免疫共沉淀(CO-IP)/CO-IP/免疫共沉淀

提供商 ：上海美轩生物科技有限公司

免疫共沉淀
服务目的：
测定两种目的蛋白质是否在细胞内结合；也可用于测定确定某种特定蛋白质的新的作用搭档。
服务原理：
以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法，当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质x的抗体免疫沉淀x，那么与x在体内结合的蛋白质y也能沉淀下来。
服务材料：
试剂：蛋白提取试剂盒、非离子变性剂（NP-40、TritonX-100）、PBS、TBS、相应的IgG、Protein A 或Protein G琼脂糖凝胶珠、SDS-PAGE电泳、上样缓冲液。
仪器：振荡器、蛋白电泳仪、恒温箱、脱色摇床。
服务流程：
1）用其特定蛋白的抗体与ProteinA/G相结合(Flag IP Kit已结合上)；
2）用抗体成点特定蛋白，特定蛋白已结合了与其相互作用蛋白；
3）通过洗涤得到纯复合蛋白后用感兴趣蛋白抗体通过WB方法检测其IP结果；
4）提交WB图与分析结果和实验报告。
服务方法：
1、蛋白样品准备。收集细胞或组织，在非变性条件下裂解细胞，释放蛋白。
2、选做去除非特异性结合。取待测样品，选用和免疫共沉淀时使用的IgG种属相同的普通IgG与琼脂糖凝胶珠混合，4^oC慢摇30min-2h。离心取上清。
3、免疫共沉淀。加一抗，4^oC慢摇过夜。加琼脂糖凝胶珠，4^oC慢摇1~3h。瞬时离心弃上清。PBS洗沉淀5次。
4、加电泳上样缓冲液，煮沸用于SDS-PAGE电泳。

收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
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