GV3101农杆菌电转感受态细胞

库存 ：大量

运输方式 ：干冰运输

产品介绍
GV3101农杆菌电转感受态细胞为农杆菌C58型背景，核基因中含有利福平抗性基因rif。此菌株还携带一种自身转运功能丧失的质粒（disarmed Ti plasmid）。GV3101菌株含有pMP90 (pTiC58DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是TDNA插入植物基因组所必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒还含有Str和Gent抗性基因，赋予GV3101菌株链霉素和庆大霉素抗性。GV3101农杆菌适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。GV3101 电转感受态特别适用于大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率大于10的5次方cfu/μg DNA。 

GV3101农杆菌电转感受态细胞产品储存
-70℃保存，避免反复冻融。 
GV3101 农杆菌电转感受态细胞 目录号：BC308 储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。 组成 BC308-01 GV3101 Electrocompetent cells 20×50μl pCAMBIA2301 (1μg/μl) 1 支 基因型：C58 (rifR ) Ti pMP90 (pTiC58DT-DNA) (StrR /GentR ), Nopaline type 产品介绍： GV3101菌株为农杆菌C58型背景，核基因中含有利福平抗性基因rif。此菌株还携带一种自身转运功能丧 失的质粒（disarmed Ti plasmid）。GV3101菌株含有pMP90 (pTiC58DT-DNA)，该质粒含有vir基因（vir基因是 TDNA插入植物基因组所必需的元件，pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒自身的T-DNA转移功能被破坏，但可辅助 植物双元表达载体的T-DNA的转移）。pMP90 (pTiC58DT-DNA)质粒还含有Str和Gent抗性基因，赋予GV3101 菌株链霉素和庆大霉素抗性。GV3101农杆菌适用于拟南芥、烟草、玉米、土豆等植物的转基因操作。GV3101 电转感受态特别适用于大质粒的转化，经pCAMBIA2301质粒检测转化效率大于10 5 cfu/μg DNA。 操作方法： 1. 电极间距为0.1cm的电转杯（Gene Pulser®/MicroPulser™ electroporation cuvettes）插入碎冰中，压实冰 面，冰中静置5分钟，使电转杯充分降温。（电转杯重复使用方法：每次用完后，用大量的自来水冲洗 干净去掉菌液和DNA，用蒸馏水洗3遍，将其泡在75%乙醇中30分钟，取出杯子，沥干液体，放在超净 台中，使乙醇充分挥发，盖上盖子放干燥地方备用） 2. 取-70℃保存的农杆菌感受态插入冰中5分钟，待其融化，加入1 μg质粒DNA（洗脱或溶解质粒的溶液中 离子不能太高，或用双蒸水稀释），用手拨打管底混匀，立即插入冰中，在超净台中用无菌吸头将感 受态-质粒混合物快速移到电击杯中，盖上杯盖，空管保留待用。 3. 启动电转仪，设置电击参数：C=25μF，PC=200ohm，V=2400V（此参数为BioRad公司推荐，依据不同 电转仪设置针对农杆菌合适的电击参数）。用纸巾擦掉电转杯外部的水分，将电转杯快速放入电转槽 中进行电击步骤。电击完成后，将电转杯快速插入冰中，加入700μl 无抗生素的LB 并转移到原来保留 的感受态空管中，28℃，150-200rpm振荡培养2-3小时。 4. 6000 rpm离心一分钟收菌，留取200μl左右上清轻轻吹打重悬菌块，取100μl的菌液涂布于含相应抗生素 的LB或YEB平板上，倒置放于28℃培养箱培养2-3天（当平板只含有50 μg/ml kan 时，28℃培养48h即可； 平板中同时加入50 μg/ml kan，20μg/ml rif时，需28℃培养60h；如果使用的平板含有50 μg/ml rif则需要 28℃培养72-90 h）。 注意事项： 1. 混入质粒时应轻柔操作，加入质粒的体积不应大于感受态体积的1/10，质粒不纯或超大质粒会导致转化 效率急剧下降。 2. 平板上菌落过多时，菌落很小。为了获得大的菌落，应减少质粒用量或减少涂布量，或将菌落转移到 新平板上生长。 3. 利福平使用的工作浓度浓度不应高于25 μg/ml，过高的利福平浓度会降低生长速度和转化效率。 4. 利福平具有防止止杂菌生长筛选农杆菌的作用；根据所用菌株抗性加入链霉素或庆大霉素可防止Ti 质 粒丢失，但链霉素不利于农杆菌的转基因操作，所以一般培养农杆菌时可不考虑添加链霉素或庆大霉素， Ti 质粒丢失的概率极低 (可忽略)。



GV3101农杆菌电转感受态细胞

大肠杆菌化学感受态细胞 货号 产品名称 规格 价格 BC101-02 TOP10 感受态细胞 20*100μl 240.00 BC102-02 DH5a感受态细胞 20*100μl 240.00 BC103-02 JM109 感受态细胞 20*100μl 240.00 BC104-02 XL1-Blue 感受态细胞 20*100μl 346.00 BC105-02 Mach1-T1 Phage Resistant 感受态细胞 20*100μl 240.00 BC106-02 DH10B 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC107-02 OmniMAX2-T1 Phage Resistant 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC108-01 Stbl3 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC109-01 XL10-Gold 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC110-01 JM110 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC111-01 DB3.1 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC112-01 DH10BAC 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC113-01 NEB 10-beta 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC114-01 BJ5183-AD-1 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC115-01 Stbl4 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC201-02 BL21(DE3) 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC202-02 BL21(DE3)plysS 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC203-02 M15 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC204-02 Rosetta(DE3) 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC205-02 OrigamiB(DE3) 感受态细胞 20*100μl 420.00 BC206-02 T7表达感受态细胞 20*100μl 420.00 BC207-02 T7pLysY感受态细胞 20*100μl 420.00 BC208-02 Shuffle T7-K12感受态细胞 20*100μl 420.00 BC209-02 Shuffle T7-B感受态细胞 20*100μl 420.00 大肠杆菌电转感受态细胞 货号 产品名称 规格 价格 BC401-01 NEB 10-beta 电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC402-01 BJ5183 电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC403-01 BJ5183-AD-1 电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC404-01 TOP10电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC405-01 DH5a 感受态细胞 20*50μl 420.00 农杆菌化学感受态细胞 货号 产品名称 规格 价格 BC301-01 LBA4404农杆菌感受态细胞 20*100μl 420.00 BC302-01 AGL1农杆菌感受态细胞 20*100μl 420.00 BC303-01 EHA105农杆菌感受态细胞 20*100μl 420.00 BC304-01 GV3101农杆菌感受态细胞 20*100μl 420.00 农杆菌电转感受态细胞 货号 产品名称 规格 价格 BC305-01 LBA4404农杆菌电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC306-01 AGL1农杆菌电转感受电转态细胞 20*50μl 420.00 BC307-01 EHA105农杆菌电转感受态细胞 20*50μl 420.00 BC308-01 GV3101农杆菌电转感受态细胞 20*50μl 420.00