pUC18载体，大肠系列质粒

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供应商 ：乔羽

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    名称：pUC18载体，大肠系列质粒

    供应商：上海乔羽

    适用范围：仅限科研实验，不作临床

    用途：克隆外源基因。

    产地：国产|进口

    规格：5μg

    浓度：250～1,000μg/ml

    贮存溶液：Tris-HCl （pH 8.0） 10 mM EDTA 1mM

    载体类型： 克隆载体



    pUC18是适合于双脱氧法DNA测序的载体，通常运用于重组dna的分子克隆中，首先我们制备大肠杆菌的感受态细胞（能接受外来重组的dna），这种感受态菌株必须不同外来DNA分子发生遗传重组，通常是rec基因缺陷型的突变体，同时它们必须是限制系统缺陷或限制与修饰系统均缺陷的菌株，即具有这三种缺陷（rk mk rec ），同时对氨苄青霉素敏感（ap）。

    pUC18上带有β-半乳糖苷酶基因（lacZ）的调控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 个氨基酸的编码序列，在这个编码区中插有一个多克隆位点，且不影响正常功能，DH5α感受态菌株带有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的编码信息，当puc18载体在正常情况下同感受态菌株融合后，互补表达有活性的β-半乳糖苷酶，称为α-互补现象，当有外源片段插入多克隆位点后，不能产生互补，即细菌不能产生β-半乳糖苷酶活性。在呈色底物X-gal（5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷酶）和诱导物IPTG（异丙基-β-D-硫代半乳糖苷）的存在下，互补产物菌落呈现蓝色，不互补产物菌落呈白色，很容易鉴别，这种筛选方法称为α-互补现象筛选（蓝白斑筛选）。由上可见，puc18载体除了能重组导入外源片段外，在筛选表达过程中还具有重要的作用。

    pUC18载体，大肠系列质粒用途：

    1. 脱氧核糖核酸片段的克隆。

    2. 利用lac promoter进行基因表达。

    3. 使用M13系列引物进行DNA测序。

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