靶基因筛查 -- 靶基因鉴定（luciferase报告基因表达载体的构建与检测)

服务名称 ：靶基因筛查 -- 靶基因鉴定（luciferase报告基因表达载体的构建与检测)

提供商 ：达鹊生物

当miRNAs与靶基因的3’UTR结合后，主要抑制mRNA的翻译，可以Western Blot检测靶蛋白的表达水平；也有部分表现为对标靶mRNA的降解，可以采用qRT-PCR进行检测。但无论那一种方法，都不能有效说明是miRNAs直接作用的结果。直接的证据在于Sensor reporter的构建与活性检测，达鹊生物的技术人员利用Promega特有psiCHECK质粒，对miRNAs与靶基因3’UTR的关系作出准确判断。


图1：靶基因3’ UTR sensor reporter的构建


图2：Luciferase检测原理

服务优势：
★ 采用Promega公司特有psiCHECK质粒；
★ 所采用的Luciferase双萤光报告系统，可以获得宽泛的线性定量范围与极高 的灵敏度；
★ 采用瞬时转染技术，操作简便、快速，周期短，适用于绝大多数细胞类型。


图3：psiCHECK质粒图谱

服务流程：

★ PCR扩增靶基因的3’UTR，或直接合成结合位点序列（1-3次重复）；

★ 将上述DNA片段克隆至报告载体psiCHECK质粒；

★ 合成miRNA 模拟物；

★ 将报告载体与miRNA模拟物共转待检细胞；

★ 多功能酶标仪检测报告基因的表达水平。

客户提供：

miRNA与靶基因的信息，相应检测细胞株。

我们提供：

克隆有靶基因3’UTR或结合位点序列的报告质粒，检测结果与完整的实验报告。

质量保证：

正确的测序结果，阳性对照具有明确的移植效果。