PriCells: 正常破骨细胞原代培养价格

提供商：PriCells

服务名称：正常成熟破骨细胞原代培养

规格：1ML

PriCells: 正常破骨细胞原代培养

实验材料：

1. 细胞来源：新生大鼠或兔，妊娠6个月以内的引产胎儿等；

2. 清洗液：不含Ca²⁺和Mg²⁺的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100μg/ml链霉素，pH7.2；

3. 细胞支持物：薄骨片、盖玻片；

4. 培养液：199培养基、MEM或DMEM培养基均可，须补加15%—20%小牛血清、25mmol/L HEPES及青霉素100IU/ml、链霉素100μg/ml；

实验方法：

1. 薄骨片的制备：取新鲜牛股骨干的密质部分，沿骨纵轴用骨锯切割成大小约0.5cm×0.5CM、厚为0.1cm的小块，再用金刚砂轮磨成厚约10—50μm（以便在相差显微镜下观察）的薄骨片。使用前用超声波清洗仪超声洗涤3次，每次约10min。然后依次浸泡在3个盛有含青霉素（1000IU/ml）、链霉素（1000μg/ml）、两性霉素B（3μg/ml）的抗生素溶液的小容器中，每次10—20min。最后可浸于盛有含抗生素的培养液的容器内，置4℃（短期）或-20℃（较长期）冰箱内保存备用；

2. 取生后3—5d的大鼠，拉颈处死后置于盛有75%酒精的容器中，消毒3—5min后，取出放入培养皿中；

3. 用手术剪剪开其四肢皮肤、肌肉，取股骨和胫骨等长骨，放入盛缓冲液的培养皿中。除去骨表面的软组织、骨膜以及软骨；

4. 将除去骨膜等多余组织后的长骨干部分清洗后，置于盛有少量培养液的培养皿中。用手术刀或手术剪纵行剖开骨干。用手术刀轻刮骨的内表面，同时用尖吸管不断吸取培养皿中的培养液，冲洗骨内表面多次，直至骨内表面变白为止；

5. 用吸管吸打上述含碎骨片及分离细胞的培养液2—5min左右，使附着于碎骨片上的破骨细胞分离脱落于培养液中。静置1—2min后，待碎骨片沉降，收集细胞悬液；

6. 将细胞悬液加入到预置有薄骨片或盖玻片的24孔培养板中，在37℃、5%CO₂培养箱中培养；

7. 培养30min左右，取出薄骨片或盖玻片用培养液冲洗以除去未附着的骨髓造血细胞。冲洗后，将薄骨片或盖玻片移入另一培养板中继续培养；

PriCells提供：

1. 各种原代细胞特制基础培养基；

2. 各种原代细胞培养特制添加剂；

3. 原代细胞分离试剂盒；

4. 原代细胞鉴定试剂盒；

5. 原代细胞总蛋白质抽提物；

6. 原代细胞总RNA；

7. 原代细胞总DNA；

武汉原生原代生物医药科技有限公司（原生原代，PriCells）于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域，总部设立在武汉国家生物产业基地（即光谷生物城——光谷智慧健康园。

作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业，率先独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标准，已被国际权威学术机构认可，被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。

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