菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书

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品牌:上海一研

货号:EY-0789

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注册证号 :详见说明书

保存条件 :在-20℃或-80℃可长期保存

保质期 :详见说明书

英文名 :菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书

库存 :28

供应商 :上海一研

CAS号 :详见说明书

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
1、RNA纯化系列产品
2、DNA纯化系列产品
3、电泳及回收系列产品
4、探针标记及检测系列产品
5、核酸扩增系列产品
6、克隆表达系列产品
7、基因组研究系列产品
8、蛋白质研究系列产品
9、细胞生物学研究系列产品
10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书技术优势
1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书注意事项:
1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书详细介绍:

菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书操作步骤:
1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
生物素标记组蛋白H3多肽(氨基:1-21)    Biotinylated Histone H3 Peptide (residues 1-21) (100 ul)
Z-IETD-FMK, Caspase-8抑制剂(氟基酮)    Z-IETD-FMK
Tovok    BIBW2992 (Tovok)
S)-4,11-diethyl-3,4,12,14-tetrahydro-4-hydroxy-3,14-dioxo1H-pyrano[3’,4’:6,7]-indolizino[1,2-b]quinolin-9-yl-[1,4’biperidine]-1’-carboxylate, Hydrochloride    Irinotecan Hydrochloride
N-[(2R)-2-(Hydroxamidocarbonylmethyl)-4-methylpentanoyl]-L-tryptophan methylamide; Galardin; Ilomastat    GM 6001
DFOM, Deferoxamine methanesulfonate salt, Desferrioxamine mesylate salt    Deferoxamine Mesylate
2,4-Difluoro-N-{2-(methyloxy)-5-[4-(4-pyridazinyl)-6-quinolinyl]-3-pyridinyl}benzenesulfonamide    GSK-2126458
OA    Okadaic acid
DZNep; NSC 617989; 5R-    3-Deazaneplanocin A
2’-(4-Ethoxyphenyl)-5-(4-methyl-1-perazinyl)-2,5’-bi-1H-benzimidazole trihydrochloride, HOE 33342, Hoechst 33342, bisBenzimide    bisBenzimide H 33342
4-(6-{4-[3-(4-Hydroxymethyl-phenyl)-ureido]-phenyl}-4-morpholin-4-yl-pyrazolo[3,4-d]pyrimidin-1-yl)-peridine-1-carboxylic acid methyl ester    mTOR Inhibitor, WYE-28
Sulfosuccinimidyl 6-(3’-[2-pyridyldithio]-propionamido)hexanoate    Sulfo-LC-SPDP
Ac- Lys(Ac)-AMC    HDAC Substrate, Fluorogenic
N-(7-cyano-6-(4-fluoro-3-(2-(3-(trifluoromethyl)phenyl)acetamido)phenoxy)benzo[d]thiazol-2-yl)cyclopropanecarboxamide    TAK-632
(S)-3-(4-methoxyphenyl)-N-((S)-1-((R)-2-methyloxiran-2-yl)-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl)-2-((S)-2-(2-morpholinoacetamido)propanamido)propanamide; PR-957    ONX-0914
4-    AM580
CV 104; Covitol 1210; NSC 173849; d-α-Tocopherol Acid Succinate; α-Vitamin E Succinate; Vitamin E d-α-Tocosuccinate    α-Tocopheryl succinate
Mouse IgG, 100 ug    Mouse IgG
Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, pH – 5.2    Bovine Serum Albumin – Cohn Fraction V, pH – 5.2Hepa 1-6, 小鼠肝细胞苏云金芽胞杆菌加拿大亚种 Bacillus thuringiensis subsp. canadensis
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeHGC-27(人胃细胞)
香菇 Lentinula edodes酸球菌 Lactococcus lactis
CaCO2/结肠细胞苜蓿中华根瘤菌国产
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiaeSGC7901(人胃细胞)
小单孢菌 Micromonospora sp.戊糖杆菌 Lactobacillus pentosus
人颅盖造骨细胞完全培养基毛柄金钱菌(金针菇) Flammulina velutipes
人间充质干细胞-脐带醋酸钙不动杆菌 Acinetobacter calcoaceticus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna挪威假丝酵母 Candida norvegensis
801-D (人巨细胞性肺细胞)根瘤菌 Rhizobium sp.
菌落 PCR 试剂盒 2.050 次说明书炭黑曲霉 Aspergillus carbonariusPA319(人大肠细胞)
费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii赭曲霉 Aspergillus ochraceus
kasumi-1, 人白血病细胞株双孢蘑菇 Agaricus bisporus
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae胰蛋白酶-EDTA(含10mL 酶解缓冲液)
二色小单孢菌 Micromonospora bicolor小鼠骨髓基质细胞完全培养基
非洲爪蟾胚胎细胞植物杆菌 Lactobacillus plantarumACTE1
热带假丝酵母 Candida tropicalis费氏中华根瘤菌 Sinorhizobium fredii
冬虫夏草 Cordyceps sinensisMPC-11(小鼠浆细胞瘤)
小鼠小梁网细胞完全培养基少根根霉 Rhizopus arrhizus
人主动脉平滑肌细胞完全培养基光帽鳞伞 Pholiota nameko
葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum人咽鳞细胞

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