Plus Mix 高效率DNA扩增预混液 (P2031/P2032)

保存条件 ：-20℃冻存

保质期 ：2年

库存 ：大量

供应商 ：东盛生物

规格 ：1ml/1ml*5

产品组分

P2031

2×Plus Mix                1ml    1支

超纯水                       1ml    1支

 

P2032

 2×Plus Mix            1ml    1支×5

超纯水                    1ml    1支×5

注：本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。

 

保存条件

  -20℃保存1年。

 请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。

 

产品说明

    Plus Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Taq Plus DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需在扩增

体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染（加样次数减少）。同时，由于体系内含有优化剂与增强剂，能够显著增

强PCR扩增的灵敏度。扩增产物具有两种末端：平末端与3’-dA。

Taq Plus DNA聚合酶是Taq DNA聚合酶与Pfu DNA聚合酶的独特比例混合物。其保真性是Taq DNA聚合酶的4倍，扩增片段的长度可达20 kb（简单模板）。在扩增复杂模板（如

GC-rich或重复序列）时，Taq Plus DNA聚合酶的扩增效率高于Taq DNA聚合酶，可用于复杂模板的PCR扩增。

 

产品特点

使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。

快速、高效：减少加样步骤，节约时间。

可重复：降低污染和加样错误风险。

 

产品用途

复杂模板PCR扩增

高通量复杂模板PCR扩增

高重复性复杂模板PCR扩增

制备TA克隆用PCR产物

 

活性定义

    一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

 

质量控制

    相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。

 

2×Plus Mix的组分

  100 mM KCl

  20 mM Tris-Cl

  3 mM MgCl2

  400 mM dNTP混合物

  0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酶

  溴酚蓝等

 

应用举例

注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

 

以λDNA为模板，扩增1kb片段。

λ DNA（2.5 ng/μl）                 1μl

Primer 1（10μM ）                  2μl

Primer 2（10μM）                   2μl

2×Plus Mix                            25μl

dd H2O                        补足至50μl

 

反应条件

95℃              3 min

95℃             30 sec

55~68℃        30 sec    30 Cycles

72℃               1 min

72℃               5 min

 

备注

1  建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

2  Plus Mix的扩增产物有两种末端：平末端和3’-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。

3  模板DNA推荐用量（50 μl PCR反应体系）

    人类基因组DNA       0.1 – 1 μg

    λDNA                 0.5 – 5 ng

    质粒DNA             0.1 – 10 ng

    大肠杆菌DNA         10 – 100 ng