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文献和实验
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保存条件 :低温运输,-20℃保存
保质期 :一年
英文名 :3'-RACE Kit
库存 :大量
供应商 :上海钰博生物科技有限公司
规格 :10次/盒
3'-RACE试剂盒-3'-RACE Kit
产品及特点
研究真核基因的最基础的工作之一就是确定其转录终止位点,目前最通用的方法是3'-RACE法,RACE(Rapid-Amplification of cDNA Ends)是Frohman发明的、通过PCR快速克隆cDNA末端的技术,它在不建立cDNA文库的前提下,利用已知cDNA序列设计引物,通过往两端延伸和扩增获得其3'-端序列。其原理图如下:
3'-RACE试剂盒-3'-RACE Kit使用及效果
先用3'-RACE引物A作为引物将mRNA反转录成cDNA,然后再使用3'-RACE引物B引物和自备的基因专一性引物进行第一轮PCR,再用PCR产物为模板,用3'-RACE引物C和自备的基因专一性巢式引物进行第二轮PCR(巢式PCR),PCR产物即可用于后续试验。
SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml
10%过硫酸铵 1.5ml
30% 丙烯酰胺 (29:1) 100ml
40% 丙烯酰胺 (39:1) 100ml
0.5M DTT 2ml
0.5M DTT 10ml
10% SDS 50ml
TEMED 5ml
1M Tris-HCl,pH6.8 50ml
1.5M Tris-HCl,pH8.8 100ml
Western转膜缓冲液 (20x) 100ml
Western一/二抗稀释液 100ml
Western封闭液(BSA型) 100ml
Western洗涤液 250ml
Western一抗二抗去除液 250ml
BCIP工作液 50mg/ml 100ul
NBT工作液 50mg/ml 100ul
10% Sodium Azide (叠氮钠) 100ml
Protease Inhibitor A(广谱性) 1ml
Protease Inhibitor B(适用于细菌) 1ml
Protease Inhibitor C(适用于哺乳动物) 1ml
Protease Inhibitor D(适用于真菌) 1ml
Protease Inhibitor E(适用于哺乳动物) 1ml
Phosphatase Inhibitor M(广谱性) 1ml
Lysozyme/溶菌酶(>20KU/mg)10mg/ml 1ml
Lysozyme/溶菌酶 50mg/ml 5ml
RNase A (10mg/ml) 1ml
RNase A (100mg/ml) 0.5ml
Proteinase K (20mg/ml) 0.2ml
Proteinase K (20mg/ml) 1ml
DEPC水(DNase、RNase free) 100ml
DEPC水(DNase、RNase free) 500ml
RNase Inhibitor 2000U
TE pH 8.0 100ml
3M NaAc pH5.2 100ml
1M MgCl2溶液 100ml
RNA上样缓冲液(6×) 120ul
DNA上样缓冲液(6×Ⅳ) 1ml
Zoman-Green (EB升级换代产品) 1ml
EB/溴化乙锭(10mg/ml) 1ml
TAE电泳缓冲液(50×) 100ml
TAE电泳缓冲液(50×) 250ml
TAE电泳缓冲液(50×) 500ml
TBE电泳缓冲液(5×) 250ml
TAE电泳缓冲液RNA专用(50×) 100ml
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