基因克隆、载体构建

基因克隆、载体构建

价格: 询价

产品详情

相关推荐

欣百诺在分子生物学实验及重组蛋白制备方面都有着丰富的经验,以重组蛋白制备为核心,为客户提供可靠的分子生物学技术服务,主要包括:基因合成、基因克隆、载体构建、定点突变(单点及多点突变)、DNA操作(片段缺失及拼接等)及质粒大量制备。

·基因克隆、载体构建——步骤 1. 表达系统选择及方案设计(此项服务免费)
根据客户所需的要求,推荐最适合的表达系统(大肠杆菌/酵母/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达系统)。
根据客户选择的表达系统,推荐密码子优化方案。
设计最佳的表达载体构建(是否融合表达、是否添加Tag等)及相应的蛋白纯化方案
提供客户:各种建议方案
时间:1~3工作日

·基因克隆、载体构建——步骤2. 获取目标基因DNA序列
从基因库中搜索目标蛋白的cDNA序列。
根据选定的表达系统对cDNA进行密码子优化。
合成设计好的基因序列或通过基因克隆的方式获得基因序列。
提供客户:目标基因(在T载体或常规克隆载体上)及测序报告
时间: 2~3周

·基因克隆、载体构建——步骤3. 表达载体构建
选定的标签序列/Tag (可选用的Tag见下表)按同一读码框融合于标基因的5’,3’端(亦可融合在基因编码序列中,融合位置需专门设计),也可利用载体上自带的标签序列而无需另外添加。

 
标签序列/Tag列表
Taq名称  用途
HIS 亲和纯化
GST 亲和纯化
MBP 亲和纯化
Nus 增加蛋白可溶性
trxA 提高蛋白表达量
Myc 表达检测
FLAG 表达检测
HA 表达检测
GFP等荧光蛋白 表达检测
将目标基因亚克隆到合适的表达质粒上。
测序验证构建质粒的准确性。
可提供的表达载体(若需特殊的表达载体或启动子序列,需由客户提供):

大肠杆菌表达体系载体
Expression Vector  Promoter  载体所含Tag
pET3a, pET11a, pET24a T7/ac None or T7 Tag
pET32a T7/ac TRX & HIS
pET41a T7/ac GST & HIS
pET22b, pET25b, pET26b T7/ac Secret
pET28a, pET15b, pRSETb T7/ac HIS
pET50b, pET43a T7/ac Nus, HIS
pPEPTIDE T7/ac HIS
pMAL-c2x T7/ac MBP
pGEX4T, pGEX5X, pGEX6P T7/ac GST
pQE30 T5 HIS
pTrcHisB Trc T7, HIS
pTWIN T7/ac Intein, CBD
pBV220 PRPL None
     

酵母表达体系载体
Expression Vector  Promoter  载体所含Tag
pPICZα AOX1  
pPIC9K AOX1  
PGAPZα GAP  
pYES2/CT GAL1  
     

昆虫细胞表达体系载体
Expression Vector  Promoter  载体所含Tag
Bacmid DNA    
     

哺乳动物细胞表达体系载体
Expression Vector  Promoter  载体所含Tag
pcDNA3.1 CMV  
pcDNA4.0 CMV  
EGFP CMV EGFP
提供客户:正确构建的重组表达质粒,含重组质粒的DH5α菌株及测序报告。
时间:1周
 
·基因克隆、载体构建——步骤4. 质粒大规模柱纯化服务
我们采用国外进口的DNA纯化填料,通过柱纯化方式纯化提取质粒,可为客户提供高纯度质粒,并可根据需求进行去内毒素处理。可对质粒进行大规模柱纯化,提供客户1mg至克级以上的纯化质粒。
提供客户:纯化质粒,对于要求去内毒素的质粒提供鲎试剂检测报告。
时间:1周

苏州近岸蛋白质科技股份有限公司

品牌商

实名认证

钻石会员

入驻年限:13年

联系人:客服

地址:上海

电话联系

立即询价

换一个