T7 RNAi Transcription Kit（T7RNAi逆转录试剂盒）（ TR102）

保存条件 ：Box 1 于-20℃保存，Box 2 于4℃保存。

英文名 ：T7 RNAi Transcription Kit

库存 ：充足

供应商 ：南京诺唯赞生物科技有限公司

规格 ：25rxn/50rxn

T7 RNAi Transcription Kit

用于体外dsRNA 合成

可以转录siRNA和长片段dsRNA；

产量高达20-80 μg；

RNA磁珠可快速高效的纯化转录产物

图1. 500 bp dsRNA 2%琼脂糖凝胶电泳图

1：DL2000 Plus DNA Marker；2和4：500 bp dsRNA酶解前后产物（双端转）；3和5: 500 bp dsRNA酶解前后产物（混合转）。

图2. siRNA 12% PAGE电泳检测结果

1：siRNA转录产物；2：siRNA转录双酶消化产物；3：单链模板；4：双链退火模板

图3. siRNA干扰绿色荧光蛋白表达

左图为GFP质粒与negative control GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞；右图为GFP质粒和positive GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞。

T7 RNA ploymerase可识别带有T7启动子的DNA模版，以四种NTP 为底物，体外转录合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit 是在T7 High Yield RNA Transcription Kit 基础上为转录双链RNA 而设计优化的版本，可用于转录21 bp 的siRNA 和长片段的dsRNA。转录产物经纯化后可用于阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、电穿孔、DEAE- 葡聚糖及显微注射等方法介导的RNAi 实验。一般情况下，一个反应可产生20 μg-80 μg 的RNA。

	组分	TR102-01(25 rxns)	TR102-02(50 rxns)
Box 1	T7 Enzyme Mix	50 μl	100 μl
	10 × Transcription Buffer	50 μl	100 μl
	10 × Annealing Buffer	250 μl	500 μl
	NTP Mix	200 μl	400 μl
	DNase I	25 μl	50 μl
	RNase T1(100 U/μl)	25 μl	50 μl
	RNase T1 Dilution Buffer	300 μl	600 μl
	Control Template*	5 μl	10 μl
Box 2	RNase-free H2O	5 ml	5 ml
	RNA Clean Beads	2 ml	4 ml

* 本试剂盒提供的Control Template 为500 bp 双端含T7 启动子的PCR 产物，浓度为0.5 μg/μl。

Box 1 于-20℃保存，Box 2 于4℃保存。