Taq DNA聚合酶(Hieff Taq DNA Polymerase) Taq酶

产品信息

产品名称	产品编号	规格	价格（元）
Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶	10101ES80	1000 U	155.00
Hieff® Taq DNA Polymerase DNA聚合酶	10101ES90	5×1000 U	735.00

产品描述

Hieff^® Taq DNA Polymerase是嗜热性Thermus aquaticus表达的热稳定重组型DNA聚合酶，分子量为94 KD。具有5’→3’聚合酶活性和5’→3’外切酶活性，无3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3′-dA，可直接用于TA克隆。

产品组分

编号	组分	产品编号/规格
		10101ES80（1000 U）	10101ES90（5×1000 U）
10101-A	10×Taq Buffer (Mg2+ Free)	4×1 mL	20×1 mL
10101-B	25 mM MgCl2	2×1 mL	10×1 mL
10101-C	Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	200 μL	5×200 μL

产品应用

基因型鉴定、菌落PCR等常规PCR。

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，74℃，30 min内，摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位（U）。

质量控制

核酸外切酶残留检测：10 U本品和0.5 μg λDNA-Hind Ⅲ，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

切口酶残留检测：10 U本品和0.5 μg IL23R质粒，37℃下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。

RNase残留检测：10 U本品和0.5 μg 293T细胞总RNA，37℃下孵育1 h，RNA的电泳谱带无变化。

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

1）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
2）本产品仅作科研用途！

PCR反应体系（冰上配制）

组分	体积（μL）	终浓度
ddH2O	to 50	-
10×Taq Buffer(Mg2+ Free)	5	1×
25 mM MgCl2	3	1.5 mM
dNTP Mix (10 mM each)	1 μL	0.2 mM
模板DNA	optional	-
引物1(10 μM)	2 μL	0.4 μM
引物2(10 μM)	2 μL	0.4 μM
Hieff® Taq DNA Polymerase (5 U/μL)	0.4 μL	0.04 U/μL

【注】：
1）Mg²⁺ 终浓度：Mg²⁺最佳浓度为1.5-2 mM，如有需要，可0.2-0.5 mM为间隔向上摸索Mg²⁺最佳使用浓度。
2）聚合酶添加：室温下聚合酶有一定程度的5’-3’聚合酶活性，为了防止非特异性扩增，建议将聚合酶在最后一步加到反应体系中。
3）聚合酶浓度：推荐使用0.04 U/μL。可以在0.025-0.04 U/ μL之间进行优化。
4）不同模板的推荐使用量（50 μL反应体系）：

模板种类	扩增片段
基因组DNA	50 ng～100 ng
质粒DNA	10 pg～20 ng
cDNA	1~5 μL（不超过反应体系的1/10）

PCR扩增程序

循环步骤	温度（ºC）	时间	循环数
预变性	94	30 sec-5 min	1
变性	94	30 sec	35
退火	50-60	30 sec
延伸	72	60 sec/kb
终延伸	72	10 min	1

【注】：
1）预变性温度和时间：推荐使用94℃。预变性推荐时间：质粒DNA等简单模板为30 sec；cDNA、基因组DNA等复杂模板为3 min；高GC含量模板为5-10 min。
2）退火温度和时间：推荐使用60℃，也可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度。推荐退火时间设置为20 sec，可以在10-30 sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。
3）扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。

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产品名称	货号	规格
2×Hieff® PCR Master Mix (With Dye) HOT	10102ES03/08	1/5×1 mL
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