北京碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)品牌

保存条件 ：-20℃

保质期 ：长期

英文名 ：Alkaline Phosphatase

库存 ：896

供应商 ：北京百奥莱博科技有限公司

规格 ：200U

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产供应北京碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)品牌，我公司销售全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：北京碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)品牌
英文名：Alkaline Phosphatase
规格：200U
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
本品是一种热敏感的，可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶，也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。本酶是一种新型碱性磷酸酯酶，在我司的多种内切酶和PCR缓冲液中可保持100%活性，对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成，并且75℃孵育5分钟即可完全失活。

碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1)，是一类水解酶，通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等，并在碱性条件下最为有效。该酶是一组同功酶的统称。

经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团，在进行基因克隆时为避免质粒自连，可以使用本酶去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。

特点：快速去磷酸化，只需37℃孵育10分钟即可；快速失活，75℃孵育5分钟即可完全失活；使用方便，在各种内切酶和PCR缓冲液中保持100%活性，可以和质粒DNA的消化同时进行；操作步骤简单，对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤；可直接用于连接反应，经本酶脱磷，并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。

用途：通过去除载体或DNA*(代"片")段5′末端的磷酸基团，防止载体或DNA*(代"片")段自连；质粒DNA的同时内切酶消化和脱磷；通过5′末端脱磷，为5′末端磷酸化放射性标记准备模板；去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团；用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。

来源：大肠杆菌表达，表达基因为一种细菌碱性磷酸酯酶基因。

酶活性定义：37℃10分钟内，催化1μg 线性化的pUC19 DNA5′末端脱磷所需的酶量定义为一个活力单位。

纯度：不含DNA外切酶和内切酶，不含RNA酶。

酶储存溶液：20mM HEPES-NaOH(pH7.4)，1mM MgCl2，0.1mM ZnCl2，0.1% Triton X-100，50%(v/v)glycerol。

Reaction Buffer(10X)：100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃)，50mM MgCl2，1M KCl，0.2% Triton X-100，10mM 2-mercaptoethanol，1mg/ml BSA。

失活或抑制：75℃加热5分钟可以使本酶失活。金属离子螯合剂对本酶有抑制作用。

储存条件：-20℃

北京碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)品牌极具性价比，此外，我公司正火爆促销以下产品：
甲基紫 Ponceau 2R 8004-87-3
BTN130620 Poly(U)聚合酶 Poly(U) Polymerase
ARB10079 人chemerin ELISA代测服务 Human chemerin ELISA KIT
BTN120404 碱性磷酸酶,牛小肠 Alkaline Phosphatase,Calf Intestinal
BFD030 链霉素快速检测试剂盒
ARB11124 人肺炎衣原体抗体IgA(CPn-IgA)ELISA检测服务 Human chlamydia pneumoniae iga,cpn iga ELISA KIT
92-71-7 PPO 2,5-二苯基恶唑
BTN130640 核酸内切酶V Endonuclease V
蛋黄粉 ε-PL
ARB13658 兔内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)定量分析 Rabbit endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
甲基绿 1,8-ANS 7114-03-6
ARB13936 猪细胞间粘附分子1(ICAM-1)elisa检测操作说明书 Porcine intercellular adhesion molecule 1,icam-1 ELISA KIT
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·总一氧化氮检测试剂盒(硝酸盐/亚硝酸盐检测试剂盒)
编号：YT287
英文名称：Total Nitric Oxide Assay Kit
规格：50次|200次
本试剂盒采用了硝酸盐还原酶还原硝酸盐为亚硝酸盐，然后通过经典的Griess reagent检测亚硝酸盐，从而测定出总一氧化氮。一氧化氮本身极不稳定，在细胞内很快代谢为硝酸盐和亚硝酸盐，通过上述方法检测出硝酸盐和亚硝酸盐的总量，就可以推算出总的一氧化氮的量。

试剂盒组分：
样品稀释液————————15ml
NADPH——————————5mg
FAD———————————550μl
Nitrate Reductase————250μl
LDH Buffer————————550μl
LDH———————————500μl
NaNO2(1M)————————1ml
Griess Reagent I—————3ml
Griess Reagent II————3ml

本试剂盒采用了NADPH依赖性硝酸盐还原酶。高浓度的NADPH会干扰后续的检测，消除NADPH的一种常用方法就是使用LDH清除NADPH。本试剂盒采用了LDH清除NADPH的方法，使检测结果更加准确。

本试剂盒特点：
1. 对亚硝酸盐的检测下限达到2微摩尔/升，在2-80微摩尔/升的范围内有很好的线性关系。浓度过高的样品可以适当稀释后再进行检测。
2. 样品范围广，可以检测细胞裂解液、组织裂解液、细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液等中一氧化氮的含量。酚红和10%血清对测定无明显干扰。
3. 样品需要量少。根据样品中一氧化氮的浓度不同，仅需0-60微升样品。
4. 检测速度快，仅需约80分钟即可完成检测。

本试剂盒采用了间接的一氧化氮检测方法，如需检测细胞内实际的一氧化氮水平，可以采用百奥莱博的DAF-FM DA(NO荧光探针)(YT285)。

注意事项：
1. RPMI 1640等含有较高浓度硝酸盐的培养液容易对本试剂盒的检测产生干扰，请尽量避免。必需使用RPMI 1640培养液时，在检测一氧化氮前必需先换成其他适当培养液例如DMEM、MEM、F12等，或换成HBSS或PBS等。
2. 推荐选购百奥莱博的细胞与组织裂解液(一氧化氮检测用)(YT045)用于细胞或组织样品的裂解。也以自行选择适当方式制备细胞或组织样品的裂解液用于总一氧化氮的检测，但需注意自行选择的方式可能会干扰试剂盒检测时的酶反应而影响检测效果。检测细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液中的总一氧化氮含量时，不需要选购YT045。YT045裂解获得的样品还可以用于蛋白浓度的检测以及Western印迹检测，但需注意YT045中不含蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂。
3. 检测反应必须避光进行。
4. 由于检测过程中有还原反应，凡是影响还原反应的氧化或还原试剂要注意避免，例如常用的还原剂DTT和巯基乙醇。

储存条件：-20℃避光，有效期12个月。


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·CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
编号：YT157
英文名称：CFDA SE Cell Proliferation Assay and Tracking Kit
规格：2000次
本试剂盒是基于一种新型荧光探针CFDA SE的用于细胞增殖检测和细胞荧光示踪的检测试剂盒。CFDA SE目前被广泛用于替代MTT法或[3H]-thymidine掺入等其它细胞增殖检测方法。基于CFDA SE荧光标记的细胞增殖检测和[3H]-thymidine掺入、BrdU标记获得的检测结果完全一致，但同时可以提供更多的细胞增殖信息。使用CFDA SE检测可以提供整个细胞群中有多少比例的细胞分裂了1次、2次或更多次数，同时如果和其它荧光探针联用，可以获取不同分裂次数细胞的其它相关信息。

CFDA-SE的全称为Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester，分子式为C29H19NO11，分子量为557.47，CAS number为150347-59-4。CFDA SE可以通透细胞膜，进入细胞后可以被细胞内的酯酶(esterase)催化分解成CFSE，CFSE可以偶发性地(spontaneously)并不可逆地和细胞内蛋白的Lysine残基或其它氨基发生结合反应，并标记这些蛋白。在加入荧光探针CFDA SE后大约24小时，即可充分标记细胞。被CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定，稳定标记的时间可达数个月。CFDA SE标记细胞的荧光非常均一，比以前使用的其它细胞示踪荧光探针例如PKH26的荧光更加均一，并且分裂后的子代细胞的荧光分配也更均匀。

由于CFDA SE标记细胞的荧光非常均匀和稳定，每分裂一次子代细胞的荧光会减弱一半，这样通过流式细胞仪检测就可以检测出没有分裂的细胞，分裂一次的细胞(1/2的荧光强度)，分离两次的细胞(1/4的荧光强度)，分裂三次的细胞(1/8的荧光强度)以及类似的其它分裂次数的细胞。采用CFDA SE通过流式细胞仪检测获得的检测结果参考右图。每一个峰代表一种分裂次数的细胞，从右至左的峰通常依次为分裂0次、1次、2次、3次等次数的细胞。分裂次数较多后，分裂0次或1次等没有分裂或分裂次数较少的细胞会逐渐减少直至检测不到。

使用CFDA SE可以检测分裂多达8次或更多次数的细胞增殖。目前CFDA SE标记细胞后通常用流式细胞仪进行细胞增殖检测。最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可以用于成纤维细胞、NK细胞等其它细胞的增殖检测，甚至还可以用于细菌增殖的检测。

CFDA SE标记细胞呈绿色荧光，检测时的激发波长可以选择488nm，此时的发射波长为518nm，使用流式细胞仪检测时可以采用FL1 detection channel。CFDA SE标记的细胞也可以用荧光显微镜进行观察。CFDA SE标记的细胞无论在体外还是体内都不会使邻近细胞染色。即CFDA SE荧光探针完成标记后不会从一个细胞转移到邻近细胞。CFDA SE标记细胞仅需5-15分钟即可完成。对于不同细胞，最佳标记时间需自行摸索。

本试剂盒提供了配制CFDA SE所需的溶液以及CFDA SE进行细胞标记时所需的配套试剂。如果每个检测样品的荧光探针标记体积为1ml，本试剂盒共可以检测2000个样品。



试剂盒组份：
CFDA SE——————————————1管
CFDA SE溶剂————————————1ml/管，共两管
CFDA SE细胞标记液(10X) ——————100ml/瓶，共两瓶

注意事项：
1. CFDA SE配制成储存液后宜在一个月内使用完毕，最长不宜超过2个月。CFDA SE易被水解，在水溶液中会很快变质。请在使用过程中避免接触水。在标记细胞的过程中和水接触是在许可的范围内的。
2. CFDA SE溶剂在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
3. 荧光染料均存在淬灭问题，请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。

储存条件：-20℃，有效期6个月。

北京百莱博科技有限公司是工具酶产品的专业生产供应销售商，恭候您的咨询选购北京碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)品牌。