北京现货磁珠法DNA纯化回收试剂厂家直销

保存条件 ：室温(15～30℃)

保质期 ：长期

英文名 ：MagBeads DNA Purification Kit

库存 ：776

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货磁珠法DNA纯化回收试剂厂家直销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京现货磁珠法DNA纯化回收试剂厂家直销
编号：WE0205
产地：国产|进口
规格：5ml|50ml
  本试剂提供了一种简单、快速、高效的核酸纯化方法。该产品可用于二代测序建库时DNA的选择性或非选择性回收，以及PCR产物的纯化回收。MCPure与样品按一定比例混合后，磁珠选择性将核酸吸附。经两步漂洗后，洗脱得到的DNA纯度高，A260/A280的比值在 1.7-1.9之间, A260/A230的比值通常在2.0以上。经该试剂盒纯化得到的DNA适用于PCR，Real-Time PCR， 测序，southern blotting等实验。

试剂盒组成：

 

组份	96次
Buffer KCL	96ml
Buffer KCW1(浓缩液)	72ml
Buffer KCW2(浓缩液)	60ml
Buffer EB	30ml
蛋白酶K	2×25mg
蛋白酶K 储存液	2×1.25ml
Magbeads PN	4ml

自备仪器及试剂：磁力架|80%乙醇|洗脱液：Buffer EB(10 mM Tris-HCl, pH 8.0)；去离子水(pH在7.0-8.0之间)。

产率举例：

片段长度	典型产率
5000 bp	高至90%
1000 bp	高至90%
500 bp	高至80%
200 bp	高至70%

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、冰冻、离心、超声会对MCPure中的磁珠造成不可逆的损害。
2、MCPure中磁珠长期放置后会聚集成团，从而使磁珠表面积减小，降低样品回收得率，使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠。
3、使用前，建议将MCPure涡旋震荡混匀后分装到1.5ml的离心管中，每管分装1mlMCPure。
4、本试剂不适用于纯化回收小于100 bp的DNA片段，如果要回收小于100 bp的DNA片段，建议将MCPure的用量增加到样品体积的4倍。
5、进行DNA的选择性回收时，MCPure对于DNA溶液中的离子浓度较为敏感。不同厂家的二代测序建库试剂得到的接头连接后的DNA溶液以及PCR扩增产物中离子浓度不同，所以用MCPure做DNA选择性回收时,试剂用量有所不同。

操作步骤：
1、涡旋振荡MCPure 20秒，使其彻底混匀为均一溶液。
2、向1.5ml的离心管中加入纯化的DNA溶液。
3、向上一步的离心管中加入2倍样品体积的MCPure，涡旋震荡5秒后室温静置5分钟。
4、将上一步的离心管放于磁力架上，直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
5、保持离心管固定于磁力架上，彻底弃去溶液，期间避免接触磁珠。
6、继续保持离心管固定于磁力架上，向离心管中加入250μl新鲜配置的80%乙醇。
7、保持离心管固定于磁力架上，待悬起的磁珠完全吸附后彻底弃去乙醇。
8、重复步骤6-7两次。
9、保持离心管固定于磁力架上静置放置10分钟，使乙醇完全挥发干净。
10、将离心管从磁力架上取下，加入20-100μl EB(自备)或去离子水，涡旋振荡使磁珠完全重悬于洗脱液中后，室温放置5分钟。
11、将离心管放于磁力架上直至磁珠完全吸附(约需5分钟)。
12、将洗脱液转移至一个新的1.5ml离心管中。此时，可弃去磁珠。

纯化回收得率的计算：
我们建议通过琼脂糖电泳纯化前后的样品进行回收得率的计算。我们不建议通过260 nm处的光吸收值来计算回收得率。因为溶液中单链、双链DNA和dNTP以及一些纯化前的某些杂质在260 nm处都有光吸收，这样在计算回收前样品中DNA浓度时会得到一个假的、虚高的DNA浓度。

储存条件：室温(15～30℃)

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·HRP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
编号：WE0393
英文名称：Goat Anti-Mouse IgG, HRP Conjugated
规格：100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体，特异识别小鼠IgG重链和轻链，检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。酶标记抗体，是一类广泛用于免疫学、分子生物学及临床医学各个分支学科中的免疫化学制剂，具有特异、敏感和安全的特点。

免疫原：小鼠IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：无(叠氮*是HRP抑制剂，抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围：
WB(1：2000-10000)
ELISA(1：2000-20000)
IHC(1：100-200)

·2×BAmp MasterMix(含染料)
编号：WE0106
英文名称：2×BAmp MasterMix(With Dye)
规格：5ml
  BAmp MasterMix由BAmp DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。BAmp DNA Polymerase是一种兼具高扩增效率和高保真性的耐热聚合酶。其主要特点是可以高效扩增长片段DNA，尤其在扩增>10 kb的DNA片段方面，其优势更加明显，所扩增的片段最长可以达到40 kb。该酶具有高度的延伸和校对能力，保真度高于普通Taq酶。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷，可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，重复性好。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。适用于构建基因图谱、序列测定及分子遗传学研究等。

产品组成：

组份	1ml	5ml
2×BAmp MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml
ddH2O	1ml	5×1ml

注意：2×BAmp MasterMix含有BAmp DNA Polymerase,3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BAmp MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	5 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，BAmp DNA Polymerase的扩增效率为2.0 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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