PriCells:  正常兔肺泡巨噬细胞的培养

PriCells: 正常兔肺泡巨噬细胞的培养

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服务名称 :正常兔肺泡巨噬细胞的培养

提供商 :PriCells

规格 :0.5 MG

PriCells: 正常兔肺泡巨噬细胞的培养
实验材料:
1. 肺泡巨噬细胞来源:体重为2—3kg的成年兔。也可使用成年大鼠;
2. 灌洗液:不含Ca 2+和Mg 2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.4;
3. 培养液:MEM培养液,添加谷氨酰胺1mmol/L、卡那霉素100μg/ml、青霉素200IU/ml、链霉素200μg/ml、HEPES 10mmol/L和10%胎牛血清;
4. 无菌手术器械:手术刀、解剖剪、解剖镊、止血钳等;
实验方法:
1. 通过耳缘静脉给兔子快速注射约40ml空气致死;
2. 打开胸腔,暴露出气管的上段并分离四周的组织。用动脉钳夹紧气管,阻塞气管腔,防止血液由此进入肺。在气管结扎点的上端横切气管;
3. 将气管、肺和心脏整体移出胸腔。细心分离切除心脏。注意切勿损伤肺、气管及支气管、排除肺循环中的血液。用预温的生理盐水清洗肺表面,尽量洗净血液;
4. 用纱布轻轻抹干肺表面液体。用另一动脉钳牢固地夹住气管壁(注意不要堵塞气管腔),将肺悬挂在合适的支持物上;
5. 取下夹住气管腔的钳子。将预温至37℃的灌洗液30—40ml慢慢灌入气管,直到肺脏扩张。再夹紧气管,轻轻按压肺脏;
6. 松开气管,将肺灌洗液倒入一个预冷的烧杯中。密封后暂存于4℃冰箱内;
7. 重复步骤5和步骤6
8. 混合2次取得的灌洗液。在4℃条件下离心(500g,5min)。用小口径毛细吸管小心吸弃细胞团与上清液之间的絮状物(主要为细胞碎片和粘液),再吸弃上清液;
9. 加入培养液,用吸管反复吹打,将细胞团制成细胞悬液。按常规法计数细胞。从每只正常兔的肺灌洗液中可获得大约2×10 7个细胞;
PriCells提供:
1. 各种原代细胞特制基础培养基;
2. 各种原代细胞培养特制添加剂;
3. 原代细胞分离试剂盒;
4. 原代细胞鉴定试剂盒;
5. 各种原代细胞DNA;
6. 各种原代细胞RNA;
7. 各种原代细胞蛋白质;

武汉原生原代生物医药科技有限公司(原生原代,PriCells)于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域,总部设立在武汉国家生物产业基地(即光谷生物城——光谷智慧健康园。

作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业,率先独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标 准,已被国际权威学术机构认可,被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。


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