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文献和实验
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服务名称 :病毒在肿瘤研究中的应用
提供商 :OBiO和元生物
肿瘤研究简介
癌症细胞,又称癌干细胞、肿瘤干细胞,是指具有干细胞性质的癌细胞,也就是具有“自我复制”以及“具有多细胞分化”等能力。通常这类的细胞被认为有形成肿瘤,发展成癌症的潜力,特别是随着癌症转移出去后,产生新型癌症的来源。
“精准医学”时代肿瘤研究模式
1、基因信息挖掘
2、基因功能验证
3、机制探索
基因资源库和操作工具平台
针对肿瘤基因功能学研究,和元上海分子克隆服务平台可以提供:
1、包含15000个人类表达基因的快速构建和验证服务;
2、基因表达、RNAi、Talen、Cas9和基因突变在内的多种载体构建服务;
3、基因组编辑载体DNA切割活性验证服务;
4、结合慢病毒、腺病毒、腺相关病毒和逆转录病毒等多种病毒系统的载体应用。
病毒种类 | 稳转株制备 | 难转染细胞 | 瘤内注射 | 肿瘤干细胞 |
---|---|---|---|---|
慢病毒 | √ | √ | √ | √ |
腺病毒 | × | √ | √ | × |
腺相关病毒 | × | × | √ | × |
逆转录病毒 | √ | × | √ | √ |
注:逆转录病毒可以特异性地感染肿瘤干细胞并稳定传代表达;由于逆转录病毒有较多操作系统,我们一般会根据客户应用推荐相应的系统用于实验。
RNA干扰与基因表达——基因功能研究的经典工具
常用基因表达及RNA干扰载体列表
载体名称 | 载体种类 | 应用方式 | |
---|---|---|---|
干扰 | pLenti-CMV-EGFP-U6-shRNA | 慢病毒 | 绿色荧光标记感染细胞 |
pLenti-CMV-EGFP-U6-shRNA | 慢病毒 | 绿色荧光标记,嘌呤霉素筛选 | |
pAdeno-CMV-EGFP-U6-shRNA | 腺病毒 | 绿色荧光标记 | |
pAAV-CBG-EFGP-H1-shRNA | 腺相关病毒 | 绿色荧光标记 | |
表达 | pLenti-CMV-EGFP | 慢病毒 | 绿色荧光标记感染细胞 |
pLenti-CMV-EGFP-PGK-Puro | 慢病毒 | 绿色荧光标记,嘌呤霉素筛选 | |
pLenti-TRE-EGFP-PGK-Puro | 慢病毒 | Tre诱导表达,嘌呤霉素筛选 | |
pLenti-CMV-GFP-IRES-Puro-miRNA | 慢病毒 | microRNA表达 | |
pAdeno-mCMV-EGFP-3Flag | 腺病毒 | 腺病毒表达 | |
pAAV-CMV-EGFP | 腺相关病毒 | 绿色荧光标记 |
应用案例:
TALEN和CRISPR/Cas9基因操作工具
基因敲除及敲除技术原理比较
基因敲除及基因敲减在肿瘤方向研究中的应用方式比较
类别 | 基本性质 | 应用 | ||||
切割酶 | 序列识别方式 | 基因突变 | 表观遗传修饰 | 转录调控 | 转录后调控 | |
Cas9 | 外源表达 | gRNA-DNA | √ | √ | √ | √ |
TALEN | 外源表达 | 蛋白-DNA | √ | √ | √ | √ |
RNAi | 外源表达 | RNA-RNA | X | X | X | √ |
和元生物技术(上海)股份有限公司
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