PCR Mix DNA扩增预混液 P2011-P2015

保存条件 ：-20℃冻存

保质期 ：两年

库存 ：大量现货

供应商 ：东盛生物

规格 ：1ml/1ml*5/1ml*10/1ml*50/1ml*100

PCR Mix

产品组分
P2011
2×PCR Mix 1ml 1支
超纯水 1ml 1支

P2012
2×PCR Mix 1ml 1支×5
超纯水 1ml 1支×5

P2013
2×PCR Mix 1ml 1支×10
超纯水 1ml 1支×10

P2014
2×PCR Mix 1ml 1支×50
超纯水 1ml 1支×50

P2015
2×PCR Mix 1ml 1支×100
超纯水 1ml 1支×100

注： 本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。

保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。

产品说明
PCR Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分（模板与引物除外）。使用时，仅需在扩增
体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染（加样次数减少）同时，由于体系内含有增强剂，能够显著增强PCR扩增的
灵敏度。扩增产物具有3’-dA突出端。
Taq DNA聚合酶是嗜热性细菌Thermus aquaticus来源的热稳定重组型Taq DNA聚合酶，分子量为94 KD。扩增片段的长度可达5 kb（简单模板）。延伸速度为
0.9-1.2 kb/ min（70-75 ℃）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无3’→5’外切酶活性。

产品特点

• 使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
• 快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
• 可重复：降低污染和加样错误风险

产品用途

• 高通量PCR检测。
• 高重复性PCR检测。
• 制备TA克隆用的PCR产物。

活性定义
一个活性单位（U）指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。

质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置
一周，扩增活性无明显改变。

2×PCR Mix(前名Taq Mix）的组分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl₂
0.4 mM dNTP混合物
0.1 U/μlTaq DNA聚合酶
溴酚蓝等

应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。（Taq Mix即PCR Mix）

以λDNA为模板，扩增1kb片段。
λ DNA（2.5 ng/μl） 1μl
Primer 1（10μM ） 2μl
Primer 2（10μM） 2μl
2×PCR Mix 25μl
dd H₂O 补足至50μl

反应条件
95℃ 3 min
95℃ 30 sec
55~68℃ 30 sec 30 Cycles
72℃ 1~2 min
72℃ 10min


备注：
1 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
2 模板DNA推荐用量（50 μl PCR反应体系）
人类基因组DNA 0.1 μg ---1 μg
λDNA 0.5 ng---5 ng
质粒DNA 0.1 ng-10 ng
大肠杆菌DNA 10 ng-100 ng

Q&A
问：PCR Mix的反应体系与普通Taq DNA聚合酶的反应体系有何不同？
答：PCR Mix的反应体系中除Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、Mg²⁺等常规组分外，还包含适当比例的PCR Enhancer与稳定剂。而且，反应体系中的离子种类与
浓度也有所区别。

问：为什么PCR Mix的灵敏度与扩增效率会高于普通Taq DNA聚合酶？
答：这是由于东盛对PCR Mix反应缓冲液中的成分与浓度进行了优化。我们在TaqMix反应缓冲液中添加了适当比例的PCR Enhancer，提高了聚合酶的热稳定性，
显著降低DNA二级结构对于PCR扩增的影响。同时，对PCR Mix反应缓冲液中的离子浓度与比例进行优化，使得聚合酶处于最适活性状态，从而获得了最佳的扩
增效率。

问：为什么PCR Mix的重复性更好？
答：这是由于PCR Mix是规模化工业生产，PCR体系组分的浓度与比例一致性好，且减少多种溶液被PCR模板污染的可能性，以及在加样过程中人为造成的误
差，大大提高了实验的重复性，特别适合高通量与高重复性PCR检测。
问：PCR Mix的扩增产物能否直接进行TA克隆？
答：可以直接进行TA克隆。