miRNA过表达慢病毒包装/ miRNA过表达慢病毒构建/microRNA过表达慢病毒包装

服务名称 ： 实验外包

提供商 ：上海美轩生物科技有限公司

miRNA过表达慢病毒构建
服务简介：
miRNA是一种21－25nt长的单链小分子RNA, 是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，miRNA具有高度的保守性、时序性和组织特异性.而且这种特异 性和时序性，决定了组织和细胞的功能特异性，表明miRNA在细胞生长和发育过程的调节过程中起多种作用，因此miRNA的研究受到了生物学家的广泛关 注。
服务流程：
1、慢病毒过表达质粒载体的构建
设计上下游特异性扩增引物，同时引入酶切位点，PCR(采用高保真KOD酶，3K内突变率为0%)从模板中（CDNA质粒或者文库）调取目的基因CDS区（coding sequence）连入T载体。将CDS区从T载体上切下，装入慢病毒过表达质粒载体。
2、慢病毒干扰质粒载体的构建
合成miRNA对应的DNA颈环结构，退火后连入慢病毒干扰质粒载体
3、慢病毒载体的包装与浓缩纯化
慢病毒穿梭质粒及其辅助包装原件载体质粒，三种质粒载体分别进行高纯度无内抽提，共转染293T细胞，转染后6 h 更换为完全培养基，培养24和48h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。
客户提供：
1、目的基因的序列信息；
2、病毒载体要求及选择。

收费标准/服务周期/提供结果：
欢迎咨询详谈，我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
【本公司合作项目】
慢病毒，腺病毒，RNAi类，分子生物实验，病理实验，免疫学实验，细胞实验，动物实验，蛋白组学实验等，能够进行药效学评价、毒理学评价、细胞药筛、动物建模、病理检测、蛋白组学、代谢组学、高通量测序、ChIP、CO-IP、生物信息学分析服务！