免疫学检测服务-IP/Co-IP检测服务

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IP检测服务

ABclonal提供的免疫共沉淀(Co-IP)大致实验流程为:构建目标基因的 质粒,共转细胞,在细胞裂解液中加入抗诱饵蛋白的抗体,孵育后再加入与抗体特异结合的结合于Agarose珠 上的Protein A或G,若细胞中有与兴趣蛋白结合的目的蛋白,就可以形成这样一种复合物:“目标蛋白+诱 饵蛋白+抗诱饵蛋白抗体+Protein A或G”,经变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,复合物又被分开。然后经免疫印迹 或质谱检测目的蛋白。这种方法得到的目的蛋白是在细胞内与兴趣蛋白天然结合的,符合体内实际情况,得 到的结果可信度高。

实验原理


根据现实中免疫共沉淀实验目的的不 同,ABclonal技术人员可协助客户设计实验方案,构建原核或真核表达质粒,利用标签蛋白抗体检测,无需 额外购买或定制抗体,另外我们采用进口的免疫共沉淀试剂盒进行实验,protein A磁珠吸附效率高,我们实 验成功率90%以上。

服务优势


  • 严格规范的SOP,确保实验过程无误。
  • 专业的数据分析,计算出浓度接近样本真实情况。
  • 完整的检测报告,包含真实的原始数据、专业结果分析、实验相关器材。
  • 2000种免费的抗体,专业的服务,为您降低科研成本!

服务承诺


  • 本公司会在最短的时间内快速将实验完成。
  • 本公司会根据总蛋白定量的结果,微调各个样本间浓度差异,高温变性,加入loading buffer,上 样跑胶,以及转膜显色等步骤。
  • 本公司会利用软件对所得胶片进行扫描,用相对定量方法进行定量分析时,要对管家蛋白等参比蛋 白进行同样操作,用所得到的值进行蛋白量的校正,最后求得目的蛋白的相对表达量。
  • 本公司会提供实验报告:包括详细的实验方法及western blot结果的相关图表。
  • 本公司保证检测结果准确、客观、可信,但不能确保一定要得到某特定结果。

客户提供


  • 客户须在实验开始前确保其细胞或组织中有目的蛋白的表达,并提供目的蛋白的相关信 息(蛋白名称、大小等信息),尽可能详细的背景资料,包括蛋白的种属、大小、参考文献等。
  • 诱饵蛋白及目的蛋白的表达质粒,需测序验证,提供测序峰图文件。
  • 如无需ABclonal转染或转化的,则需提供含有诱饵蛋白及目标蛋白的裂解液5ml以上,如果为原 核表达,则需要求蛋白务必为上清表达。
  • 如需使用诱饵蛋白及目标蛋白的特异性抗体检测,则需提供至少20ul以上特异性抗体。依据实验设计提供对 应的诱饵Western blot实验结果及免疫共沉淀WB结果。保留原始的实验曝光胶片以及免疫共沉淀实验报告。
  • 新鲜样品(组织为100-150 mg/样,细胞>107 个/样),若为冻存样品,请于-70 ℃以下保存并自备 液氮以便运输。一抗,标明来源和稀释度,也可让我司代买。
  • CO-IP所需要的目的蛋白的一抗,可自行提供,或在本公司购买相应指标。

技术路线



武汉爱博泰克生物科技有限公司

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