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文献和实验
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保存条件 :-20℃
保质期 :1年
英文名 :Tuner(DE3)
库存 :20
供应商 :康朗生物
规格 :500ul甘油菌
Tuner(DE3)感受态细胞基本信息
出品公司: | ATCC |
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菌株类型: | E.coli |
培养基: | LB培养基 |
生长条件: | 37 ℃, 有氧 |
基因型: | |
抗性: | 无抗 |
质粒转化条件: | 42 ℃热激 |
应用: | 蛋白表达 |
诱导方法: | IPTG |
订购信息
产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
---|---|---|---|
AT2009 | Tuner(DE3) | 500ul甘油菌 |
¥1000.00 |
菌株特点
Tuner系列菌株是LacZY去除的BL21突变菌株,这可以通过细胞培养来调节蛋白表达水平。lac通透酶(lacY)突变使得IPTG能够进入所有的细胞菌内。
不像乳糖或者阿拉伯糖,IPTG是一个可以通过lac通透酶途径进入细胞内的诱导剂。这使得菌株可以使得IPTG的蛋白诱导具有IPTG的浓度依赖性。与 pET系列载体联合使用,可以使得蛋白表达从低表达水平到超高表达水平进行有效调节。蛋白表达水平低的情况下,目的蛋白可能会具有更好的可溶性和生理活 性。
Tuner系列菌株的蛋白表达水平可以通过IPTG浓度进行精确的调节,具有严格的浓度依赖性。
Tuner系列菌株还是lon和ompT蛋白酶缺陷型菌株。
DE3是溶源性的 λDE3, 所以在lacUV5启动子下携带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。
1、安瓿瓶开封:用浸过75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。
2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取0.3--0.5ml适宜的液体培养基,滴入安瓿管内,轻轻振荡,使冻干菌体溶解呈悬浮状。吸取全部菌体悬浮液,移植于1-2支建议的培养基试管中,并在建议的条件下培养。
3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在6-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后,延迟期较长,需要连续两次继代培养才能正常生长
4、复苏后的菌种在传1-2代后使用。
5、暂不启开的安瓿及复苏后需保藏的斜面应于4℃中保藏。
特别注意事项:
l、微生物菌种应保藏于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时问过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染:
3、斜面菌种保藏时间通常为1-2个月,应根据菌种状况及时转接;冻干菌种保藏时间通常为5~10年;
4、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时与我司销售联系或更换新的菌种。
上海康朗生物科技有限公司
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