cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)批发

cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)批发

价格: ¥180 - 1930

品牌:百奥莱博

货号:WE0133

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产品详情

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保存条件 :-20℃,避免反复冻

保质期 :长期

英文名 :BalbScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit

库存 :684

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)批发在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。


名称:cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)批发
品牌:百奥莱博
编号:WE0133
产地:国产|进口
规格:100次
英文名:BalbScript gDNA Removal cDNA Synthesis Kit
  本试剂盒是用于去除基因组DNA进行反转录的试剂盒。该试剂盒在42℃,2 min即可除去基因组DNA。同时由于反转录试剂中含有抑制gDNA Eraser的组分,经过 gDNA Eraser处理后的样品可以直接进行逆转录反应合成cDNA。本试剂盒配有新型高效反转录酶BalbScript,新颖突变位点大幅提升酶的转录活性,cDNA第一链合成的效率和产量更高,可利用pg级的总RNA或mRNA合成cDNA第一链。如逆转录产物cDNA用于下游荧光定量检测,可在42℃,15min完成逆转录反应。本试剂盒适用于第一链cDNA的合成和后续的RT-PCR、RT-qPCR、以及全长cDNA文库的构建等。

试剂盒组成

 
组份 25次 100次
gDNA Eraser 12.5μl 50μl
10×gDNA Eraser Buffer 30μl 120μl
BalbScript,200 U/μl 25μl 100μl
5×ScriptRT Buffer 120μl 500μl
Primer Mix 30μl 120μl
RNase-Free Water 1ml 2×1ml


产品特点
1、快速去除基因组:含有去除基因组DNA 的gDNA Eraser,只需2min即可除去基因组DNA。
2、快速逆转录:15分钟即可获得荧光定量PCR模板cDNA第一链合成。
3、灵敏度高:可利用pg级总RNA或mRNA模板合成cDNA第一链。
4、高效的逆转录效率:新颖突变位点大幅提升酶活性能,获得更高产量的cDNA。

注意事项
1、在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套,使用专门的仪器和耗材。
2、逆转录体系配制在冰上进行操作,防止RNA发生降解。试剂盒的酶使用后尽快置于-20 ºC保存,并尽量避免反复冻融。
3、反应体系可倍比放大,10μl反应体系可最大使用1μg总RNA。
4、Primer Mix由Oligo(dT)和Random primer配制而成, 也可根据实验需要选用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer。
5、若起始RNA的量小于50ng,建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号为WE0223。
6、对于二级结构复杂的RNA模板,建议在操作步骤之前,将模板RNA在65℃孵育5分钟立刻置于冰上,短暂离心后进行下一步操作。

操作步骤
将模板RNA在冰上解冻;试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上。使用前将每种溶液涡旋振荡混匀,并经短暂离心后使用。

一、去除基因组DNA反应
1、根据以下表格在冰上配制反应体系,总体积为10μl。为了保证反应液配制的准确性,先按反应数+2的量配制预混体系,然后再分装到每个反应管中,最后加入RNA样品。
试剂 10μl反应体系
10×gDNA Eraser Buffer 1μl
gDNA Eraser 0.5μl
RNA Template 10 pg-1μg
RNase-Free Water up to 10μl

注意:如果总RNA量大于1μg,请按比例扩大反应体系。若起始RNA的量小于50ng,则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin),该产品货号为WE0223。

2、涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、42℃孵育2分钟(室温反应时,可以延长到30分钟)。
4、反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。

二、逆转录反应

1、根据以下表格在冰上配制反应体系,反应液配制请在冰上进行。为了保证反应液配置的准确性,先按数+2的量配制成预混溶液,然后再分装 10μl到每个反应管中,取配制的预混液10μl加入至已完成去基因组的步骤1反应管中。
 
试剂 20μl反应体系
步骤1反应液 10μl
BalbScript,200 U/μl 1μl
Primer Mix 1μl
5×ScriptRT Buffer 4μl
RNase-Free Water 4μl

注意:可根据实验需要可使用Oligo-dT Primer或Gene Specific Primer,建议20μl 反应体系Oligo-dT Primer 50pmol,或Gene Specific Primer 2 pmol。

2、混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
3、cDNA合成反应条件:
1)若下游进行荧光定量PCR检测,42℃孵育15分钟,85℃孵育5分钟。
2)若下游进行普通PCR检测,42℃孵育30-50分钟,85℃孵育5分钟。
注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。
4、反应结束后,短暂离心后置于冰上,再进行后续PCR或荧光定量PCR,如果需要长时间保存,请置于-20℃。
注意:进行Real-time PCR反应时,逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。

储存条件:-20℃,避免反复冻融。
cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)批发
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·RRX标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0382
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, Rhodanmine Red-X Conjugated
规格:100μl
本产品为RRX标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG。使用本产品检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。Rhodamine Red-X(RRX)是近年新开发的一种荧光素,被激发后产生较明亮的红色荧光。它比普通的荧光更加明亮,不容易淬灭,背景更低。由于其发射波长介于Cy2(或FITC)和Cy5中间,且重叠较少,RRX可与Cy2和Cy5一起用于同一样本的多重标记检测。

免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:0.05%叠氮*
荧光团:Rhodamine Red-X,Amax=570; Emax=590
应用范围:对于大多数实验(1:25-100)

·G250蛋白快速染色试剂
编号:WE0290
英文名称:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格:250ml
  该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。

注意事项
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。

操作步骤
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。

实验图例
G250蛋白快速染色试剂
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果

储存条件:-20℃




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