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小胶质细胞特异性抗体
兔源Iba1抗体，无标签
★本产品可提供免费试用装★ 试用装规格：10μL 试用装编号：013-19749 |
Iba 1是在巨噬细胞/小胶质细胞中特异性表达的分子量为17,000的钙结合蛋白。近来小胶质细胞备受关注，除了在神经营养/神经保护中起作用外，也已被证实通过产生NO，TNF-α和IL-1β对神经造成损伤。
该产品是与小胶质细胞特异性反应的兔多克隆抗体，适用于与星形胶质细胞特异性抗GFAP单克隆抗体进行双染色。
◆特点
● 抗原：对应于Iba1的C末端的合成肽
● 形式：TBS溶液（1 mg/mL）
● 纯化：兔抗血清的抗原亲和层析纯化
● 特异性：对小胶质细胞和巨噬细胞具有特异性，但不与神经元和星形胶质细胞发生交叉反应。
与人类，小鼠大鼠Iba1反应。
● 用法：1. 抗Iba1，兔（免疫细胞化学）适用于免疫细胞化学。1-2 μg/mL使用
2. 抗Iba1，兔（用于Westernblotting）适合于Western blotting（免疫印迹）。
0.5-1 μg/mL使用。
◆应用
大鼠原代混合培养细胞双染色和相同视野的相位图像
◆免疫印迹实验
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Lane 1. Iba1 protein (10 ng) 2. 大鼠小胶质细胞 (10 µg) 3. 大鼠神经元 (10 µg) 4. 大鼠大脑皮层 (150 µg)
■ 实验条件 SDS-PAGE：5.5 % stacking gel, 12.5 % running gel, 100V Blocking：3 % 脱脂奶粉/TBS ，1 h，室温 一抗：抗Iba1抗体(1/1000) ，3 % 脱脂奶粉/TTBS，Overnight，4℃ 二抗：过氧化物酶标记抗兔IgG（1/5000），3 % 脱脂奶粉/TTBS，1 h，室温 |
数据提供：国立研究开发法人 国立精神・神经医疗研究中心 佐栁老师、一戸老师、高坂老师
◆实验步骤
a）石蜡切片
1. 脱蜡
100％二甲苯10分钟，2次
⇓
100％乙醇5分钟，2次
⇓
80％乙醇5分钟
⇓
70％乙醇5分钟
⇓
dH2O，5分钟，2次
2. 用0.01M PBS洗涤，2次
3. 在0.3％H2O2的甲醇溶液中孵育30分钟
4. 用0.01M PBS洗涤，3次
5. 室温（RT）下用封闭缓冲液（1.5％正常山羊血清和0.001M PBS的1％BSA）孵育2小时。
6. 4℃下在封闭缓冲液中与抗Iba1抗体（0.5 μg/mL）（Wako目录号019-19741）孵育过夜。
7. 用0.01M PBS洗涤，3次。
8. 与生物素化的抗兔IgG抗体（1:200）在封闭缓冲液中室温孵育1小时。
9. 用0.01M PBS洗涤，3次。
10. 室温下与Elite ABC试剂（0.01M PBS中的试剂A（1:50）和试剂B（1:50））孵育1小时。
11. 用0.01M PBS洗涤，3次
12. 在过氧化物酶溶液中孵育（0.05M Tris缓冲液的0.01％过氧化氢和0.05％DAB）
b）冰冻切片
冷冻的小鼠脑组织或培养的细胞应用4％多 聚甲醛-PBS灌注固定。然后制备组织切片。制备后，将组织切片和培养的细胞用抗Iba1抗体免疫染色。
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◆产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 产品规格 | 产品等级 |
| 019-19741 | Anti Iba1, Rabbit(for Immunocytochemistry) 抗Iba1，兔（免疫细胞化学） |
50 μg | 免疫化学 |
| 016-20001 | Anti Iba1, Rabbit (for Western blotting) 抗Iba1，兔（用于免疫印迹） |
50 μg | 免疫化学 |
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