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文献和实验
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服务名称 :腺病毒包装
提供商 :OBiO和元生物
腺病毒包装介绍:
腺病毒(Adenovirus)是目前最高效可靠的重组病毒表达系统之一,可用于在哺乳细胞中瞬时及高水平地表达shRNA或目的蛋白。
腺病毒是一种DNA病毒,具有广泛的细胞和组织感染能力。感染过程剧烈,适于在短时间内进行基因高表达实验。腺病毒的最大优势在于插入片段较长,表达活性强;可以进行扩增操作。
腺病毒包装过程
腺病毒包装中,表达质粒和穿梭质粒共转染293T细胞,待细胞出现CPC状态后,通过收集和过滤细胞裂解物而纯化。
CPE(Cytopathic effect):病毒对组织培养细胞侵染后产生的细胞变性,利用此种病变效应可进行病毒定量。
腺病毒滴度检测:
检测方法:酶联免疫法腺病毒滴度测定,根据计算感染后染成褐色的阳性细胞数,来计算病毒滴度。
实验原理:腺病毒感染细胞后出现CPE效应,可以通过显微镜观察进行判断和计数。
腺病毒包装特点:
1. 宿主范围广。腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。
2. 因腺病毒的感染不依赖细胞周期,故其既可以感染增殖细胞也可以感染非增殖细胞。
3. 腺病毒具有嗜上皮细胞特性,因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞,这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。
4. 病毒滴度高,可用于动物水平的实验。
5. 有较好的生物安全性。腺病毒携带的基因不会整合到宿主细胞基因组中;实验中虽然会有一定机率出现RCA(即复制型腺病毒),但由于大多数成人体内都有针对腺病毒的抗体,所以一般危害不大。
病毒相关技术服务:
和元生物技术(上海)股份有限公司
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