PriCells: 原代细胞复苏的基本操作方法

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提供商：PriCells

服务名称：原代细胞复苏的基本操作方法

规格：0.2 ML

PriCells: 原代 细胞复苏的基本操作方法

一、实验准备

（1）仪器：净化工作台、离心机、恒温水浴箱、倒置相差显微镜、培养箱、液氮冰箱

（2）玻璃器皿：吸管（弯头、直头）、培养瓶、玻璃瓶（250ml、100ml）、废液缸

（3）塑料器皿：吸头、枪头、胶塞、移液管（10ml）、15ml离心管、冻存管（1～2ml）

（4）其他物品：微量加样枪、红血球计数板、记号笔、医用橡皮膏、移液枪

（5）试剂：PBS、小牛血清、培养液、双抗（青霉素、链霉素）、胰蛋白酶（0.08%）

二、操作步骤

（1）从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化。

（2）从37℃水浴中取出冻存管，75％酒精消毒后，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管中。 PriCells 推荐接种培养瓶， 37 ℃培养箱静置培养。

（3）离心，1000rpm，5min。 PriCells推荐不离心。

（4）弃去上清液，加入含10%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养。 PriCells 推荐小牛血清浓度依据原代细胞种类。

（5）次日更换一次1／2培养液，继续培养。

三、注意事项

（1）将冻存管从液氮容器中取出时，要做好防护工作，以免冻伤。

（2）取出冻存管后立即放入水浴中，使其尽快融化（在1－2分钟内）。

（3）复苏最好用新配制的培养液。

武汉原生原代生物医药科技有限公司（原生原代，PriCells）于2009年成立。位于湖北省武汉市东湖高新技术开发区东湖国家自主创新示范区域，总部设立在武汉国家生物产业基地（即光谷生物城——光谷智慧健康园。

作为中国专业的、专注的研发--生产--销售多种属组织源性细胞产品和提供细胞检测技术服务的生物医药企业，率先独立起草和制定了“基于多种属组织源性细胞分离、培养、运输和检测的PriCells技术流程”的行业专业标准，已被国际权威学术机构认可，被中国的学术机构和企业单位广泛应用。研发和生产的细胞产品主要面向科研院所、生物技术公司、制药企业研发中心和临床医疗机构。

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