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文献和实验
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保存条件 :4~25℃
保质期 :6个月
英文名 :SDS-PAGE Gel Preparation Kit
库存 :754
供应商 :北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销
品牌:百奥莱博
英文名:SDS-PAGE Gel Preparation Kit
产地:国产|进口
规格:30~50gels
编号:SY0359
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶来实现蛋白分离,此类凝胶一般由浓缩胶和分离胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
本试剂盒提供了配制SDS-PAGE凝胶所需的各种试剂,用户只需自备制胶设备和蒸馏水即可配胶,大大简化了制胶过程,本试剂盒可配制30-50块常规大小的凝胶。
产品组份:
组分名称 | 规格 | 保存方式 |
30%丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺,29:1 | 100ml | 4℃避光 |
4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液,pH8.8 | 70ml | 4℃ |
4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液,pH6.8 | 30ml | 4℃ |
APS 过硫酸铵 | 0.5g | 4℃~25℃ |
TEMED 四甲基二乙胺 | 0.5ml | 4℃~25℃避光 |
储存条件:4~25℃,有效期6个月。
注意事项
1) 丙烯酰胺溶液和TEMED有毒,请适当防护。
2) APS溶液不稳定,当配制成10%溶液后,分装成-20℃冻存。尽量减少室温存放时间,以防失效。若是发现凝胶聚合时间明显延长,需要更换使用其它-20℃冻存或者新鲜配置的10%APS。
3) TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。
4) 凝胶凝聚的速度与温度、光照、以及TEMED、APS的用量关系密切。在其他组分用量不变的前提下,可通过适当调节TEMED以及APS的用量,控制现有室温条件下凝胶凝聚的速度。可参考附件的量进行相应的调整。
5) 温度较低时,4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液和4×Tris-HCl-SDS浓缩胶缓冲液中的SDS可能析出。此时需水浴温育,并在完全溶解和混匀后使用。
6) 凝胶配制过程,特别是液体混匀步骤,需尽量避免气泡的产生。
7) 在分离胶上层进行水压时需小心操作,加水速度不宜过快。
8) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1.根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度【参考附表1】;
2.按照附表2配制相应浓度的SDS-PAGE分离胶,制胶程序如下:
2.1 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×分离胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
2.2 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免气泡产生;
2.3 在装好的制胶模具中灌入适量分离胶溶液,对于mini胶,分离胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可。然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-5cm的水层,从而压平凝胶表面;
2.4 静置30-60min,待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面,表面凝胶已聚合;
3.按照附表3配制SDS-PAGE浓缩胶,制胶程序如下:
3.1 去除覆盖在分离胶上的水层。
3.2 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、4×浓缩胶缓冲液和蒸馏水在试管或者小烧杯内混合;
3.3 加入10%APS和TEMED,轻轻搅拌使其混匀,避免产生气泡。
3.4 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面,直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
3.5 将梳子插入凝胶内,避免产生气泡。
3.6 静置10-20min,等待浓缩胶聚合。
3.7 待凝胶聚合后,小心地拔出梳子,以免破坏加样孔。
3.8 可用电泳缓冲液吹走孔内残留的一些胶液【可选】,然后进行上样和后续的常规电泳操作。
附表1. 不同浓度SDS-PAGE分离胶的最佳分离范围
SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
6%凝胶 | 50-150kD |
8%凝胶 | 30-90kD |
10%凝胶 | 20-80kD |
12%凝胶 | 12-60kD |
15%凝胶 | 10- 40kD |
附表2. 不同浓度SDS-PAGE分离胶配制体系
分离胶浓度 | 凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 分离胶缓冲液,pH 8.8 |
10%APS | TEMED | ||
rowspan=6>6% | 5 | 2.7 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
10 | 5.4 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
15 | 8.1 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
20 | 10.8 | 4.0 | 5.0 | 0.2 | 0.016 | |
30 | 16.2 | 6.0 | 7.5 | 0 .3 |
0.024 | |
50 | 27.0 | 10.0 | 12.5 | 0.5 | 0.040 | |
rowspan=6>8% | 5 | 2.37 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
10 | 4.7 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
15 | 7.1 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
20 | 9.5 | 5.3 | 5.0 | 0.2 | 0.012 | |
30 | 14.2 | 8.0 | 7.5 | 0.3 |
0.018 | |
50 | 23.7 | 13.3 | 12.5 | 0.5 | 0.030 | |
rowspan=6>10% | 5 | 2.03 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 4.07 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 6.1 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 8.1 | 6.7 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 12.2 | 10.0 | 7.5 | 0.3 | 0.012 | |
50 | 20.3 | 16.7 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
rowspan=6>12% | 5 | 1.7 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 3.4 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 5.1 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 6.8 | 8.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 10.2 | 12.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
50 | 17.0 | 20.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 | |
rowspan=6>15% | 5 | 1.2 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
10 | 2.4 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
15 | 3.6 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
20 | 4.8 | 10.0 | 5.0 | 0.2 | 0.008 | |
30 | 7.2 | 15.0 | 7.5 | 0.3 |
0.012 | |
50 | 12.0 | 25.0 | 12.5 | 0.5 | 0.020 |
附表3. 5%SDS-PAGE浓缩胶配制体系
凝胶体积(ml) | 所需各组分体积(单位:ml) | ||||
蒸馏水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 4×Tris-HCl-SDS 浓缩胶缓冲液,pH 6.8 |
10%APS | TEMED | |
2 | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
4 | 2.28 | 0.68 | 1.0 | 0.04 | 0.004 |
6 | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
8 | 4.56 | 1.36 | 2.0 | 0.08 | 0.008 |
想要了解更多关于SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销售下面的产品:
·iFluor 555标记鬼笔环肽(橘色)
编号:SY0568
英文名称:iFluor 555 phalloidin
规格:300T
本品为iFluor 555标记的鬼笔环肽,可发出橘红色的荧光,具有独一无二的高亮度和光稳定性,且染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。iFluor 555 鬼笔环肽染色与用于细胞分析的其他荧光染色完全兼容,包括荧光蛋白、纳米晶体和其他iFluor偶联物(包含iFluor偶联二抗)。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。本品以1000×储存液形式(溶于DMSO)提供。
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏(Amanita phalloides)的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片、细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
分子量:~1300
最大激发/发射波长:556/574nm
溶解性:溶于DMSO
储存条件:-20℃避光干燥,有效期一年
结构式
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销关键词:SDS-PAGE Gel Preparation Kit,SY0359,SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
ARB11301 人重酒石酸去甲肾上腺素(NE-B)尿液中含量检测 Human noradrenaline bitartas,ne-b ELISA KIT
ARB10896 人抗着丝点抗体(ACA/CENP)免费代测 Human anticentromere antibody,aca/cenp ELISA KIT
ARB10622 人血栓调节蛋白(TM)Elisa定量检测 Human thrombomodulin,tm ELISA KIT
ARB13378 牛流行热病毒抗体(EFV-Ab)elisa检测操作说明书
角鲨烯 4-Hydroxybenzoic acid sodium salt 111-02-4
PY02-001 营养琼脂(NA) 250克
ARB10351 人分泌型磷脂酶A2(sPLA2)elisa检测说明书 Human secreted phospholipase a2,spla2 ELISA KIT
PY08-013 甘露醇氯化钠琼脂平板 9CM 10皿/盒,用于药品、生物制品金黄色葡萄球菌选择性分离、培养
ARB10294 人己糖激酶3(HK3)含量分析 Human hexokinase 3,hk3 ELISA KIT
J0306 兔抗山羊IgG(H+L)抗血清
对甲苯甲酸 TRIS-HC1 99-94-5
BTN60601 DNA UV防护剂 DNA UV Erasol
2-硝基苯甲醛 HOBT 552-89-6
ARB13625 兔子神经生长因子(NGF)酶免分析 Rabbit nerve growth factor,ngf ELISA KIT
A8016-19 大鼠血清 100ml|500ml
ARB11811 人睾酮(T)Elisa方法检测 Human testoterone,t ELISA KIT
BL1116 台盼蓝染色液(0.4%)
CYB165017 生物素化羊抗人C3
PY02-288 MFC培养基 250克
SDS-PAGE蛋白质低分子量标准 Tyramine hydrochloride
F030301 胶体金标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*GOLD
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销关键词:SDS-PAGE Gel Preparation Kit,SY0359,SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
·即用型PCR预混溶液
编号:SY0037
英文名称:2×Pfu Master Mix
规格:1ml
2×Pfu Master Mix是即用型的PCR预混合溶液,包含Pfu DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。体系中含有的保护剂使得Master Mix 经过反复冻融后仍可维持稳定的活性。PCR产物为平末端。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:20 μl本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测1:以100 ng人基因组DNA为模板扩增α-1-antitrypsin基因。30个循环后取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2:以10 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环,取10% PCR产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 kb条带。
储存条件:-20℃
·Alexa Fluor 647标记驴抗小鼠IgG(H+L)
编号:SY0723
英文名称:Alexa Fluor 647 AffiniPure Donkey Anti-Mouse IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Alexa Fluor 647标记的驴抗小鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的小鼠IgG分子,也会与其他小鼠免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、鸡、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、兔和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理,ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应,但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Alexa Fluor 647的光谱性质类似于APC,其最大激发波长(Amax)为651nm,最大发射波长(Emax)为667nm。本品适合做多标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸钠,0.125M 氯化钠, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*(代"钠")
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
我公司生产供应销售的蛋白质研究正全品类优惠促销,十分期待您的咨询选购SDS-PAGE凝胶配制试剂盒厂家直销。
北京百奥莱博科技有限公司
实名认证
钻石会员
入驻年限:9年