组织microRNA提取试剂盒销售

组织microRNA提取试剂盒销售

价格: ¥150 - 1700

品牌:百奥莱博

货号:ALH072-YGO

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产品详情

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保存条件 :室温

保质期 :6个月

英文名 :Tissue Cell microRNA Extraction Kit

库存 :698

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销售组织microRNA提取试剂盒销售,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


名称:组织microRNA提取试剂盒销售
编号:ALH072
规格:50次
英文名:Tissue Cell microRNA Extraction Kit
产地:国产|进口
本试剂盒采用独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶,强烈有机抽提去除蛋白和DNA,RNA包括微小分子RNA吸附于离心柱内特殊硅基质膜, 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质进一步去除, 最后低盐的洗脱液将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

近年来对RNA干扰和调节性小RNA的广泛研究迫切需要一种能有效提取15~30核苷酸左右大小RNA(包括siRNA和miRNA)的试剂盒。但是传统的RNA提取方法如硅胶膜不能有效吸附回收,酚/胍抽提和乙醇沉淀并不能有效沉淀回收微小分子RNA。本试剂盒的出现很好的解决了这一问题。

产品组分:
Lysis/Binding buffer————50ml
70%乙醇——————————9ml
Wash Solution 1——————12ml
Wash Solution 2/3—————10ml
RNase-free H2O——————10ml
吸附柱和收集———————50套
microRNA吸附柱和收集管——50套

产品特点:
1. 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。 克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2. 也不需要乙醇沉淀等容易丧失微小分子RNA的步骤。
3. 快速,简捷,单个样品操作一般可在30分钟内完成。
4. 多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.9~2.0,基本无DNA残留,可用于RNAi,RT-PCR,Northern-blot和各种实验。

注意事项:
1. 第一次使用前请先在70%乙醇、Wash Solution 1瓶和Wash Solution 2/3瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm 的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
3. 需要自备乙醇,氯*(代"仿"),一次性注射器,研钵。
4. Lysis/Binding buffer 和Wash Solution 1含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤,眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
5. 预防RNase 污染,应注意以下几方面:
1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致RNase 污染。
2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
3) RNA 在裂解液中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料器皿可在0.5M NaOH 中浸泡10 分钟,然后用水彻底清洗,再灭菌,即可去除RNase。
4) 配制溶液应使用无RNase 的水。(将水加入到干净的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.1%( v/v),37℃放置过夜,高压灭菌。)
6. RNA 纯度及浓度检测:
完整性:RNA 可用普通琼脂糖凝胶电泳(电泳条件:胶浓度1.2%;0.5×TBE 电泳缓冲液;150v,15 分钟)检测完整性。由于细胞中70%-80%的RNA 为rRNA,电泳后UV 下应能看到非常明显的rRNA 条带。动物rRNA 大小分别约为5kb和2kb,分别相当于28S 和18S rRNA。动物RNA 样品中最大rRNA 亮度应为次大rRNA 亮度的1.5-2.0 倍,否则表示RNA 样品的降解。出现弥散片状或条带消失表明样品严重降解。
纯度:OD260/OD280 比值是衡量蛋白质污染程度的指标。高质量的RNA,OD260/OD280 读数(10mMTris, pH7.5)在1.8-2.1 之间。OD260/OD280 读数受测定所用溶液的pH 值影响。同一个RNA 样品,假定在10mM Tris,pH7.5 溶液中测出的OD260/OD280 读数1.8-2.1 之间,在水溶液中所测读数则可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA 不纯。
浓度:取一定量的RNA 提取物,用RNase-free 水稀释n 倍,用RNase-free 水将分光光度计调零,取稀释液进行OD260, OD280 测定,按照以下公式进行RNA浓度的计算:终浓度(ng/μl)= (OD260)×(稀释倍数n)×40。

储存条件:室温,有效期6个月。(Lysis/Binding buffer需4℃避光保存)

本品别名:组织细胞miRNA提取试剂盒|细胞miRNA纯化试剂盒|细胞miRNA分离试剂盒|细胞microRNA提取试剂盒|细胞microRNA分离试剂盒|细胞microRNA纯化试剂盒|组织miRNA纯化试剂盒|组织miRNA分离试剂盒|组织microRNA提取试剂盒|组织microRNA分离试剂盒|组织microRNA纯化试剂盒
组织microRNA提取试剂盒销售
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·通用型T载体克隆菌落PCR检测试剂盒
编号:ALH351
英文名称:Universal T vector colony PCR identification Kit
规格:80次|400次
本试剂盒采用通用T载体引物研制的通用T载体菌落PCR鉴定试剂盒,只需购买一种试剂盒,便可用于市面上所有常见的T载体(包括pGEM,pUC,pBluescript系列) 连接阳性克隆的鉴定。此外,采用T3,T7或者SP6做引物的菌落PCR鉴定试剂盒引物距离插入位点的距离非常短,因此在鉴定100bp左右或者更小片段的插入时,阴性克隆的引物二聚体条带和阳性克隆扩增条带大小接近,无法区分。往往把引物二聚体的条带看成是阳性扩增条带,造成假阳性。反之,造成假阴性。本试剂盒通用T载体引物在未插入片段时的距离至少有150bp以上,加上插入片段的长度,可以清晰的区分是插入片段扩增出的条带还是引物二聚体扩增出的条带。避免假阳性或者假阴性,大大提高了准确性。本公司研发的一管便携式PCR MasterMix预混系统,无需您一一加入各种成分,直接加入需筛选单菌落,经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。

试剂盒组份(400次):
2 × Taq PCR MasterMix——————5ml
Universal primer F————————250μl
Universal primer R————————250μl
ddH2O———————————————5ml

注意事项:
1. 重组菌落鉴定时,挑取单菌落前,应先做好标记,便于鉴定后使用。
2. 挑取菌落时,应选择单菌落,不要挑取太多菌体,以免影响PCR 结果。
3. 设定PCR 程序时,请根据插入片段大小决定延伸时间,如果插入片段大小为1 kb以下,延伸时间30-45 秒即可,如果片段更长,可按此比例增加延伸时间。

储存条件:-20℃。

·Gateway entry clone构建试剂盒
编号:ALH328
英文名称:Gateway entry Clone Construction Kit
规格:20次
本试剂盒采用了世界最先进的定向拓扑异构酶克隆技术可以在5分钟内将待表达目的基因(高保真酶扩增的平末端片段)一步法定向克隆到Gateway入门载体,得到的入门克隆可以和各种Gateway目的载体通过LR重组反应,生成表达克隆。方便目的基因在原核/哺乳动物细胞/酵母/昆虫表达系统切换表达。

试剂盒组份:
Gateway入门载体(30ng/μl)—————20μl
10×Enhancer-———————————20μl

产品特点:
1. 简单快速,加入待表达基因片段室温仅需5分钟便可完成入门克隆构建。
2. 定向克隆技术,超过90%插入为正确方向插入,减少克隆筛选耗费的时间。
3. 构建的入门克隆不含原核表达Shine-Dalgarno(SD)序列,因此构建原核表达克隆时应选择带SD序列的目的载体进行Gateway LR重组。

储存条件:-20℃,有效期12个月。


组织microRNA提取试剂盒销售关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒
组织microRNA提取试剂盒销售

·超纯总RNA提取试剂盒(TRIzol法)
编号:ALH011
英文名称:Ultra Pure Total RNA Fast Extraction Kit
规格:20次|50次
本试剂盒适用于动植物组织、动植物培养细胞的总RNA提取,采用改进的异硫氰酸胍/酚一步法(TRIzol法)裂解细胞和灭活RNA酶,然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的RNase free water将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。

产品特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界著名公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异极小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好,纯度高和离心柱方便快捷的优点,不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程,RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。
3.独特的RL裂解液配方,可以有效的消除基因组污染。
4.多次漂洗去蛋白过程,提取RNA纯度更高。
5.有效的去除了5S在总RNA中含量,提高了纯度。

试剂盒组份:

组份 20次 50次
裂解液RL 20ml 50ml
去蛋白液RE 15ml 25ml
漂洗液RW 5ml 10ml
RNase-free H2O 10ml 10ml
吸附柱和收集管 20套 50套


储存条件:室温,有效期一年。(裂解液RL需4℃避光保存)

注意事项:
1. 第一次使用前请先在漂洗液RW瓶中加入指定量乙醇,加入后请及时打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
2. 本试剂盒抑制RNA酶效果极佳,所有离心步骤如未加说明,均可在常温进行。
3. 裂解液RL和去蛋白液RE中含有刺激性有害化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4. 考虑到环保问题,本试剂盒不含有实验室常用试剂氯*(代"仿"),使用前需要自备氯*(代"仿")。
5. 常规的琼脂糖凝胶电泳和变性胶电泳均可以用来分析RNA的质量。好的RNA产物在电泳后应该可以看到明显的二条优势核糖体RNA带,分别为~5Kb(28S),~2Kb(18S),条带亮度比值约为2:1。有时候也可以看到~0.1kb和0.3Kb(5S,tRNA)带。但有时候根据不同的物种如某些植物组织可以看到4,5条带也属于正常现象,如果RNA未成熟的前体或者不均一核RNA、小核RNA提取出来也可能看到介于7Kb和15Kb之间的不连续的高分子量条带。
6. 检测OD260/OD280吸光度比值时,如需稀释RNA样品应该用TE(PH 8),如果用水稀释后检测,由于一般水离子强度和PH值低,会使OD280升高,从而使比值降低。
7. 加入裂解液RL匀浆后,加氯*(代"仿")前,样品可在–60℃~70℃ 保存一个月以上。
8. 若提取细菌RNA,推荐细菌RNA提取试剂盒(目录号:ALH027和ALH029)。

操作步骤(实验前请先阅读注意事项)
 提示:第一次使用前请先在漂洗液RW 瓶中加入指定量无水乙醇!
1. 匀浆处理
a. 组织
将组织在液氮中磨碎,每50~100mg组织加1ml的裂解液RL后匀浆。组织样品容积不能超过RL容积的10%。
b. 单层生长的细胞
直接往直径3.5 cm的培养板中加入1ml的RL溶解细胞,并用移液枪轻轻吹打混匀。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的RL量(每10cm2加1ml)。一般情况下,普通大小的细胞培养瓶,加入1ml的RL, 迅速轻摇使RL充分和瓶底所有细胞接触裂解细胞并灭活RNA酶,轻轻用移液枪反复吹打混匀。当RL量不足时可导致抽提的RNA中污染有DNA。
c. 悬浮生长的细胞
通过离心来沉淀细胞,小心弃上清。每5~10×106的动物细胞或植物细胞加1ml的RL。在RL试剂中用移液枪反复吹打来裂解细胞。在加入RL前应避免洗涤细胞,否则会增加mRNA降解的可能性。
2. 将匀浆样品剧烈震荡混匀,在15~30℃条件下孵育5分钟以使核蛋白体完全分解。
3. 可选步骤:4℃的条件下12,000rpm 离心10分钟,小心取上清转入一个新的RNase free的离心管中。当样品富含蛋白质、脂肪、多糖或是细胞外物质例如肌肉、脂肪组织或植物的块茎部分时可能需要一额外的分离步骤。匀浆化后在2~8℃的条件下以12,000rpm离心10分钟,移除匀浆中不溶解的物质,余下的沉淀中包含有细胞外膜、多糖、以及高分子量DNA,而上层的超浮游物含有RNA。
4. 每1ml RL加0.2ml氯*(代"仿")。盖紧样品管盖,剧烈振荡15秒并将其在室温下孵育3分钟。
5. 于4℃12,000rpm 离心10分钟,样品会分成三层:下层有机相,中间层和上层无色的水相,RNA存在于水相中。水相层的容量大约为所加RL体积的50%,把水相小心转移到新管中(不要触碰中间层),记录水相体积。
6. 加入水相体积一半也就是0.5倍体积的无水乙醇,混匀(此时可能会出现沉淀)。得到的溶液和可能沉淀一起转入吸附柱中(吸附柱套在收集管内,若一次不能将全部溶液和混合物加入吸附柱中,请分两次转入吸附柱中。) ,12,000rpm离心45秒,弃废液,将吸附柱重新套回收集管。
7. 加500μl 去蛋白液RE,12000rpm 离心45 秒,弃废液。
8. 加入500μl漂洗液RW(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm 离心45秒,弃废液。
9. 重复步骤8一次。
10. 将吸附柱放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
11. 取出吸附柱,放入一个RNase free离心管中,根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加50-80μl RNase free water,室温放置2分钟,12000rpm 离心1分钟。如果需要较多RNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,离心1分钟,或者另外再加30μl RNase free water,离心1分钟,合并两次洗脱液。洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要RNA 浓度较高,可以适当减少洗脱体积, 但是最小体积最好不少于30μl,体积过小降低RNA 洗脱效率,减少RNA产量。


组织microRNA提取试剂盒销售关键词:细胞miRNA纯化试剂盒,细胞microRNA提取试剂盒,细胞miRNA分离试剂盒,组织细胞miRNA提取试剂盒
组织microRNA提取试剂盒销售
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CBZ-L-丝氨酸 5′-NT 1145-80-8
D-来苏糖 4-Methoxysalicylaldehyde 1114-34-7
盐酸丫啶 Carbol fuchsin 17784-47-3
β-环糊精 Phenyl Sepharose 6 Fast Flow (low sub) 7585-39-9
王树脂 β-carotene
PY04-106 孔雀石绿 1ml/支×10支 每支预热至50℃后,加入100ml灭菌冷却至50℃ 改良罗氏培养基基础中,用于结核分枝杆菌的分离培养、保存及药敏试验用
藏红T Fluorescein disodium salt 477-73-6
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