北京潮霉素B试剂价格

北京潮霉素B试剂价格

价格: ¥170 - 3080

品牌:百奥莱博

货号:QN0095-IXN

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保存条件 :2~8℃

保质期 :长期

英文名 :Hygromycin B

库存 :728

供应商 :北京百奥莱博科技有限公司

CAS号 :31282-04-9

规格 :1g

特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京潮霉素B试剂价格由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多潮霉素B试剂等抗生素类产品请联系我司咨询订购。


名称:北京潮霉素B试剂价格
英文名:Hygromycin B
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本品由吸水链霉菌代谢产生的一种氨基糖苷类抗生素,通过干扰70S核糖体易位和诱导对mRNA模板的错读而抑制蛋白合成,从而杀死原核(如细菌)、真核(如酵母菌,真菌)和高等哺乳动物真核细胞。本品是无菌的潮霉素B溶液(100mg/ml),可直接用培养液稀释使用。

CAS:31282-04-9
分子式:C20H37N3O13
分子量:527.52
储存条件:2~8℃
性状:澄清或轻微浑浊黄色溶液

大肠杆菌( Escherichia coli.)来源的潮霉素抗性基因(hyg或hph),编码潮霉素B磷酸转移酶,将潮霉素B转化成不具有生物活性的磷酸化产物,从而起到解毒作用。针对这一原理,潮霉素B是一种非常有用的选择性标记,用来筛选和维持培养成功转染潮霉素抗性基因的原核或者真核细胞。另外,由于作用模式的差异,常与G418,Zeocin™ 和Blasticidin S联合使用进行双抗性阳性细胞株的选择。潮霉素B还能用作抗病毒剂,因其选择性渗透进入因病毒感染增强通透性的细胞,且具有抑制翻译的功效。还可混合入动物饲料中起到驱虫功能。

使用方法:
1. 常用筛选浓度
注意:潮霉素B用来筛选稳转株的工作浓度需要根据细胞类型,培养基,生长条件和细胞代谢率而变化,推荐使用浓度为50-1000μg/mL。对于第一次使用的实验体系建议通过建立杀灭曲线(kill curve),即剂量反应性曲线,来确定最佳筛选浓度。
一般而言,哺乳动物细胞50-500μg/mL;细菌/植物细胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 杀灭曲线的建立
注意:为了筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株,需要确定能够杀死未转染宿主细胞的抗生素最低浓度,可通过建立杀灭曲线(剂量反应曲线)来实现,至少选择5个浓度。
1)第一天:未转化的细胞按照20-25%的细胞密度铺在合适的培养板上,37℃,CO2培养过夜;注:对于需要更高密度来检测活力的细胞,可增加接种量。
2)根据细胞类型,设定合适范围内的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例,可设定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去离子水或者PBS buffer按照1:10的比例将母液稀释到5 mg/ml,然后按照下表稀释到相应浓度的工作液。

终浓度(μg/mL) 培养基体积(ml) 5mg/ml潮霉素B加入体积(ml)
50 9.9 0.1
100 9.8 0.2
250 9.5 0.5
500 9.0 1.0
750 8.5 1.5
1000 8.0 2.0

3)第二天:替换旧的培养基,换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基。每个浓度做三个平行孔。
4)接下来每3-4天更换新的含药物培养基。
5)按照固定的周期(如每2天)进行活细胞计数来确定阻止未转染细胞生长的恰当浓度。选择在理想的天数(通常是7-10天)内能够杀死绝大多数细胞的最低浓度为稳定转染细胞筛选用的工作浓度。

3. 稳定转染细胞的筛选
1)转染48h后,用含有适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞(直接传代或者稀释后传代)。
注意:细胞处于活跃分裂状态时抗生素的杀伤效果最好。则当细胞过于稠密,其效率会降低。为了得到较好的筛选效果,最好将细胞稀释至丰度不超过25%。
2)每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。
3)筛选7天后观察并评估细胞克隆(集落)的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间,这取决于宿主细胞类型,转染,以及筛选效果。
4)挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板,继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。
5)之后更换正常培养基培养即可。
北京潮霉素B试剂价格
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·2×Tris-Tricine-SDS-PAGE 上样缓冲液 (含DTT)
编号:QN1085
英文名称:Tris-Tricine-SDS-PAGE Loading buffer,2×(with DTT)
规格:10ml
本产品适用于Tricine-SDS-PAGE电泳时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,考马斯亮蓝,缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷,这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖,消除了各种蛋白质本身电荷的差异,SDS还可以断开分子内和分子间的氢键,破坏蛋白质分子的二级和三级结构,DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键,破坏蛋白质结构,消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白(亚单位),电泳速度只是与其分子量大小有关。考马斯亮蓝用作电泳时的指示剂,可大概指示电泳结束的时间。

使用方法:
1.请按每20微升蛋白样品加入20微升上样缓冲液的比例来使用。如果蛋白浓度过高,可用双蒸水稀释。
2.混匀后,100℃水浴加热5~10分钟,使蛋白变性。
3.冷却至室温后,离心数秒后,混匀再离心30秒取上清直接上样即可。

注意事项:本试剂因含DTT,有一定的毒性,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。

·O-苄基羟胺盐酸盐
编号:QN0864
英文名称:Benzylhydroxylamine hydrochloride
规格:5g
CAS号:2687-43-6

·尿酸酶
编号:QN0421
英文名称:Uricase
规格:500U|1KU
本品仅可用于生化研究,例如可用于检定血清和尿中的尿酸。

别名:环拉酸
CAS号:9002-12-4
储存条件:-20℃
酶活:10units/mg
性状:微绿色结晶或有光泽透蝗条纹片。几乎不溶于水


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HC0038 黑色酶标板(不可拆)25块/包
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