Bovine Serum Albumin, Acetylated

库存 ：613

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究的品牌：百奥莱博，是优质的蛋白质研究产品，用于生化科研试验，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多乙酰化牛血清白蛋白等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究
品牌：百奥莱博
英文名：Bovine Serum Albumin, Acetylated
规格：400μL
编号：BTN131017
乙酰化牛血清白蛋白可以用作酶的稳定剂或作为一种载体蛋白。本产品为浓度为它是利用经过改良的Gonzalez等的方法制备的，并通过去离子水充分透析除去杂质，无DNA酶及RNA酶活性。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

除乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究外，我公司正在打折促销以下产品：

·大肠杆菌DH10B电击感受态细胞
编号：BTN160901
英文名称：E.coli DH10B Electroporation-Competent Cell
规格：50μL×5
 本电击感受态细胞只能用于电击转化，不能用于热激转化。DH10B菌株来源于MC1061菌株，mcrA、mcrBC 及mrr突变使DH10B菌株适合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA(无论真核生物还是原核生物的基因组DNA 都能被高效的转入DH10B中)。recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。φ80dlacZΔM15 标记的存在使DH10B可用于蓝白斑筛选，rpsL 赋予其链霉素抗性。DH10B电击感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。本感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19质粒检测，转化效率>1010cfu/μg。
 菌株基因型为：[F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1endA1 araD139 Δ(ara，leu)7697 galE15 galK λ- rpsL nupG。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC培养基等。

使用方法：
1. 将0.1 cm的电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上5分钟，待其沥干水分，正置5分钟，使乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面0.5 cm以方便盖上杯盖，冰中静置5分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的DH10B电击感受态细胞插入冰中5分钟，待其融化，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP 管底轻轻混匀，避免产生气泡，立即插入冰中。(注：对于质粒，测定转化效率使用1μl 10 pg/μL的对照质粒pUC19；对于连接产物，请用乙醇沉淀DNA后加入适量TE缓冲液(10mM Tris HCl，pH7.5; 1mM EDTA)重悬，DNA浓度不超过100 ng/μL，体积不超过5μL/50μL感受态。)
3. 用 200μl 枪头(用刀切除0.5 cm 枪尖)将感受态-DNA 混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4.启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=2.4 kV(此为BioRad电转仪推荐参数，也可按所用电转仪推荐的参数操作)，将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 向电击杯中加入700μL 不含抗生素的无菌培养基 SOC.，混匀后转移到空EP 管中，37℃，200rpm 复苏60分钟。
6. 5000rpm离心一分钟收菌，重悬后取100-200μL 涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。平板上(因菌量较大，若全部涂板请选用直径15cm培养皿2-5个)。将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少13小时。

注意事项：
1. 加入DNA时体积不应大于感受态体积的1/10。
2.电击感受态细胞加入电击杯应避免产生气泡，气泡会增加弧光放电风险。
3. 当 DNA 不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
4.电击杯里的离子可增加溶液的电导，增大在含有细胞和DNA的溶液中产生电流和弧光放电的风险。
5. 若转化大质粒或想获得较高转化效率，推荐使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转化效率下降一个数量级。
6. 对于连接产物转化，最好转化前乙醇沉淀DNA后用适量TE缓冲液(10mM Tris HCl,pH7.5; 1mM EDTA)重悬产物，保证DNA浓度不超过100 ng/μL。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化效率，增加弧光放电的风险。
7. 混入质粒时应轻柔操作，吸取感受态细胞时避免用力过猛，以免剪切力过大损伤细胞膜，降低转化效率。
8.转化高浓度的质粒或连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。
9.电击感受态细胞最好保存在-80℃以下，高于-80℃超期储存会导致转化效率会下降。


乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究关键词：BTN131017,Bovine Serum Albumin, Acetylated,乙酰化牛血清白蛋白

蒽酮 Sulfamethazine 90-44-8
ARB12443 大鼠骨粘连蛋白(ON)含量测试 Rat osteonectin,on ELISA KIT
3-羟基-1,2,3-*并三嗪-4(3H)-酮 D-Galactose 28230-32-2
BTN131205 WGA糖蛋白分离试剂盒 Glycoprotein Isolation Kit(WGA)
130-22-3 茜素红 Alizarin red
ARB11849 人凝血酶原(PT)Elisa分析 Human prothrombin,pt ELISA KIT
5328-37-0 L-阿拉伯糖 L-Arabinose
曲拉通x-100 Sodium 1-hexanesulfonate 9002-93-1
BL0285 MEM/EBSS
草酸亚铁二水合物 Linoleic acid 6047-25-2
987-65-5 三磷酸腺苷二* ATPNa2
ARB11378 人前病毒整合位点1(PIm1)Elisa定量检测 Human proviral integRation site 1,pim1 ELISA KIT
HC0108 三道定时器
ARB11462 人胰岛细胞抗体(ICA)酶标法分析 Human islet cell antibody,ica ELISA KIT
L-酪*酸甲酯盐*(代"酸")盐 DNase Ⅱ 3417-91-2
73049-73-7 胰蛋白胨 Tryptone
ARB11072 人软骨寡聚基质蛋白(COMP)Elisa分析 Human cartilage oligomeric matrix protein,comp ELISA KIT
F030610 FITC标记山羊抗小鼠IgM抗体 Goat Anti-Mouse IgM*FITC
乙酰化牛血清白蛋白 蛋白质研究关键词：BTN131017,Bovine Serum Albumin, Acetylated,乙酰化牛血清白蛋白


·酪蛋白溶液(PBS)
编号：BTN131105B
英文名称：Casein Blocking Solution(PBS)
规格：250mL
即用型酪蛋白(1%)用于封闭非特异性位点。
A型：溶于TBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。
B型：溶于PBS的Hammarsten级酪蛋白，Kathon防腐剂，pH7.4。可用于在使用牛奶封闭背景高时作为替代品使用。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·柱式动物RNA大量提取试剂盒
编号：BTN80901
英文名称：Animal RNA Column large-scale extraction kit
规格：5次
本试剂盒是柱式动物RNA提取试剂盒(BTN71201)的大提升级产品，可用于从各种动物组织(包括白细胞)中大规模快速提取总RNA。跟柱式动物RNA提取试剂盒相比，其主要特点是：
1.大规模提取，一次最大可以提取到80-100μg的动物总RNA。
2. 操作简单快速，整个过程只需要不到二十分钟(对一个样品而言)。
3. RNA 纯度更高，OD260/OD280一般在2.0左右。
4.一般不含用电泳可以检测到的基因组DNA污染。
5.适用于培养细胞、大部分动物组织和部分植物组织。
6. 得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern杂交、cDNA合成等实验。

试剂盒组成：

 

成分	5T
溶液A	50ml
溶液B	50ml
离心吸附柱	5套
通用洗柱液	100ml
RNA 洗脱液	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将1-2 g左右剪切好的动物组织放入50mL塑料离心管中，加10mL溶液A，用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，建议组织的使用量不要超过50mg/mL 裂解液，否则十分容易产生DNA污染。
2. 加入0.2倍体积的自备*仿(10mL溶液A需2mL*仿)，振荡器上充分振荡混均30秒。
3. 5000-7000rpm室温离心3～5分钟。
4. 将上清液(约6-7mL的无色透明水相，有时水相比重大时，水相在下层，有机相即蓝相在上层，吸取时应吸取透明水相)转移到一个干净的50mL塑料离心管中。注意：离心后下层有机相和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下少许上清液不取。同时吸取上清时最好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的丝状DNA。
5. 加入等体积的溶液B，充分颠倒混匀。加入溶液B后，溶液为乳白色。
6. 将溶液转移到离心吸附柱中，5000-7000rpm室温离心1分钟，弃穿透液。
7. 加10mL 通用洗柱液到离心吸附柱中，室温离心1分钟，弃收集管中的穿透液。一次洗涤一般足够去除杂质。
8. 加10mL 通用洗柱液，室温离心1分钟，弃穿透液。此步可以省略。
9.室温5000-7000rpm离心2分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响RNA的使用。
10. 将离心吸附柱转移到一自备的RNase-free 收集管中，加入1mL RNA 洗脱液。
11.室温5000-7000rpm离心2分钟，离心管中溶液即为RNA样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
12. 重复10-11 步一次，大提离心吸附柱吸附能力较强，一般第二次洗脱能洗脱较第一次洗脱更多的RNA。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。
14. RNA产量产率测定：将5-10μl RNA 溶于TE缓冲液中(pH在7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1OD260 RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
15. RNA 纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1 之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

疑难解答：
Q：上样孔里的红色荧光物一定是DNA污染吗？
A：不是。用TAE或TBE电泳液和非变性胶电泳RNA时容易产生此现象，初步研究发现大部分红色荧光物是变性不充分的单链RNA通过碱基互补或通过硼*(代"酸")络合(如果使用TBE作电泳液的话)形成的复合物，加RNase处理后，这些红色荧光物(RNA)一般会消失。为避免此现象，建议最好使用甲醛变性胶电泳和RNA专用上样液(如RNA上样液)。
Q：如何确认和去处除污染的基因组DNA？
A：如果怀疑有DNA污染，可以用RNase处理RNA样品，然后再电泳。如果上样孔里的红色荧光物不消失，则表示是基因组DNA污染。进一步确认可以使用PCR扩增法。去除污染的DNA可以使用非酶的DNA去除剂DNA Scavenger或RNase-free DNase，由于RNase-free DNase一般都有残留的RNase污染，所以必须严格按照厂家提供的使用说明书进行操作。

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