PriCells: 正常大鼠主动脉内皮细胞的培养

PriCells: 正常大鼠主动脉内皮细胞的培养

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提供商 :PriCells

服务名称 :正常大鼠主动脉内皮细胞的培养

规格 :100

PriCells: 正常大鼠主动脉内皮细胞的培养
实验材料:
1. 大鼠主动脉血管;
2. 不含Ca 2+和Mg 2+的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2;
3. 培养用液:M199培养液或RPMI1640培养液(含20%小牛血清,pH7.2);0.125%胰蛋白酶-0.01%EDTA(1:1,V:V)混合消化液;D-Hanks液、100IU/ml青霉素和100μg/ml链霉素;1%明胶溶液;
4. 培养器具:培养瓶或皿、白内障、眼科剪、镊子等;
培养方法:
1. 将大鼠颈椎脱臼或颈动脉放血处死后,将整个大鼠泡于75%乙醇中消毒1min。在无菌状态下,逐层剪开胸腔,分离取出主动脉,放含无菌D-Hanks液培养皿中;
2. 用眼科剪、镊尽量去除血管外膜的脂肪和纤维组织。然后,用含抗生素的D-Hanks液冲洗血管的外表面及血管腔内的凝血数次,再放入另一无菌培养皿中;
3. 用眼科剪纵向剪开血管,平展在培养皿中。用非常锐利的手术刀将其切成1.5mm×1.5mm大小的动脉植块,然后种植到培养瓶或培养皿中(培养瓶或皿用1%明胶预置4℃下过夜,使用前2h移入37℃,5%CO 2培养箱中。用时可以先经含20%小牛血清的M199或RPMI1640培养液冲洗)。将动脉植块的内膜面与瓶底(或皿底)接触,种植密度约为1块/cm 2
4. 置37℃,5%CO 2培养箱中(湿度100%)静置2h(干贴壁)。培养瓶皿若不用明胶包被则为0.5—1h。然后,加入少许含20%小牛血清的M199培养液或RPMI1640培养液(pH7.2),液量以略盖过动脉植块内膜面,而又不使植块漂浮为宜;
5. 72h后,当细胞达一定密度时,将动脉植块除去。换培养液1次。以后每2d换液1次,每次换1/2—2/3的液量。继续培养8—10d,细胞融合成单层,即可传代;
PriCells提供:
1. 各种原代细胞特制基础培养基;
2. 各种原代细胞培养特制添加剂;
3. 原代细胞分离试剂盒;
4. 原代细胞鉴定试剂盒;
5. 各种原代细胞DNA;
6. 各种原代细胞RNA;
7. 各种原代细胞蛋白质;

武汉原生原代生物医药科技有限公司(原生原代,PriCells)于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域,总部设立在武汉国家生物产业基地(即光谷生物城——光谷智慧健康园。

作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业,率先独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标 准,已被国际权威学术机构认可,被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。


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