谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒(可见光比色法)

谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒(可见光比色法)

价格: ¥100

品牌:万类生物 品牌认证

货号:WLA117

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规格 :50T

万类生物试剂促销:试剂盒8折优惠,谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒(可见光比色法)-50T 原价100元,现价80元。

产品名称:谷草转氨酶(AST/GOT)试剂盒(可见光比色法)

产品概述:AST/GOT能使α-酮戊二酸和天门冬氨酸转换氨基和酮基,生成谷氨酸和草酰乙酸。草酰乙酸在反应过程中可自行脱羧成丙tong酸。丙tong酸与2,4-二硝基ben肼反应生成2,4-二硝基ben腙,在碱性溶液中显红棕色。比色后,查标准曲线,可求得酶活力单位。

包装信息:
试剂名称 WLA117
(50T)
保存条件
基质缓冲液 50ml 4℃,避光
2,4-二硝基ben肼 50ml 4℃,避光
4mol/L 氢氧hua钠 溶液 50ml 室温密封
2mmol/L丙tong酸钠标准液 1支 4℃
0.1mol/L磷酸盐缓冲液 1支 4℃

保存日期:本试剂盒自订购之日起6个月内有效。

操作流程:
1. 试剂配制 :0.4mol/L氢氧hua钠 溶液的配制 : 临用时按4mol/L 氢氧hua钠溶液:双蒸水=1:9 的比例稀释,需多少配多少 , 室温密封保存。
2. 操作表:

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混匀后,37℃水浴30min 混匀后,37℃水浴20min 混匀,室温放置5min,波长505nm,光径1cm,双蒸水调零,测定各管吸光度OD值,以(绝对OD值=测定管OD值-对照管OD值),查标准曲线,求得相应的AST/GOT活力单位。

注意事项:
1. 严重脂血、黄疸或溶血血清可能会引起测定管吸光度增加,因此,检测此类标本时,应该做血清标本对照管。
2. 一般血清标本内源性丙tong酸很少,血清对照管吸光度值接近试剂空白管(以0.1ml蒸馏水代替血清,其他和对照管同样操作)。所以,成批标本测定时,一般不需要每一标本都作本身血清对照管,以试剂空白管代替即可,但对超过正常的血清标本应进行复查,复查时,每份标本应作对照管。
3. 当血清标本酶活力超过150卡门氏单位时,应将血清用生理盐水稀释5倍或10倍后进行测定。
4. 加入2,4-二硝基ben肼溶液后,应充分混匀,使反应完全,加氢氧hua钠溶液方法要一致,不同方法会导致吸光度读数的差异。
5. 比色法中常用的有赖氏法及金氏法。赖氏法标准曲线所定单位数,使用实验方法和卡门氏分光光度法作对比测定求得的。以卡门氏单位报告结果,比较准确。
卡门氏单位定义:1ml血清,反应液总容量3ml,340nm波长,1cm光径,25℃,1min内所生成的丙tong酸,使NADH氧化成NAD+而引起吸光度每下降0.001为一个卡门氏单位。
6. 血清中AST/GOT在室温(25℃)可保存2天,在0~4℃可保存一周,在-25℃可保存一个月。
7. 1卡门氏单位=0.482IU/L,25℃

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附肝脏样本前处理:
准确称取组织重量,按重量(g):体积=1:9 的比例,加入9倍体积的生理盐水,冰水条件下机械匀浆,制备成10%的组织匀浆,2500转/分,离心10分钟,取上清液,再用生理盐水10倍稀释成1%的浓度待测。(同时取部分上清液测蛋白浓度,蛋白定量试剂盒本公司有售,货号为WLA004)


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