PAGE凝胶快速制备试剂盒(10%)PAGE Gel Quick Preparation Kit (10%) [可申请试用]

文献支持PAGE凝胶快速制备试剂盒(10%)PAGE Gel Quick Preparation Kit (10%) [可申请试用]

价格: ¥312

品牌:翌圣生物(Yeasen) 品牌认证

货号:20325ES62

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产品详情

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保存条件 :-20℃保存

保质期 :有效期1年

英文名 :PAGE Gel Quick Preparation Kit (10%)

库存 :大量

供应商 :翌圣生物科技(上海)股份有限公司

规格 :125 mini gels


蛋白电泳经常使用聚丙烯-酰胺凝胶(PAGE凝胶)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯-酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯-酰胺(甲叉丙烯-酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒提供了一种快速制备PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备即可配胶,大大简化了制胶过程,此外,本品还具有以下特点:1制胶速度快——最少仅需2 min即可灌制多块凝胶,无需计算所需溶液量,无需稀释;2彩色浓缩胶——浓缩胶呈彩色,为点样提供最大便利,所含颜色配方不影响电泳、染色及转膜等后续应用;3无异味——无需使用TEMED,避免恶臭气味;4稳定性高——试剂盒配套提供的硫酸铵催化剂溶液属改良型APS,其稳定性和催化效能都得到大大提升。5新增功能——无需封闭分离胶,直接添加浓缩胶(熟读配胶步骤)。
本试剂盒所配制凝胶只能用于变性PAGE凝胶电泳,该规格可配制约125mini胶(以0.75 mm厚度胶计算)

产品组分
类别 组分编号 组分名称 产品编号/规格 保存方式
20325ES62125 gels


Part
20325-A 10%-分离胶缓冲液 250 mL 4℃
20325-B 10%-分离胶溶液 250 mL 4℃
20325-C 10%-彩色浓缩胶缓冲液 80 mL 4℃
20325-D 10%-浓缩胶溶液 80 mL 4℃
20325-E 制胶杯 3 4℃
Part 20325-F 20325-F改良型过硫-酸铵溶液 8 mL -20℃

运输与保存方法
冰袋运输, 4保存。其中F组分改良型过硫-酸铵溶液如果长时间不用,需保存于-20℃,有效期12个月。

注意事项
1)建议电泳时电压在100-120V之间,如需要加快电泳速度,可增加至150V
2)灌胶前,务必将凝胶溶液平衡到室温(如放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成。
3)过硫-酸铵溶液(改良型)的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。加入较多量的过硫-酸铵可加快凝胶速度,反之亦然。PAGE凝胶的凝聚速度与温度和过硫-酸铵的用量密切相关。
4)本产品已加入适量TEMED的替代品,如需进一步加快凝胶速度,临配胶前可按需补充适量TEMED
5)胶的凝固与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝固速度越快。
6)彩色浓缩胶在储存过程中可能会产生少量沉淀,属正常现象,请放心使用。
7)改良型过硫-酸铵溶液保存于-20℃。为方便吸取使用,已开盖使用中的过硫-酸铵溶液可置于4℃保存。

使用方法:建议配胶时不要一次性配置太多块胶,避免来不及添加上层液(推荐最多2-3块)
1 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1
2 制胶流程(以一块0.75/ 1.0/ 1.5 mmmini胶为例)
1)取等体积分离胶缓冲液和分离胶溶液混匀,即取两种溶液各2.0/ 2.7/ 4.0 mL
2)往步骤1中的混合溶液中加入35/ 45/ 70 μL的改良型过硫-酸铵溶液(凝固太快可减半过硫-酸铵使用量),充分混匀。
3)将步骤2中的溶液注入制胶玻璃板中。注意加入分离胶后要在2 min内将浓缩胶注入凝胶模具内,且在灌注浓缩胶时要缓慢,防止浓缩胶与分离胶混合在一起。如果个人觉得配置困难,也可改编为自行用乙醇封闭之后再进行配置浓缩胶。
4浓缩胶的配置:取等体积浓缩胶缓冲液和浓缩胶溶液混匀,即取两种溶液各0.5/ 0.75/ 1.0 mL,然后加入10/ 13/ 18 μL的改良型过硫-酸铵溶液,充分混匀。
5)注入制胶玻璃板中,插入梳齿(插胶梳时切勿用力过猛,轻轻插入)。
6)待15 min浓缩胶凝固后,拔去梳齿即可用于电泳。注:请尽量使用新鲜配置的电泳缓冲液。

附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶参考分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度 分离范围(kDa
6%凝胶 70-300
8%凝胶 30-200
10%凝胶 20-80
12.5%凝胶 15-60
15%凝胶 10-45
 
HB200817

翌圣生物科技(上海)股份有限公司

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