YT816型LC3B抗体优惠

免疫原 ：人工合成的LC3B氨基端的一段多肽

形态 ：液体

保存条件 ：-20℃冻存，避光

克隆性 ：多克隆

适应物种 ：人，小鼠，大鼠 (猴,鸡,牛,非洲爪蟾)

保质期 ：二年

目录编号 ：YT816

库存 ：520

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

宿主 ：兔

应用范围 ：WB,IF-IC,FCM

浓度 ：1mg/ml

靶点 ：LC3B

抗体英文名 ：anti-LC3B antibody

抗体名 ：LC3B抗体

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售YT816型LC3B抗体优惠，我公司供应的抗体抗原品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：YT816型LC3B抗体优惠
产地：国产|进口
规格：>20次
编号：YT816
本抗体是用人工合成的LC3B氨基端的一段多肽进行适当修饰后免疫rabbit，然后用protein A和抗原多肽亲和柱经过两步纯化得到的高纯度抗体。本抗体如果用于常规的Western检测，至少可以检测20次。

本LC3B抗体识别的是总LC3B(total LC3B)，可以检测内源性的LC3B，可以同时识别LC3B-I和LC3B-II，分子量依次分别为16kD和14kD。

自噬(Autophagy)是一种最终通过溶酶体(lysosome)降解部分细胞自身组份的的分解代谢过程。自噬通常会在营养缺乏的情况下被激活，同时又与许多生理病理过程相关，包括生长、分化、神经退行性疾病、感染和肿瘤等。LC3(light chain 3)是目前公认的自噬分子标记物(autophagy marker)。LC3最初发现时被认为是微管关联蛋白1A和1B(microtubule-associated proteins 1A and 1B)，被称为MAP1LC3，随后发现LC3与酵母蛋白Apg8/Aut7/Atg8具有较高相似性，并在自噬过程中起重要作用。哺乳动物中有三种LC3，包括LC3A、LC3B和LC3C，它们在自噬过程中存在相关的翻译后修饰。LC3蛋白首先会在合成后立即在其羧基端被Atg4所剪切，产生细胞浆定位的LC3-I。在自噬过程中，LC3-I会被包括Atg7和Atg3在内的泛素样体系所修饰和加工，产生分子量为14kD的LC3-II，并定位到自噬小体中。这样，自噬小体中存在的LC3，和低分子量的LC3-II都被当做细胞发生自噬的分子标志(autophagy marker)，并且LC3-II的含量和发生自噬的程度成正比。LC3B作为LC3的一种，同样可以用作自噬的分子标志。

产品组份：
LC3B抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml

抗体参数：
免疫原：人工合成的LC3B氨基端的一段多肽
宿主：兔
用途：WB,IF-IC,FCM
交叉反应性：人，小鼠，大鼠 (猴,鸡,牛,非洲爪蟾)
LC3B分子量：14/16kD
推荐稀释比例：WB(1:1000),IF-IC(1:400),FCM(1:50)

注意事项：
1. 在Western实验后，请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体，包括已经使用过的稀释抗体，4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体，使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象，可以10000g离心1-3分钟，取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况，则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体，Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜，如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。

储存条件：-20℃，有效期一年。

关于YT816型LC3B抗体优惠的更详细说明，请致电我公司咨询，我们将以最饱满的热情为您提供解答，此外，我公司专业供应下列产品：

·红色核酸染料(DNA染料)(RNA染料)
编号：YT015
英文名称：Nucleic Acid Red(2000X)
规格：1ml|5ml
本品是一种优于溴化乙锭（EB）的核酸染料，用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色，可替代升级SYBR Green。本核酸红染料具有安全(致突变性极低且检测不到显著的细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点，凝胶中的核酸在使用本产品染色后用适当紫外灯(300nm左右波长)检测呈现红色荧光，适用于原先使用EB为染料的凝胶成像系统。

本核酸红染料比EB和SYBR Green更安全。本核酸红染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明，本核酸红染料的诱变性远小于EB。EB在多种致突变测试中呈现很强的诱变性，而本核酸红染料仅仅在浓度高达20微克/毫升时，并在S9代谢活化时有非常微弱的诱变性。通常本核酸红染料在凝胶中的工作浓度约为2微克/毫升，大大低于可导致诱变的浓度。本核酸红染料和百奥莱博的另外一种安全型核酸染料核酸绿色染料（YT016），由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞，从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜，进入活细胞并染色DNA，并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。

本核酸红染料检测灵敏度高，对于小分子量核酸的染色效果好。本核酸红染料的检测灵敏度比EB高8-10倍，在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时，本核酸红染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高；与SYBR Gold不同的是，本核酸红染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸的染色效果差，而本核酸红染料对于小分子量核酸的染色效果很好，便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。推荐使用的本核酸红染料浓度，其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度，可以适当提高本核酸红染料的工作浓度。

本核酸红染料的稳定性好，染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差，这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本核酸红染料的稳定性很好，可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本核酸红染料的光稳定性良好，可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性，含本核酸红染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。

本核酸红染料可以使用和EB相同的检测体系。本核酸红染料和EB的激发光和发射光都非常接近，可以直接用本核酸红染料替换EB，而不必更换已有的凝胶观察、拍照或成像系统(约300nm激发)。本核酸红染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。


本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱

本品可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶，也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便，而后者灵敏度要更高一些。但由于本品本身已经非常灵敏，通常采用把本品直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊情况，如核酸样品量特别少的情况等，则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。

本品对于核酸的迁移率影响非常小，小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。通过凝胶回收试剂盒（YT010）或酚氯*(代"仿")抽提，可以有效去除与DNA或RNA结合的红色染料，从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。

储存条件：室温，避光，有效期一年。

注意事项:
1.本产品兼容常用的电泳缓冲液，例如TAE和TBE。
2.本品和EB一样，作为荧光染料均需避光保存，但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3.制备好的本品琼脂糖凝胶，在4℃避光条件下通常可以保存3-5天。
4.本品琼脂糖凝胶再次熔化使用时，为取得更好的观察效果，需要添加适量本品。
5.电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6.电泳后再使用本品染色的凝胶一般不需要脱色。如果发现背景太高，可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7.本品和核酸绿色染料（YT016）除了可以染色双链DNA外，也可染色单链DNA和RNA。本品对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。本品对单链核酸的染色灵敏度约为YT016的5倍。
8.如果使用聚丙烯酰胺凝胶，请使用浸泡染色法染胶，并延长染色时间至30分钟-1小时。
9.如果观察到条带弥散或者分离不理想，建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题，说明与染料无关，请尝试以下方法：使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。



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·碱性磷酸酶标记链霉亲和素
编号：YT853
英文名称：AP-labeled Streptavidin
规格：0.2ml
本品为碱性磷酸酯酶标记链霉亲和素，可以用于生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白或其它生物素标记分子的检测。具体用途包括Western、ELISA、免疫组化或免疫细胞化学、原位杂交、Southern、Northern、EMSA等。

本AP-Streptavidin用高纯度的Streptavidin和超纯的碱性磷酸酯酶交联而成，确保产生极低的本底和非常高的灵敏度。本产品的浓度为1mg/ml。

Streptavidin的分子量为66kD，可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为Kd=10-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素，从Streptomyces adidinii中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=～10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。

碱性磷酸酯酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括蛋白质、核苷酸和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。常见的小牛肠碱性磷酸酶(Calf Intestinal Alkaline Phosphatase, CIAP/CIP)被广泛用于二抗等的标记最终用于蛋白和核酸等的检测，例如在Western、ELISA、IHC、ICC、EMSA、Northern、Southern等时，催化BCIP/NBT等显色试剂显色或催化适当的化学发光试剂产生化学发光。本产品标记的就是小牛肠碱性磷酸酶。

本碱性磷酸酯酶标记Streptavidin用于各种常规用途的推荐稀释比例如下，实际实验操作过程中需根据具体情况适当调节碱性磷酸酯酶标记Streptavidin的稀释比例。对于Western，推荐的稀释范围为1:2000-10000。

WB：1:2000-5000
IHC/IC/ISH：1:150-500
ELISA：1:2000-5000
Southern/Northern：1:2000-5000
EMSA：1:2000-5000

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·β-Catenin/TCF凝胶迁移突变探针(1.75μM)
编号：YT216
英文名称：β-Catenin/TCF Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
规格：60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的β-Catenin/TCF consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针－β-Catenin/TCF的阴性对照，用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。的双链寡核苷酸含有公认的 β-Catenin/TCF结合位点，可以用作EMSA研究时的探针。一个包装的生物素标记探针可以进行约200-400个样品的EMSA检测。一个包装的突变探针，如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应，可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

β-Catenin/TCF consensus oligo的序列如下：
5"-CCC TTT GAT CTT ACC-3"
3"-GGG AAA CTA GAA TGG-5"

EMSA突变探针－β-Catenin/TCF中β-Catenin/TCF的公认的结合位点发生了突变，从而使β-Catenin/TCF无法和该突变 探针结合。在探针冷竞争反应中，正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带会被抑制；而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中，正常的标记探针和β-Catenin/TCF的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针)；
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针)；
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记探针)；
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋标记探针100倍量的未标记突变探针)；
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白＋标记探针＋目的转录因子的特异抗体)。

注意事项：
1. 避免加热到40℃以上，温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件：-20℃，有效期一年。

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